Chlamydia trachomatis IgA und IgG EIA Spezies-spezifische Enzymimmunoassays zum Nachweis von IgA oder IgG Antikörpern gegen Chlamydia trachomatis in Humanserum Epidemiologie und Klinik Testprinzip Chlamydia trachomatis zählt zu den häufigsten Ursachen sexuell übertragener Krankheiten weltweit. Die Inzidenz wird in Deutschland auf jährlich mehr als 300.000 geschätzt. Die Primärinfektion verläuft häufig asymptomatisch und bleibt daher unbehandelt. Die Folge sind chronische Krankheitsverläufe mit Spätmanifestationen wie Der ANI Labsystems Chlamydia trachomatis EIA ist ein indirekter Enzymimmunoassay mit Festphase-insolubilisierten synthetischen Peptidantigenen aus dem MOMP-Bereich von Chlamydia trachomatis. Diese binden in der Serumprobe vorhandene IgA oder IgG Antikörper, die im nächsten Schritt mit PODmarkierten anti-Human-IgA bzw. Anti-HumanIgG Antikörpern (Konjugat) reagieren. Spezifisch gebundene enzym-markierte Antikörper führen zum Farbumschlag des Chromogens während der Substratreaktion. • • • • • • • • Endometritis Salpingitis Periappendititis Perihepatitis Peritonitis Extrauteringravidität Arthritis Sterilität Diagnostik Zum Zeitpunkt der oftmals erst spät manifesten Symptomatik ist der direkte Erregernachweis in den meisten Fällen nicht mehr möglich. Der Nachweis spezifischer Chlamydia trachomatis Antikörper im Serum ist dann die Methode der Wahl. Aufgrund der engen Antigenverwandtschaft zwischen den Chlamydien-Spezies und der hohen Prävalenz von Chlamydia pneumoniae Antikörpern ermöglicht nur der Speziesspezifische Chlamydia trachomatis Antikörpernachweis eine zuverlässige Diagnose. Testablauf • • • • • • • • • • 180 µl Probenverdünnungslösung und 20 µl Serum/Vertiefung 30 min bei 37°C inkubieren 5 x waschen 200 µl Konjugat/Vertiefung 30 min bei 37°C inkubieren 5 x waschen 200 µl Substrat/Vertiefung 15 min bei RT im Dunkeln inkubieren 100 µl Stopplösung/Vertiefung Messen bei 450nm C. trachomatis EIA Berechnung der Ergebnisse IgG ANI Labsystems Cut-Off (CO) = 0,6 x (APC - ARB) Signal/Cut-Off (S/CO) = (AS - ARB)/CO APC = Absorption der Positiv-Kontrolle ARB = Absorption des Reagenzien-Blank AS = Absorption der Serumprobe Grenzwert für ein positives Ergebnis: Vergleichs EIA Pos Neg Pos 24 6 Neg 2 24 Spezifität S/CO > 1,0 Die Spezifität des ANI Labsystems Chlamydia trachomatis EIA wurde durch Untersuchung von Seren ein- bis fünfjähriger Kinder (n = 123) überprüft. Seren von insgesamt 735 Patienten (206 Kultur bzw. Antigen positiv; 268 Kultur negativ; 44 mit Verdacht auf C. trachomatis Infektion und 247 Blutspender) wurden mit dem ANI Labsystems Chlamydia trachomatis EIA auf spezifische Antikörper untersucht: Ergebnis: Die ANI Labsystems C. trachomatis IgG und IgA Kits zeigen eine gute diagnostische Sensitivität und Spezifität. Sensitivität n IgG (%) IgA (%) PCR bestätigte aktive C. t. Infe tion 324 69 38 Blutspender 443 6 5 Gruppe Die diagnostische Sensitivität des ANI Labsystems Chlamydia trachomatis EIA im Vergleich zu einem anderen kommerziell erhältlichen Assay wurde durch Untersuchung der Seren von 56 Patientinnen mit gesicherter Pelvic Inflammatory Disease (PID) ermittelt: C. trachomatis EIA IgA Bestellnummern: Chlamydia trachomatis IgA EIA 96 Bestimmungen HW/6111111 Chlamydia trachomatis IgG EIA 96 Bestimmungen HW/6111101 Spezies-spezifische Enzymimmunoassays zum Nachweis von IgA und IgG Antikörpern gegen Chlamydia trachomatis in Humanserum. Hersteller der Chlamydia EIAs Ani Labsystems Ltd. Oy 01720 Helsinki, Finnland ANI Labsystems Vergleichs EIA Pos Neg Pos 9 11 Neg 2 34 Sekisui Virotech GmbH Loewenplatz 5 65428 Ruesselsheim Germany Tel.: +49 (0) 61 42 / 69 09 - 0 Fax: +49 (0) 61 42 / 96 66 13 E-mail: [email protected] www.sekisuivirotech.com F_Ct_ANI_110511_04
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