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Chemie in der Biomedizin
Strukturanalyse und biochemische Funktionen von Vitamin C
Chemische Struktur von L-Ascorbinsäure (Vitamin C)
Novartis Schullabor, Kurs BioChemie 2015
Beachten Sie die Laborregeln!
Inhalt
Vorbereitungen 1 ......................................................................................................................... 3
Vorbereitungen 2 ......................................................................................................................... 4
Vorbereitungen 3 ......................................................................................................................... 5
Experiment 1: Enzymatische Oxidation ....................................................................................... 6
Methode: Kinetik mit einem Enzym als Bio-Katalysator ........................................................ 6
Laboranleitung ..................................................................................................................... 7
Experiment 2: Konzentrationsbestimmung von Ascorbinsäure .................................................. 10
Methode: Quantifizierung .................................................................................................. 10
Laboranleitung ................................................................................................................... 10
Experiment 3: Absorptionsspektrum von Ascorbinsäure ............................................................ 13
Methode: Wavelength Scan (Wellenlängen Scan) .............................................................. 13
Laboranleitung: .................................................................................................................. 14
Herausgeber: Novartis Pharma AG, CH-4002 Basel
Gesche Standke
Version 1-2015
Kontaktadresse:
Novartis Pharma AG
Dr. Gesche Standke
WKL-122.2.26A
Postfach
CH-4002 Basel Tel. 061/696 13 72
E-Mail: [email protected]
Internet: www.novartis.ch/de/ueber-uns/unser-engagement/learn-life/schullabor
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Vorbereitungen 1
Phosphatpuffer System
1. Lösen Sie 3,55 g Na2HPO4 (*Mw = 142g/mol) in 500ml destilliertem Wasser.
2. Lösen Sie 3,4 g KH2PO4 (*Mw = 136g/mol) in 500ml destilliertem Wasser.
Sie erhalten jeweils eine 0,05 M Lösung.
Beschriften Sie 3 Flaschen mit P1 bis P3. Durch Mischung der beiden Lösungen erhalten Sie
folgende Puffer:
P
Na2HPO4 0,05 M KH2PO4 0,05 M Volumen
pH Vernier
1
0.5 ml
99.5 ml
100 ml
2
10 ml
190 ml
200 ml
3
100 ml
100 ml
200 ml
Messen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Schrauben Sie die kleine Flasche vom Sensor auf. Ziehen Sie die Flasche und auch den
Deckel von der Glaskugel des Sensors. Stellen Sie die Flasche mit Deckel sicher ins
Regal!
Spülen Sie die Sonde mit einer Spritzflasche über einem Becherglas ab. Spülen Sie
dabei nur den Glasteil der Sonde!
Schliessen Sie die Sonde an LabQuest2 an. Die Sonde wird automatisch erkannt.
Die Messung sollte mindestens 20 Sekunden dauern bis ein stabiler Wert erreicht ist.
Messen Sie nacheinander die pH-Werte der Lösungen. Spülen Sie nach jeder Messung
die Sonde mit Wasser.
Für Experiment 3 messen Sie in einem Reagenzglas den pH-Wert von:
Puffer P2
2,4 ml
7.
8.
9.
0,2 M HCl
0,3 ml
pH
Die gespülte Sonde kann anschliessend wieder in der kleinen Flasche mit Salzlösung
aufbewahrt werden. Ziehen Sie erst den Deckel über die Sonde und schrauben Sie dann
die Flasche an. Leeren Sie das Reagenzglas am Spültisch und legen Sie es dann in den
Korb.
Für Experiment 1 füllen Sie 6 Reagenzgläser mit Puffer P3 und beschriften diese mit P3!
Die drei Flaschen mit P1 – P5 stellen Sie für die nächsten Versuche zentral hin.
*Definition:
1 M = das Mw in g pro 1 Liter Wasser/Puffer
Verdünnung 1:10 heisst 1 Teil Konzentrat plus 9 Teile Wasser/Puffer ergibt 10 Teile
3
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Vorbereitungen 2
Ascorbinsäure-Lösungen
Ascorbinsäure ist in Lösung labil. In saurer Lösung ist das Molekül stabiler, aber bei
Raumtemperatur nicht lange haltbar. Bereiten Sie für die Experimente eine frische,
hochkonzentrierte Stammlösung vor.
*L-Ascorbinsäure
Mw = 176 g/mol
*D-Isoascorbinsäure Mw = 176 g/mol
Puffer P2 und P3 erhalten Sie von Gruppe 1!
1. Wiegen Sie auf einem neuen Wägeschälchen mit der Analysenwaage 88 mg
Ascorbinsäure ab.
2. Pipettieren Sie 10 ml Phosphatpuffer P2 in ein 15 ml-Falcon-Röhrchen (blauer Deckel)
und geben Sie die Ascorbinsäure hinzu. . Schliessen Sie den Deckel und schütteln Sie
gut, damit sich das Pulver vollständig löst. Beschriften Sie das Röhrchen mit „Asc-Konz“.
3. Messen Sie im Messzylinder 50ml Phosphatpuffer P2 ab und füllen Sie damit das 50 mlFalcon-Röhrchen (blauer Deckel). Pipettieren Sie 0,5 ml des Konzentrats aus dem 15
ml-Falcon-Röhrchen „Konz“ hinzu. Schliessen Sie den Deckel und schütteln Sie gut.
Beschriften Sie das Röhrchen mit „Asc“.
4. Wiederholen Sie Punkt 1-2 mit Isoascorbinsäure! Beschriften Sie die Röhrchen mit
„Isoasc-Konz“ bzw. „Isoasc“.
5. Stellen Sie alle Lösungen ins Eis!
6. Für Experiment 1 beschriften Sie je 6 Reagenzgläser mit L-Asc bzw. D-Isoasc und
pipettieren Sie jeweils:
L-Asc
D-Isoasc
Asc
2 ml
Isoasc
2 ml
Puffer P3
10 ml
10 ml
*Definition:
1 M = das Mw in g pro 1 Liter Wasser/Puffer
Verdünnung 1:10 heisst 1 Teil Konzentrat plus 9 Teile Wasser/Puffer ergibt 10 Teile
4
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Vorbereitungen 3
Enzympräparation als Rohextrakt
1. Schälen Sie von der grünen Schale eines Zucchini ca. ein 5cm Stück ab.
2. Wiegen Sie 20g der Zucchinischale im Becher des Stabmixers ab.
3. Messen Sie im Messzylinder 100ml Puffer P3 ab. Giessen Sie die 100ml
Puffer P3 zu den Zucchinistücken.
4. Pürieren Sie die Mischung mindestens 60 Sekunden auf höchster Stufe bis
ein homogener Extrakt entsteht.
5. Schneiden Sie die Spitze einer blauen Pipettenspitze ab, damit sie nicht
verstopft. Pipettieren Sie in 3 der 2ml-Röhrchen je 2 ml des Safts. Werfen
Sie gebrauchten Spitzen in den Entsorgungsbeutel ab.
6. Zentrifugieren Sie die Röhrchen 5 Minuten bei 13.400 rpm. Achten Sie
darauf, dass der Rotor austariert ist!
7. Inzwischen beschriften Sie 6 Röhrchen auf dem Deckel mit A und weitere
6 Röhrchen auf dem Deckel mit B.
8. Pipettieren Sie 1 ml Überstand der zentrifugierten Proben in 3 grüne
Röhrchen. Werfen Sie die Röhrchen mit den Zucchiniresten in den
Entsorgungsbeutel.
9. Pipettieren Sie in die 12 Röhrchen je 0,2 ml Enzymlösung aus den grünen Röhrchen.
10. Stellen Sie die Röhrchen mit A für 15 Minuten bei 95°C in den Heizblock. Die
Röhrchen mit B bleiben auf Eis. Nach 15 Minuten bei 95°C stellen Sie auch
Röhrchen A auf Eis.
11. Inzwischen räumen Sie auf! Werfen Sie die Zucchinireste in den blauen
Eimer. Spülen Sie das gebrauchte Geschirr ab und legen Sie es auf den
Spütisch.
5
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Experiment 1: Enzymatische Oxidation
Methode: Kinetik mit einem Enzym als Bio-Katalysator
Das Kupfer-Enzym Ascorbat Oxidase (EC 1.10.3.3) katalysiert spezifisch und effizient die
Oxidation der L-Ascorbinsäure (Asc) zur Dehydroascorbinsäure (DHAsc). Es ist in vielen
Pflanzen vorhanden und reguliert das Verhältnis von oxidiertem und reduziertem Glutathion und
NADPH in der Pflanzenzelle.
Asc + ½ O2 → DHAsc + H2O
Enzyme sind oft stereospezifisch und beschleunigen eine Reaktion enorm. Die enzymatische
Katalyse, das heisst die Aktivität des Enzyms, kann durch die Messung der
Reaktionsgeschwindigkeit bestimmt werden als Stoffumsatz pro Zeiteinheit:
-ΔAbs 265nm/Δt = relative Enzymaktivität
Es wird photometrisch die Abnahme von Ascorbinsäure als Abnahme der Absorption bei 265nm
gemessen. DHAsc hat bei 265nm keine Absorption.
Material
Holen Sie sich von der Vorbereitung
Je ein Reagenzglas mit:
Phosphatpuffer P3
L-Asc
D-Isoasc
und die
Enzymlösungen:
Röhrchen mit A
Röhrchen mit B
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Laboranleitung
Einrichten des Photometers
1. Das Photometer muss 20 Minuten vor Messbeginn
eingeschaltet werden.
Auf dem Laptop ist das Programm UV Professional aktiv.
Starten Sie mit New File > Kinetics, siehe Abbildung 1.
2. Überprüfen Sie die Einstellungen (Abbildung 2):
 Test Mode Absorbancy Data (Abs)
 Wavenlength Setup 265.0 nm
 Scale Setup Top: 1.500 Abs Bottom:0.000
Abs
 Start Time 0 s
 End Time 60 s
 Interval 2 Second
 Display Setup: Tick Scale Grid und Data
Table
Abbildung 1
3. Klicken Sie dann OK.
Abbildung 2
4. Pipettieren Sie 3 ml Puffer P3 in die Quarz Küvette. Fassen Sie die Küvette nur an den
matten Seiten an. Stellen Sie die Küvette dann in den vorderen Probenhalter des Photometers.
Eine matte Seite zeigt zu Ihnen, die klaren Seiten befinden sich dann im Lichtstrahl. Schliessen
Sie den Deckel und starten Sie am Laptop das Programm mit dem „Set blank“ button:
Damit setzten Sie die Absorption von Lösemittel und Küvette auf 0.000 Abs.
5. Giessen Sie den Küvetteninhalt in ein Becherglas und kehren Sie die leere Küvette zum
Abtupfen auf ein Papiertuch. Wischen Sie nicht!
7
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Messen
1. Pipettieren Sie in die Quarz Küvette 3ml aus Reagenzglas L-Asc.
2. Stellen Sie die Quarz Küvette in den vorderen Probenhalter des Photometers. Fassen Sie die
Küvette nur an den matten Seiten an. Die matte Seite zeigt zu Ihnen. Schliessen Sie den
Deckel.
Machen Sie den nächsten Schritt zu zweit! Lesen Sie erst!
3. Schnell: Nehmen Sie mit der Pipette 0,1ml Probe A auf. Starten Sie am Laptop das
Messprogramm
. Öffnen Sie das Photometer und pipettieren Sie jetzt 0,1 ml Probe A in die
Küvette. Rühren Sie einmal gut um. Schliessen Sie den Deckel wieder und warten Sie, bis das
Messprogramm abgelaufen ist.
Die Messung sieht anfangs etwa so aus:
Die Absorption bei t=0 zeigt die Ausgangskonzentration der
Ascorbinsäurelösung. Der Extrakt enthält Substanzen, die ebenfalls bei
265nm absorbieren. Daher steigt die Absorption nach Zugabe des Extrakts
und Schliessen des Deckels.
Deckel
auf
4. Nach Beenden der Messung speichern Sie entsprechend der Aufforderung die Messung mit
Datum, Ihren Initialen und Probennummer, z. B. 19-7-2015 GR A
5. Giessen Sie den Küvetteninhalt in ein Becherglas. Kehren Sie die leere Küvette zum Abtupfen
auf ein Papiertuch. Wischen Sie nicht!
6. Messen Sie nacheinander von Punkt 2-4.
1
2
3
4
L-Asc 3ml
L-Asc 3ml
D-Isoasc 3ml
D-Isoasc 3ml
Probe A 0,1ml
Probe B 0,1ml
Probe A 0,1ml
Probe B 0,1ml
7. Die Dateien benötigen Sie für die Auswertung des Versuchs.
Spülen Sie gebrauchte Reagenzgläser kurz aus und legen Sie in den Korb am Spültisch.
8
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Auswertung
1. Woher wissen Sie, dass Sie eine enzymatische Katalyse anschauen?
2. Welche Probe ist eine Kontrolle und welche Probe zeigt Ihnen die katalytische Aktivität des
Enzyms? Werten Sie diese Probe bei 3. aus.
3. Ermitteln Sie aus der Messung die Anfangsgeschwindigkeit:
Suchen Sie auf dem Graph einen möglichst linearen Bereich der steilsten Kurve aus. Lesen Sie
in der Time Scan Record List, siehe unten, die Absorbance-Werte für Zeitpunkt t1 und Zeitpunkt
t2 ab, dabei sollten t1 und t2 mindestens 10 s auseinander liegen. Da die Aktivität des Enzyms
proportional der Abnahme der Absorption ist, beachten Sie das Vorzeichen.
Enzym Probe
Abs t1
Abs t2
Δ t in min
ΔAbs t2-t1 =
Abs t2 - Abs t1
- ΔAbs /min =
Geschwindigkeit
Beispiel
Probe X
0,947
0,518
10:60=0,167
- 0,43
2,57
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Experiment 2: Konzentrationsbestimmung von Ascorbinsäure
Methode: Quantifizierung
Das Lambert-Beer’schen Gesetz stellt den Zusammenhang zwischen Konzentration und
Absorption einer Lösung her:
A = c ελ d
c- Konzentration der Lösung, ελ – Extinktionskoeffizient, d - Schichtdicke
In diesem Versuch stellen Sie eine möglichst genaue Verdünnungsreihe von Ascorbinsäure her.
Von den Verdünnungen mit bekannter Konzentration messen Sie die Absorption. Tragen Sie in
einem Diagramm die Absorptionen gegen die Konzentrationen auf, erhalten Sie, wenn Sie die
Punkte verbinden, eine Gerade. Diese Eichgerade gestattet Ihnen, die Konzentrationen an
Ascorbinsäure in den anderen Versuchen zu bestimmen, vgl. Seite 5.
Konzentrationen werden in der Chemie in der Regel in Molaritäten (Mol/Liter) angegeben.
Vitamin C Gehalte in Lebensmitteln findet man hingegen in mg/100g. Beides lässt sich einfach
ineinander umrechnen.
Der Vitamin C Gehalt eines Pflanzenextrakts lässt sich mit der hier beschriebenen Methode
nicht bestimmen, da Proteine und DNA im Pflanzenextrakt ebenfalls bei 260- 280nm
absorbieren.
Material
Puffer P2
L-Ascorbinsäure
Laboranleitung
Herstellen einer Konzentrationsreihe
1. Berechnen Sie wieviel mg Ascorbinsäure in 100ml Puffer P2 gelöst werden muss, um
eine 0,01 M Ascorbinsäurelösung zu bekommen:
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
2. Stellen Sie die Lösung in einem 100ml Messkolben her. Das wird nur EINMAL gemacht!
3. Jedes Team: Scheiben Sie auf ein Reagenzglas „Asc“. Verdünnen Sie 1: 100, das
heisst 0,1 ml der 0,01 M Ascorbinsäurelösung in 9,9 ml P2. Die Asc-Lösung hat eine
Konzentration von 0,1 mM. Arbeiten Sie genau!
10
Beachten Sie die Laborregeln!
5. Beschriften Sie 5 Reagenzgläser mit 1-5.
6. Pipettieren nach der Tabelle die Konzentrationsreihe:
Nr.
Konzentration
Asc
P2
1
(0.01 mM)
0,4ml
3,6ml
2
(0.02 mM)
0,8ml
3,2ml
3
(0.03 mM)
1,2ml
2,8ml
4
(0.04 mM)
1,6ml
2,4ml
5
(0.05 mM)
2ml
2ml
Einrichten des Photometers
1. Das Photometer muss 20 Minuten vor
Messbeginn eingeschaltet werden.
Auf dem Laptop ist das Programm UV
Professional aktiv. Starten Sie mit New File >
Quantitation, siehe Abbildung 1
Abbildung 1
Überprüfen Sie die Einstellungen (Abbildung 2):
Method: First-order-zero
Standard Sample No.: 5
Conc.Unit:mM/L
Wavelength No.: Single Wavelength
Wavelength WL.1 = 265.0 nm
5
265.0
Abbildung 2
2. Pipettieren Sie 3 ml Puffer P2 in die Quarz Küvette. Fassen Sie die Küvette nur an den
matten Seiten an. Stellen Sie die Küvette dann in den vorderen Probenhalter des
Photometers. Eine matte Seite zeigt zu Ihnen, die klaren Seiten befinden sich dann im
Lichtstrahl. Schliessen Sie den Deckel und starten Sie am Laptop das Programm mit
„Set blank“.
Damit setzten Sie die Absorption von Lösemittel und Küvette auf 0.000 Abs.
3. Giessen Sie den Küvetteninhalt in ein Becherglas und kehren Sie die leere Küvette zum
Abtupfen auf ein Papiertuch. Wischen Sie nicht!
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Beachten Sie die Laborregeln!
Messen
1. Messen Sie die fünf Konzentrationen der Reihe nach. Pipettieren Sie für jede Messung
3 ml in eine Quarz Küvette.
2. Stellen Sie die Quarz Küvette mit der Probe in den vorderen Probenhalter des
Photometers. Fassen Sie die Küvette nur an den matten Seiten an. Die matte Seite zeigt
zu Ihnen. Schliessen Sie den Deckel.
3. Mit einem Doppelklick auf Absorbance der Tabelle unter der Graphik nehmen Sie die
Messung in die Tabelle auf. Mit einem Doppelklick fügen Sie die Konzentration der Probe
ins Feld „Conc.“ ein. Achtung: Schreibweise 0.1 und nicht 0,1!
4. Pipettieren Sie den Küvetteninhalt zurück in das Reagenzglas. Es sollen keine Reste in
der Küvette bleiben!
5. Wiederholen Sie die Messung mit allen Konzentrationen.
6. Mit einem Doppelklick in die Graphik wird Ihre Eichgerade erstellt.
7. Speichern Sie die gesamte Messung. Sie können mit der Eichkurve einfach für alle
Absorptionswerte die Konzentration ablesen.
Spülen Sie gebrauchte Reagenzgläser kurz aus und legen Sie in den Korb am Spültisch.
Auswertung
1. Warum müssen Sie für dieses Experiment besonders exakt arbeiten?
2. Rechnen Sie nach:
 Zucchini enthält ca. 150 mg Vitamin C pro kg. Rechnen Sie mit 1kg =1l.

Sie haben 20g Zucchini mit 80ml P3 gemixt, d.h. Verdünnung ist 1:5.

Sie haben 0,1 ml des Extrakts in 3ml P3 gemessen; Verdünnung 1:31

Wie hoch ist der Verdünnungsfaktor?_____0,0065________________

Wieviel mg/l Vitamin C sind enthalten: 150 x 0,0065 = 0,97 mg/l

Wieviel mM/l sind das? 0,97 / 176 = 0,0055 mM/l

Wie hoch wäre die Absorption bei 265nm für den frischen Extrakt:

Xxxx finden Sie bei Ihrer Eichkurve
A= Conc./(xxxx) =
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Experiment 3: Absorptionsspektrum von Ascorbinsäure
Methode: Wavelength Scan (Wellenlängen Scan)
Die chemische Struktur der Ascorbinsäure lässt sich von Hexose-Zuckern ableiten. Die
charakteristische konjugierte Endiol-Carbonyl Gruppe ist ein interessantes chemisches System.
Die Elektronen sind in dem konjugierten System delokalisiert, d.h. über den Bereich der
alternierenden Doppelbindungen verteilt. Dieser Bereich kann durch negativ geladene Reste im
Molekül erweitert werden. Je grösser die Elektronenwolke des konjugierten Systems ist, desto
grösser ist die Wellenlänge, die absorbiert wird. Ascorbinsäure absorbiert nicht sichtbares UVLicht und ist für unser Auge farblos. Die Spektralanalyse findet im UV-Bereich statt (10).
Ascorbinsäure reagiert sauer in Wasser. Es gibt eine Strukturformel für die protonierte Form und
zwei Strukturformeln für die deprotonierte Form.
- H+
L-Ascorbinsäure
Mesomerie von L- Monoascorbat
pKs1 = 4,2
In diesem Versuch wird die Änderung des Absorptionsmaximums der protonierten und
deprotonierten Form der Ascorbinsäure photometrisch gemessen. Die Absorption von
Ascorbinsäure-Lösungen mit verschiedenen pH-Werten wird mittels eines Wellenlängen Scans
im UV-Bereich aufgezeichnet.
Ascorbinsäure-Lösung wird eine Quarz Küvette übertragen und mit Hilfe des Photometers
vermessen. Die Absorptionsmaxima sind für die chemische Struktur einer Substanz
charakteristisch. Wird die Struktur der zu untersuchenden Substanz durch die Umgebung, hier
durch den pH-Wert, des Lösungsmittels beeinflusst, lässt sich der Effekt in der Spektralanalyse
zeigen.
Material:
0,2 M HCl
Puffer P2
Ascorbinsäure-Lösung:
Verdünnung 1/100 von Stammlösung „ Asc-Konz“ d.h. 0,1 ml „ Asc-Konz“ in 9,9 ml P2
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Laboranleitung:
Einrichten des Photometers
1. Das Photometer muss 20 Minuten vor Messbeginn eingeschaltet
werden.
Auf dem Laptop ist das Programm UV Professional aktiv. Starten
Sie mit New File > Wavelength Scan, siehe Bild 1.
2. Überprüfen Sie die Einstellungen (Bild 2):
Scale Setup Top: 0.900 Abs Bottom:0.000 Abs
Test Mode Absorbancy
Start WL 220.0 nm
End WL 280 nm
Intervall 1.0 nm
Slow Speed
Bild 1
3. Klicken Sie dann OK.
4. Set System Baseline:
Klicken Sie auf das Symbol
Wählen Sie „open“
Bild 2
Es öffnet sich ein Fenster.
schliessen Sie dann das Fenster mit OK.
5. Pipettieren Sie 3 ml Puffer P2 in die Quarz Küvette. Fassen Sie die Küvette nur an den
matten Seiten an. Stellen Sie die Küvette dann in den vorderen Probenhalter des
Photometers. Eine matte Seite zeigt zu Ihnen, die klaren Seiten befinden sich dann im
Lichtstrahl. Schliessen Sie den Deckel und starten Sie am Laptop das Programm mit
„Set blank“:
6. Damit setzten Sie die Absorption von Lösemittel und Küvette auf 0.000 Abs.
7. Giessen Sie den Küvetteninhalt in ein Becherglas und kehren Sie die leere Küvette zum
Abtupfen auf ein Papiertuch. Wischen Sie nicht!
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Beachten Sie die Laborregeln!
Vorbereiten der Proben
1. Nummerieren Sie 2 Reagenzgläser für die Proben.
2. Pipettieren Sie nach folgendem Schema:
Probe
Puffer P2
0,2 M HCl
1
2
2,4 ml
2,7 ml
0,3 ml
-
0,5 mM
Ascorbinsäure-Lösung (Asc 1:100)
0,3 ml
0,3 ml
Messen
1. Giessen Sie den Inhalt von Reagenzglas 1 in die Quarz Küvette. Fassen Sie die Küvette
nur an den matten Seiten an. Stellen Sie die Küvette in den vorderen Probenhalter des
Photometers. Die matte Seite zeigt zu Ihnen. Schliessen Sie den Deckel und starten Sie
am Laptop das Messprogramm.
2. Nach Beenden des Scans, speichern Sie entsprechend der Aufforderung die Messung
mit Datum, Ihren Initialen und Probennummer, z. B. 19-7-2015 GJR 1
3. Verfahren Sie mit Probe 2 analog wie Probe 1.
Spülen Sie gebrauchte Reagenzgläser kurz aus und legen Sie in den Korb am Spültisch.
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Beachten Sie die Laborregeln!
Auswertung
Tragen Sie in die Tabelle die Werte Ihrer zwei Wellenlängen Scans ein. Die pH-Werte wurden
bei Vorbereitung 1 ermittelt.
Probe
pH
Maximum
bei
Wellenlänge
(nm)
1
2
1. Warum reagiert Ascorbinsäure in wässriger Lösung sauer?
2. Welche der Strukturformeln der Ascorbinsäure ordnen Sie welchem pH-Wert zu?
A
B
C
3. Zeichnen Sie das delokalisierte Elektronensystem als Elektronenwolke über die
Strukturformeln.
16

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