Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation

Monoclonal Rabbit
Anti-Human
Postmeiotic Segregation Increased 2
Clone EP51
Code M3647
Intended use
For in vitro diagnostic use.
Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51, is intended for use in
immunohistochemistry. The antibody detects postmeiotic segregation increased 2 (PMS2) protein in both
normal and neoplastic tissue. Results aid in the classification of tumors of the intestinal tract. Differential
classification is aided by the results from a panel of antibodies. The clinical interpretation of any staining or its
absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within
the context of the patient's clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist. This antibody is
intended to be used after the primary diagnosis of tumor has been made by conventional histopathology using
nonimmunologic histochemical stains.
Synonyms for antigen
hPMS2, mismatch repair endonuclease PMS2, PMS1 protein homolog 2
Summary
and explanation
Antibodies to PMS2 are useful for identifying expression of PMS2 in tumors of the gastrointestinal tract and
associated extracolonic cancers by immunohistochemistry (IHC). The absence of PMS2 expression as
determined by IHC has been reported in colon carcinomas (1,2).
Refer to Dako’s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of
IHC procedures.
Reagent provided
Monoclonal rabbit provided in liquid form in a buffer containing 0.015 mol/L sodium azide. This product contains
stabilizing protein.
Clone: EP51. Isotype: Rabbit IgG
Concentration mg/L: See label on vial.
The protein concentration between lots may vary without influencing the optimal dilution. The titer of each
individual lot is compared and adjusted to a reference lot to ensure a consistent immunohistochemical staining
performance from lot-to-lot.
Immunogen
Synthetic peptide corresponding to residues in human PMS2 protein.
Specificity
In Western blotting of SHSY5Y cell lysates, anti-PMS2, clone EP51 recognizes a major band at 110 kDa
corresponding to the expected molecular weight of PMS2.
Precautions
1.
For professional users.
2.
This product contains sodium azide (NaN3), a chemical highly toxic in pure form. At product concentrations,
though not classified as hazardous, sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly
explosive build-ups of metal azides. Upon disposal, flush with large volumes of water to prevent metal azide
build-up in plumbing.
3.
As with any product derived from biological sources, proper handling procedures should be used.
4.
Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin.
5.
Unused solution should be disposed of according to local, State and Federal regulations.
Storage
Store at 2-8 °C. Do not use after expiration date s tamped on vial. If reagents are stored under any conditions
other than those specified, the conditions must be verified by the user. There are no obvious signs to indicate
instability of this product. Therefore, positive and negative controls should be run simultaneously with patient
specimens. If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures
and a problem with the antibody is suspected, contact Dako Technical Support.
Specimen preparation
Paraffin sections: The antibody can be used for labeling paraffin-embedded tissue sections fixed in formalin.
Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 µm.
Pre-treatment: Please refer to EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) (Code K8004) for
instruction on how to perform pretreatment of slides.
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Staining procedure
Dilution: The recommended dilution of Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2,
Clone EP51, Code M3647, is 1:40. Dilute the antibody in Dako Antibody Diluent (Code S0809). Incubate
pretreated tissue sections for 30 minutes at room temperature. These are guidelines only. Optimal conditions
may vary depending on specimen and preparation method, and should be validated individually by each
laboratory.
Negative control: The recommended negative control reagent is Dako Negative Control, Rabbit Immunoglobulin
Fraction (Solid-Phase Absorbed) (Code X0936), diluted to the same IgG protein concentration as the primary
antibody. Unless the stability of the diluted antibody and negative control has been established in the actual
staining procedure, dilute these reagents immediately prior to use. Positive and negative controls should be run
simultaneously with patient specimens.
Visualization: The recommended visualization system is EnVision FLEX, High pH (Code K8000/K8010) using a
30 minute incubation at room temperature. Follow the procedure enclosed with the selected visualization system.
The performance of this antibody should be validated when utilized with other manual staining systems or
automated platforms.
Counterstaining: The recommended counterstain is EnVision FLEX Hematoxylin (Code K8008/K8018). Nonaqueous, permanent mounting medium is recommended.
Controls: Positive and negative control tissues should be run simultaneously using the same protocol as the
patient specimens. The positive control tissue should include appendix or colon and the cells/structures should
display reaction patterns as described for this tissue in the “Performance characteristics” section.
Staining interpretation
The cellular staining pattern is predominantly nuclear.
Performance
characteristics
Normal tissues: Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51 positively
labels the nuclei of a variety of cell types in normal tissue. Although not noted in the table below, positive nuclear
staining was observed in endothelial cells in many tissue types. (3)
Tissue Type
(# tested)
Adrenal (3)
Appendix (1)
Bone marrow
(2)
Breast (3)
Cerebellum (3)
(2/3) Medulla (10-50%), nuclear
Tissue Type
(# tested)
Parathyroid
(3)
Pituitary (3)
(1/1) Epithelium (80%), nuclear
Prostate (3)
(3/3) Cortex (10-50%), nuclear
(1/1) Extra-follicular lymphocytes
(100%), nuclear
(1/1) Smooth muscle (50%),
nuclear
(2/2) Blast cells (10-20%),
nuclear
(1/1) Glandular epithelium (80%),
nuclear
(2/2) Ductal epithelium (80%),
nuclear
(1/1) Connective Tissue (30%),
nuclear
(3/3) Purkinje cells (80-90%),
nuclear
(3/3) Glial cells (50%), nuclear
Cerebrum (3)
(3/3) Glial cells (20-60%), nuclear
Cervix (3)
(3/3) Basal epithelium (80-100%),
nuclear
(3/3) Stromal cells (50%), nuclear
Colon (3)
Esophagus (3)
Heart (3)
(122447-002)
Positive Tissue Elements
(3/3) Epithelium (50-80%),
nuclear
(3/3) Lymphocytes (20-40%),
nuclear
(3/3) Connective tissue (10-40%),
nuclear
(3/3) Squamous epithelium (1050%), nuclear
(1/1) Connective tissue (30%),
nuclear
(0/1) Lymphocytes
(3/3) Cardiac cells (50-60%),
nuclear
Salivary
gland (3)
Skeletal
muscle (3)
Skin (3)
Small
intestine (3)
Spleen (3)
Stomach (3)
Positive Tissue Elements
(3/3) Epithelium (20-80%), nuclear
(3/3) Endocrine cells (50-90%),
nuclear
(3/3) Glandular and ductal
epithelium (40-90%), nuclear
(3/3) Stromal cells (50-70%),
nuclear
(3/3) Ductal epithelium (60-80%),
nuclear
(3/3) Glandular epithelium (2080%), nuclear
(1/1) Smooth muscle (30%),
nuclear
(1/1) Lymphoid cells (50%), nuclear
(2/2) Connective tissue cells (20%),
nuclear
(0/3) Muscle cells
(3/3) Connective tissue (10-20%),
nuclear
(2/2) Basal epithelium (50-80%),
nuclear
(3/3) Sweat gland (30-90%),
nuclear
(3/3) Epithelium (60-80%), nuclear
(3/3) Smooth muscle (30-40%),
nuclear
(3/3) Resting lymphocytes (2070%), nuclear
(1/1) Reactive lymphocytes (80%),
nuclear
(3/3) Sinus lining (red pulp) (3050%), nuclear
(1/1) Connective tissue (30%),
nuclear
(1/2) Epithelium (10% ), nuclear
(1/1) Gastric gland (10%), nuclear
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Kidney (3)
Liver (3)
Lung (3)
Mesothelial cells
(3)
Nerve,
peripheral (3)
Ovary (3)
Pancreas (3)
(3/3) Connective tissue (30-40%),
nuclear
(3/3) Tubule (50-60%), nuclear
(3/3) Bowman’s capsule (1020%), nuclear
(3/3) Glomerulus (10%), nuclear
(0/3) Hepatocytes
(1/3) Bile duct (10%), nuclear
(2/2) Lymphocytes (80%),
nuclear
(3/3) Alveolar epithelium (5060%), nuclear
(2/2) Mesothelium (20-50%),
nuclear
(3/3) Connective tissue (50%),
nuclear
(3/3) Schwann cells (10-30%),
nuclear
(3/3) Connective tissue (30-50%),
nuclear
(3/3) Stromal cells (20-40%),
nuclear
(3/3) Follicular epithelium (1050%), nuclear
(3/3) Acinar cells (50-60%),
nuclear
Testis (3)
Thymus (3)
Thyroid (3)
Tonsil (3)
Uterus (3)
(2/2) Smooth muscle (20-60%),
nuclear
(1/1) Lymphocytes (60%), nuclear
(3/3) Leydig cells (60-80%),
nuclear
(3/3) Tubular cells (10-20%),
nuclear
(3/3) Cortex (10-30%), nuclear
(3/3) Medulla (10%), nuclear
(2/3) Follicular epithelium (50%),
nuclear
(3/3) Parafollicular C cells (1030%), nuclear
(3/3) Follicular lymphocytes (4060%), nuclear
(3/3) Extra-follicular lymphocytes
(40-50%), nuclear
(3/3) Epithelium (60-80%), nuclear
(3/3) Glandular epithelium (3050%), nuclear
(3/3) Stromal cells (50-60%),
nuclear
(3/3) Myometrium (50%), nuclear
(3/3) Islet cells (10-30%), nuclear
(3/3) Pancreatic ductal cells (1040%), nuclear
Abnormal tissues: In PMS2 deficient tumors, no nuclear staining should be observed in the neoplastic cells. A
population of benign cells should demonstrate nuclear staining and serve as an internal tissue control.
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Français
Réf. M3647
Utilisation prévue
Pour utilisation diagnostique in vitro.
L'anticorps Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51, est destiné à être utilisé
en immunohistochimie. Cet anticorps détecte la présence de la protéine 2 d'augmentation de la ségrégation postméiotique (PMS2) dans les tissus sains et néoplasiques. Les résultats obtenus contribuent à la classification des
tumeurs du tractus intestinal. La classification différentielle est facilitée par les résultats provenant d'un panel d'anticorps.
L'interprétation clinique de toute coloration ou son absence doit être complétée par des études morphologiques en
utilisant des contrôles appropriés et doit être évaluée en fonction des antécédents cliniques du patient et d'autres tests
diagnostiques par un pathologiste qualifié. Cet anticorps est destiné à être utilisé après un diagnostic primaire de
tumeur par histopathologie traditionnelle utilisant des colorations histochimiques non immunologiques.
Synonymes de
l'antigène
Résumé
et explication
hPMS2, endonucléase PMS2 de réparation des mésappariements, homologue 2 de la protéine PMS1
Les anticorps dirigés contre PMS2 sont utiles pour identifier par immunohistochimie (IHC) l'expression de la PMS2
dans les tumeurs de l'appareil gastro-intestinal et les cancers extra-coliques associés. L'absence d'expression de la
PMS2, déterminée par immunohistochimie, a été observée dans des carcinomes du côlon (1,2).
Se référer aux General Instructions for Immunohistochemical Staining (Instructions générales de coloration
immunohistochimique) de Dako ou aux instructions du système de détection relatives aux procédures IHC.
Réactif fourni
Anticorps monoclonal de lapin fourni sous forme liquide dans un tampon contenant de l'azide de sodium à
0,015 mol/L. Ce produit contient une protéine stabilisante.
Clone : EP51. Isotype : IgG de lapin.
Concentration (mg/L) : Voir l'étiquette sur le flacon.
La concentration en protéines peut varier d'un lot à l'autre sans que cela influence la dilution optimale. Le titre de
chaque lot est comparé et ajusté par rapport à un lot de référence pour assurer des performances de coloration
immunohistochimiques cohérentes d'un lot à l'autre.
Immunogène
Peptide de synthèse correspondant à des résidus sur la protéine PMS2 humaine.
Spécificité
Par Western blot de lysats de cellules SHSY5Y, l'anti-PMS2, clone EP51, marque une large bande de 110 kDa
correspondant au poids moléculaire attendu de la PMS2.
Précautions d'emploi
1.
Pour utilisateurs professionnels.
2.
Ce produit contient de l'azide de sodium (NaN3), un produit chimique hautement toxique à l'état pur. Aux
concentrations du produit, bien que non classé comme dangereux, l'azide de sodium peut réagir avec le cuivre et
le plomb des canalisations et former des accumulations d'azides métalliques hautement explosives. Lors de
l'élimination, rincer abondamment à l'eau pour éviter toute accumulation d'azide métallique dans les canalisations.
3.
Comme avec tout produit d'origine biologique, des procédures de manipulation appropriées doivent être
respectées.
4.
Porter un équipement de protection individuelle approprié pour éviter tout contact avec les yeux et la peau.
5.
Les solutions non utilisées doivent être éliminées conformément aux réglementations locales, nationales et
européennes.
Conservation
Conserver entre 2 et 8 °C. Ne pas utiliser après la date de péremption imprimée sur le flacon. Si les réactifs sont
conservés dans des conditions autres que celles indiquées, celles-ci doivent être validées par l'utilisateur. Il
n'existe pas de signe particulier pour indiquer l'instabilité de ce produit. Par conséquent, des contrôles positifs et
négatifs doivent être testés en même temps que les échantillons de patient. Si une coloration inattendue est
observée, qui ne peut être expliquée par des différences dans les procédures du laboratoire et qu'un problème lié
à l'anticorps est suspecté, contacter l'assistance technique Dako.
Préparation des
échantillons
Coupes en paraffine : L'anticorps peut être utilisé pour le marquage des coupes de tissus incluses en paraffine et
fixées au formol. L'épaisseur des coupes d'échantillons tissulaires doit être d'environ 4 µm.
Prétraitement : Se reporter à la notice de la solution EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x)
(réf. K8004) pour des instructions concernant le prétraitement des lames.
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Procédure de
coloration
Dilution : La dilution recommandée pour l'anticorps Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation
Increased 2, Clone EP51 réf. M3647, est de 1:40. Diluer l'anticorps dans le diluant Dako Antibody Diluent
(réf. S0809). Incuber les coupes de tissu prétraitées pendant 30 minutes à température ambiante. Il ne s'agit là
que de conseils. Les conditions optimales peuvent varier en fonction de l'échantillon et de la méthode de
préparation, et doivent être validées individuellement par chaque laboratoire.
Contrôle négatif : Le réactif de contrôle négatif recommandé est le Dako Negative Control, Rabbit
Immunoglobulin Fraction (Solid-Phase Absorbed) (réf. X0936) dilué à la même concentration en protéines IgG
que l'anticorps primaire. À moins que la stabilité de l'anticorps dilué et du contrôle négatif n'ait été établie lors de
la procédure de coloration en cours, diluer ces réactifs immédiatement avant utilisation. Des contrôles positifs et
négatifs doivent être testés en même temps que les échantillons du patient.
Visualisation : Le système de visualisation recommandé est le système EnVision FLEX, High pH
(réf. K8000/K8010) avec une durée d'incubation de 30 minutes à température ambiante. Suivre la procédure
incluse dans le système de visualisation sélectionné. Les performances de cet anticorps doivent être validées
lorsqu'il est utilisé avec d'autres systèmes de coloration manuelle ou plates-formes automatisées.
Contre-coloration : Le contre-colorant recommandé est le produit EnVision FLEX Hematoxylin
(réf. K8008/K8018). L'utilisation d'un milieu de montage permanent non aqueux est recommandée.
Contrôles : Des tissus de contrôle positif et négatif doivent être testés en parallèle selon le même protocole que pour les
échantillons de patients. Le tissu de contrôle positif doit comprendre l'appendice et le côlon et les cellules/structures
doivent présenter des schémas de réaction tels que ceux décrits pour ce tissu à la section "Performances".
Interprétation de la
coloration
Le motif de coloration cellulaire est essentiellement nucléaire.
Performances
Tissus sains : L'anticorps Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51,
marque de façon positive les noyaux de divers types cellulaires dans les tissus sains. Bien que cela ne figure pas
dans le tableau ci-dessous, une coloration nucléaire a été observée dans des cellules endothéliales de nombreux
types de tissus. (3)
Type de tissu
(nb. testés)
Surrénale (3)
Appendice (1)
Moelle osseuse
(2)
Sein (3)
Cervelet (3)
Cerebrum (3)
Col de l'utérus (3)
Côlon (3)
Œsophage (3)
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Éléments tissulaires positifs
(3/3) : cortex (10-50%), coloration
nucléaire
(2/3) : médulla (10-50%),
coloration nucléaire
(1/1) : épithélium (80%),
coloration nucléaire
(1/1) : lymphocytes extrafolliculaires (100%), coloration
nucléaire
(1/1) : muscle lisse (50%),
coloration nucléaire
(2/2) : blastocytes (10-20%),
coloration nucléaire
(1/1) : épithélium glandulaire
(80%), coloration nucléaire
(2/2) : épithélium canalaire
(80%), coloration nucléaire
(1/1) : tissu conjonctif (30%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules de Purkinje
(80-90%), coloration nucléaire
(3/3) : cellules gliales (50%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules gliales
(20-60%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium basal
(80-100%), coloration nucléaire
(3/3) : cellules stromales
(50%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium (50-80%),
coloration nucléaire
(3/3) : lymphocytes (20-40%),
coloration nucléaire
(3/3) : tissu conjonctif
(10-40%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium squameux
(10-50%), coloration nucléaire
Type de tissu
(nb. testés)
Parathyroïde
(3)
Hypophyse (3)
Prostate (3)
Glande
salivaire (3)
Muscle
squelettique (3)
Peau (3)
Intestin grêle
(3)
Rate (3)
Éléments tissulaires positifs
(3/3) : épithélium (20-80%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules endocrines
(50-90%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium canalaire et
glandulaire (40-90%), coloration
nucléaire
(3/3) : cellules stromales (50-70%),
coloration nucléaire
(3/3) : épithélium canalaire
(60-80%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium glandulaire
(20-80%), coloration nucléaire
(1/1) : muscle lisse (30%),
coloration nucléaire
(1/1) : cellules lymphoïdes (50%),
coloration nucléaire
(2/2) : cellules du tissu conjonctif
(20%), coloration nucléaire
(0/3) : cellules musculaires
(3/3) : tissu conjonctif (10-20%),
coloration nucléaire
(2/2) : épithélium basal (50-80%),
coloration nucléaire
(3/3) : glande sudoripare (30-90%),
coloration nucléaire
(3/3) : épithélium (60-80%),
coloration nucléaire
(3/3) : muscle lisse (30-40%),
coloration nucléaire
(3/3) : lymphocytes au repos
(20-70%), coloration nucléaire
(1/1) : lymphocytes réactifs (80%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules qui tapissent le
sinus (pulpe rouge) (30-50%),
coloration nucléaire
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(1/1) : tissu conjonctif (30%),
coloration nucléaire
(0/1) : lymphocytes
Cœur (3)
Rein (3)
Foie (3)
Poumon (3)
Cellules
mésothéliales (3)
Nerf
périphérique (3)
Ovaire (3)
Pancréas (3)
Estomac (3)
(3/3) : cellules cardiaques
(50-60%), coloration nucléaire
(3/3) : tissu conjonctif (30-40%),
coloration nucléaire
(3/3) : tubule (50-60%), coloration
nucléaire
(3/3) : capsule de Bowman
(10-20%), coloration nucléaire
(3/3) : glomérule (10%),
coloration nucléaire
(0/3) : hépatocytes
(1/3) : canal biliaire (10%),
coloration nucléaire
(2/2) : lymphocytes (80%),
coloration nucléaire
(3/3) : épithélium alvéolaire
(50-60%), coloration nucléaire
(2/2) : mésothélium (20-50%),
coloration nucléaire
(3/3) : tissu conjonctif (50%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules de Schwann
(10-30%), coloration nucléaire
(3/3) : tissu conjonctif (30-50%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules stromales
(20-40%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium folliculaire
(10-50%), coloration nucléaire
(3/3) : cellules acinaires
(50-60%), coloration nucléaire
Testicule (3)
Thymus (3)
Thyroïde (3)
Amygdale (3)
Utérus (3)
(1/1) : tissu conjonctif (30%),
coloration nucléaire
(1/2) : épithélium (10%), coloration
nucléaire
(1/1) : glande gastrique (10%),
coloration nucléaire
(2/2) : muscle lisse (20-60%),
coloration nucléaire
(1/1) : lymphocytes (60%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules de Leydig (60-80%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules tubulaires (10-20%),
coloration nucléaire
(3/3) : cortex (10-30%), coloration
nucléaire
(3/3) : médulla (10%), coloration
nucléaire
(2/3) : épithélium folliculaire (50%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules C parafolliculaires
(10-30%), coloration nucléaire
(3/3) : lymphocytes folliculaires
(40-60%), coloration nucléaire
(3/3) : lymphocytes extra-folliculaires
(40-50%), coloration nucléaire
(3/3) : épithélium (60-80%),
coloration nucléaire
(3/3) : épithélium glandulaire
(30-50%), coloration nucléaire
(3/3) : cellules stromales (50-60%),
coloration nucléaire
(3/3) : myomètre (50%), coloration
nucléaire
(3/3) : cellules des îlots
pancréatiques (10-30%),
coloration nucléaire
(3/3) : cellules canalaires
pancréatiques (10-40%),
coloration nucléaire
Tissus anormaux : Dans les tumeurs déficientes en PMS2, aucune coloration nucléaire ne doit être observée
dans les cellules néoplasiques. Une population de cellules bénignes doit présenter une coloration nucléaire et
servir de tissu de contrôle interne.
(122447-002)
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Deutsch
Code-Nr. M3647
Verwendungszweck
Zur In-vitro-Diagnostik
Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51, ist für die Verwendung in der
Immunhistochemie vorgesehen. Der Antikörper weist das Protein Postmeiotic Segregation Increased 2 (PMS2)
sowohl in normalen als auch neoplastischen Geweben nach. Die Ergebnisse tragen zur Klassifizierung von
Tumoren des Intestinaltrakts bei. Die Differenzialklassifikation wird durch die Ergebnisse eines Antikörper-Panels
unterstützt. Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden Färbung sollte durch morphologische Studien
mit geeigneten Kontrollen ergänzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Berücksichtigung der
Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden. Dieser Antikörper
kommt nach der Primärdiagnose des Tumors durch konventionelle Histopathologie unter Verwendung von
nichtimmunologischen histochemischen Färbungen zum Einsatz.
Synonyme
Bezeichnungen des
Antigens
hPMS2, Mismatch Repair Endonuclease PMS2, PMS1 Protein Homolog 2
Zusammenfassung
und Erklärung
Antikörper gegen PMS2 sind hilfreich bei der Identifizierung einer Expression von PMS2 bei Tumoren des
Gastrointestinaltrakts und assoziierten Krebsarten außerhalb des Dickdarms durch Immunhistochemie (IHC).
Das mittels IHC festgestellte Ausbleiben der PMS2-Expression wurde bei Dickdarmkarzinomen berichtet (1, 2).
Siehe General Instructions for Immunohistochemical Staining (Allgemeine Anweisungen
immunhistochemischen Färbung) oder Anweisungen des Detektionssystems für IHC-Verfahren.
Geliefertes Reagenz
zur
Monoklonaler Kaninchen-Antikörper in flüssiger Form in einem Puffer mit 0,015 mol/L Natriumazid. Dieses
Produkt enthält Proteine zur Stabilisierung.
Klon: EP51. Isotyp: Kaninchen IgG
Konzentration mg/L: Siehe Produktetikett.
Die Proteinkonzentration kann bei den Losen verschieden ausfallen, ohne die optimale Verdünnung zu
beeinflussen. Der Titer jeder Charge wird mit dem einer Referenzcharge verglichen und dieser angeglichen, um
konstante immunhistochemische Färbeergebnisse zwischen den Chargen zu gewährleisten.
Immunogen
Synthetisches Peptid, das Rückständen von humanem PMS2-Protein entspricht.
Spezifität
Beim Western-Blotting von SHSY5Y-Zelllysaten erkennt Anti-PMS2, Klon EP51, eine starke Bande bei 110 kDa,
was dem erwarteten Molekulargewicht von PMS2 entspricht.
Vorsichtsmaßnahmen
1.
2.
4.
Für geschultes Fachpersonal.
Dieses Produkt enthält Natriumazid (NaN3), eine in reiner Form äußerst giftige Chemikalie. Bei den in
diesem Produkt verwendeten Konzentrationen kann Natriumazid, obwohl nicht als gefährlich klassifiziert,
mit in Wasserleitungen vorhandenem Blei oder Kupfer reagieren und zur Bildung von hochexplosiven
Metall-Azid-Anreicherungen führen. Nach der Entsorgung muss mit reichlich Wasser nachgespült werden,
um Metall-Azid-Anreicherung zu vermeiden.
Wie bei allen aus biologischen Materialien gewonnenen Produkten müssen die ordnungsgemäßen
Handhabungsverfahren eingehalten werden.
Entsprechende Schutzkleidung tragen, um Augen- und Hautkontakt zu vermeiden.
5.
Nicht verwendete Lösung ist entsprechend örtlichen, staatlichen und EU-rechtlichen Richtlinien zu entsorgen.
3.
Lagerung
Bei 2-8 °C aufbewahren. Nicht nach dem auf dem Behä lter angegebenen Verfallsdatum verwenden. Werden die
Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt, müssen diese Bedingungen vom
Benutzer validiert werden. Es gibt keine offensichtlichen Anhaltspunkte für die mögliche Instabilität dieses
Produkts. Es sollten daher die Positiv- und Negativkontrollen gleichzeitig mit den Patientenproben mitgeführt
werden. Wenn unerwartete Anfärbung beobachtet wird, welche durch Änderungen in den Labormethoden nicht
erklärt werden kann und falls Verdacht auf ein Problem mit dem Antikörper besteht, ist bitte Kontakt mit dem
technischen Kundendienst von Dako aufzunehmen.
Gewebevorbereitung
Paraffinschnitte: Der Antikörper kann für die Markierung von formalinfixierten, paraffineingebetteten
Gewebeschnitten verwendet werden. Gewebeproben sollten in Schnitte von ca. 4 µm Stärke geschnitten werden.
Vorbehandlung: Informationen zur Durchführung der Vorbehandlung von Objektträgern finden Sie in den
Anweisungen für EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution, High pH (50x) (Code-Nr. K8004).
(122447-002)
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Färbeverfahren
Verdünnung: Die empfohlene Verdünnung des Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation
Increased 2, Clone EP51, Code-Nr. M3647, ist 1:40. Den Antikörper in Dako Antibody Diluent (Code-Nr. S0809)
verdünnen. Die vorbehandelten Gewebeschnitte 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren. Diese Angaben
sind nur Richtlinien. Optimale Bedingungen können je nach Gewebe und Vorbereitungsverfahren unterschiedlich
sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden.
Negativkontrolle: Das empfohlene Negativkontrollreagenz ist Dako Negative Control, Rabbit Immunoglobulin
Fraction (Solid-Phase Absorbed) (Code-Nr. X0936) verdünnt auf dieselbe IgG-Proteinkonzentration wie der
primäre Antikörper. Es wird empfohlen, Antikörper und Negativkontrolle unmittelbar vor deren Verwendung zu
verdünnen, außer wenn deren Stabilität im aktuellen Färbeverfahren festgelegt ist. Positiv- und Negativkontrollen
sollten zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden.
Detektionssystem: Beim empfohlenen Detektionssystem handelt es sich um EnVision FLEX, High pH (CodeNr. K8000/K8010), das bei einer Inkubation von 30 Minuten bei Raumtemperatur eingesetzt wird. Das für das
ausgewählte Detektionssystem beschriebene Verfahren befolgen. Die Leistung dieses Antikörpers sollte bei
einem Einsatz mit anderen manuellen Färbesystemen oder automatisierten Systemen validiert werden.
Gegenfärbung: Die empfohlene Gegenfärbung ist EnVision FLEX Hematoxylin (Code-Nr. K8008/K8018).
Empfohlen wird ein nicht-wässriges permanentes Eindeckmedium.
Kontrollen: Positiv- und Negativkontrollgewebe sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die
Patientenproben getestet werden. Das Positivkontrollgewebe sollte Appendix- oder Dickdarmgewebe enthalten,
und die Zellen/Strukturen sollten die für dieses Gewebe im Abschnitt „Leistungseigenschaften“ beschriebenen
Reaktionsmuster aufweisen.
Auswertung der
Färbung
Leistungseigenschaften
Das zelluläre Färbemuster ist überwiegend nuklear.
Normalgewebe: Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51, färbt die
Zellkerne einer Reihe von Zelltypen in gesunden Geweben. Obwohl dies nicht in der Tabelle unten vermerkt ist,
wurde in vielen Gewebetypen in Endothelzellen eine positive nukleare Färbung beobachtet. (3)
Tissue Type
(Gewebetyp)
(Anz. getestet)
Nebenniere (3)
Appendix (1)
Knochenmark
(2)
Brust (3)
Kleinhirn (3)
Großhirn (3)
Zervix (3)
Dickdarm (3)
Speiseröhre (3)
(122447-002)
Positive Gewebe-Elemente
(3 von 3) Cortex (10-50%),
nuklear
(2 von 3) Medulla (10-50%),
nuklear
(1 von 1) Epithel (80%), nuklear
(1 von 1) Extrafollikuläre
Lymphozyten (100%), nuklear
(1 von 1) Glatte Muskulatur
(50%), nuklear
(2 von 2) Blastzellen (10-20%),
nuklear
(1 von 1) Drüsenepithel (80%),
nuklear
(2 von 2) Duktusepithel (80%),
nuklear
(1 von 1) Bindegewebe (30%),
nuklear
(3 von 3) Purkinje-Zellen
(80-90%), nuklear
(3 von 3) Gliazellen (50%),
nuklear
(3 von 3) Gliazellen (20-60%),
nuklear
(3 von 3) Basalepithel
(80-100%), nuklear
(3 von 3) Stromazellen (50%),
nuklear
(3 von 3) Epithel (50-80%),
nuklear
(3 von 3) Lymphozyten
(20-40%), nuklear
(3 von 3) Bindegewebe
(10-40%), nuklear
(3 von 3) Plattenepithelzellen
(10-50%), nuklear
(1 von 1) Bindegewebe (30%),
nuklear
(0 von 1) Lymphozyten
Tissue Type
(Gewebetyp)
(Anz. getestet)
Nebenschilddrüse (3)
Hypophyse (3)
Prostata (3)
Speicheldrüse (3)
Skelettmuskulatur
(3)
Haut (3)
Dünndarm (3)
Milz (3)
Magen (3)
Positive Gewebe-Elemente
(3 von 3) Epithel (20-80%),
nuklear
(3 von 3) Endokrine Zellen
(50-90%), nuklear
(3 von 3) Drüsen- und
Duktusepithel (40-90%), nuklear
(3 von 3) Stromazellen
(50-70%), nuklear
(3 von 3) Duktusepithel
(60-80%), nuklear
(3 von 3) Drüsenepithel
(20-80%), nuklear
(1 von 1) Glatte Muskulatur
(30%), nuklear
(1 von 1) Lymphoide Zellen
(50%), nuklear
(2 von 2) Bindegewebszellen
(20%), nuklear
(0 von 3) Muskelzellen
(3 von 3) Bindegewebe
(10-20%), nuklear
(2 von 2) Basalepithel (50-80%),
nuklear
(3 von 3) Schweißdrüse
(30-90%), nuklear
(3 von 3) Epithel (60-80%),
nuklear
(3 von 3) Glatte Muskulatur
(30-40%), nuklear
(3 von 3) Ruhende
Lymphozyten (20-70%), nuklear
(1 von 1) Reaktive Lymphozyten
(80%), nuklear
(3 von 3) Sinuswand (rote
Pulpa) (30-50%), nuklear
(1 von 1) Bindegewebe (30%),
nuklear
(1 von 2) Epithel (10%), nuklear
P01934_002_M3647/2015.09 p. 8/9
Herz (3)
Niere (3)
Leber (3)
Lunge (3)
Mesothelzellen
(3)
Nerv, peripher
(3)
Eierstock (3)
Pankreas (3)
(3 von 3) Herzzellen (50-60%),
nuklear
(1 von 1) Magendrüse (10%),
nuklear
(3 von 3) Bindegewebe
(30-40%), nuklear
(3 von 3) Tubulus (50-60%),
nuklear
(3 von 3) Bowman-Kapsel
(10-20%), nuklear
(3 von 3) Glomerulus (10%),
nuklear
(0 von 3) Hepatozyten
(2 von 2) Glatte Muskulatur
(20-60%), nuklear
(1 von 1) Lymphozyten (60%),
nuklear
(3 von 3) Leydig-Zellen
(60-80%), nuklear
(3 von 3) Tubuluszellen
(10-20%), nuklear
(3 von 3) Cortex (10-30%),
nuklear
(3 von 3) Medulla (10%),
nuklear
(2 von 3) Follikelepithel (50%),
nuklear
(3 von 3) Parafollikuläre
C-Zellen (10-30%), nuklear
(3 von 3) Follikuläre
Lymphozyten (40-60%), nuklear
(3 von 3) Extrafollikuläre
Lymphozyten (40-50%), nuklear
(3 von 3) Epithel (60-80%),
nuklear
(3 von 3) Drüsenepithel
(30-50%), nuklear
(3 von 3) Stromazellen
(50-60%), nuklear
(3 von 3) Myometrium (50%),
nuklear
(1 von 3) Gallengang (10%),
nuklear
(2 von 2) Lymphozyten (80%),
nuklear
(3 von 3) Alveolarepithel
(50-60%), nuklear
(2 von 2) Mesothel (20-50%),
nuklear
(3 von 3) Bindegewebe (50%),
nuklear
(3 von 3) Schwann-Zellen
(10-30%), nuklear
(3 von 3) Bindegewebe
(30-50%), nuklear
(3 von 3) Stromazellen
(20-40%), nuklear
(3 von 3) Follikelepithel
(10-50%), nuklear
(3 von 3) Azinuszellen (50-60%),
nuklear
Hoden (3)
Thymus (3)
Schilddrüse (3)
Mandeln (3)
Uterus (3)
(3 von 3) Inselzellen (10-30%),
nuklear
(3 von 3) Duktuszellen des
Pankreas (10-40%), nuklear
Anormales Gewebe: Bei PMS2-defizienten Tumoren sollte sich in den neoplastischen Zellen keine nukleare
Färbung zeigen. Eine Population von gutartigen Zellen sollte eine nukleare Färbung zeigen und als interne
Gewebekontrolle dienen.
References/
Bibliographie/
Literaturnachweis
1.
2.
3.
Lynch H, Smyrk T. Hereditary nonpolyposis colorectal
cancer (Lynch syndrome). An updated review. Cancer 1996;78:1149-67.
Burgart LJ. Testing for defective DNA mismatch repair in
colorectal carcinoma. A practical guide. Arch Pathol Lab Med 2005;129:1385-9.
PMS2 clone EP51 M3647.IR087 30 Normal Report D08987
Monoclonal Rabbit Anti-Human Postmeiotic Segregation Increased 2, Clone EP51, wurde von Epitomics Inc.
unter Verwendung proprietärer Technologie mit monoklonalen Kaninchen-Antikörpern entwickelt und ist durch
die Patente Nr. 5.675.063 und 7.402.409 geschützt.
Edition/Édition/Ausgabe 09/15
(122447-002)
P01934_002_M3647/2015.09 p. 9/9

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