平成2年度厚生省成人丁細胞白血病（ATL） の母子感染防止に関する研究 HTLV−1抗体スクリーニングの確認法 （献血者の抗ATL抗体スクリーニング陽性者の検討） 松本千恵子＊，Jo｛mne．P．Spadgro＊＊，光永滋樹＊∼ 小口 隆＊，三富斉忠＊，島田 徹＊，渡部準之助＊， 十字猛夫＊，西岡久壽彌＊，徳永栄一＊，船本剛朗＊ 要約：献血された血液のHTLV一一1抗体のスクリーニングはPA法で行われているが、抗体価の 低い検体については偽陽性が疑われている。そこでHTLV・一1を対象とした2重PCR法、お よびピオヂンラベルプライマーを用いたPCR法によリプロウイルスの検出を行ったところ、IF 法の結果と一致した・従ってHTLV−1抗体スクリーニングの確認法としてI F法が適している と考えられた。またHTLV−I Iについてこの二法のPCRを行ったところ、全く増幅は認めら れなっかた。 見出し語：I F法、PCR法、HTLV−I I 研究方法3＜PCR法＞2重PCR法はHTL ビオチンラベルプライマーを用いたPCR法は、 V−1のpX部位を対象として単核球より抽出 ピオチンラベルプライマー（SK432／HT したDNAをテンプレートとして30回増幅し、 LV−1特異的、SK111／HTLV−I I さらにnested primerを用いて二段回目を30 特異的）を用いて30回増幅した（2）。増幅 回増幅した。増幅産物はポリアクリルアミドゲ 産物はプローブ（SKl l2ct5／HLTV− ル電気泳動後エチジウムブロマイド染色で検出 1特異的、S Kl88／HTLV−I I特異的） した。この方法はHTLV−1プロウイルス1 をコートしたマイクロタイタープレートにハイ ゲノムを検出でき、プロウイルス量の多少に応 ブリダイズした後、アピジン・バーオキシダー 移て3、2、1本のバンドが見られる（1）。 ゼを結合させその酵素活性にて検出した。 ＄日本赤十字社中央血液センター （The Japahese．Red Cross Central Blood Center） 鵠飛㏄heDi砥nosticSyste皿es，Inc． 一44一 ＜HTLV−1抗体の検出＞I F法はHTLV 参考文献 −1感染細胞としてMT−2を、非感染細胞と 1）Matsumoto，C．，etaユ．ゆetectionofHu− してMo l t o−4を133の割合で混合した man T・Cell Leuke皿ia Virus Type I Pro− 細胞標本を対象とした。PA法は富士レビオの virus in an Infected Cell Line and in セロディアーATLAを用いて行った。 Periphera1 卜lononuclear Cells of Blood Donors by the 興ested Double Poly皿erase 結果：PA法、工F法と2重PCR法の比較は Cbain reaction 再ethod： （｝o聡parisoB wiしh 256検体について行い、3者とも陰性なもの 琵TLV−1触tibodyTests． J．Virol．64， 101、PA（＋〉／IF（一）／PCR（一） 5290， 1990 98検体、PA（＋）／I F（千）／PCR 2）Spadoro，，1．，et al． Detection and De− （÷）は57検体で、PA法陰性でI F法また fferentation of HTLV−I and II in C王i・ はPCR法で陽性の検体はなかった。またI F nicalSpeci皿ensusingPCRandaRapid， 法鶴性とPCR法陽性の検体は全て同一検体で non一駐adioactive 妊icrotiter Plate あった。ビオチンラベルプライマーを用いたP ムssay． ムbstracts of Human Reしroviro− CR法はPA陽性の47検体について行い、こ logy 皿eeしiag， 1991 のうちI F（一）／PCR（一）は12検体で 3）Hjeile，B．，etal．TransmissionofHT 他は全てI F（＋）／PCR（＋）となり完全 LV−II via Blood Transfusion。 Vox Sang に一致した。またこの47検体は、HTLV− 59， 119， 1990 I I特異的プライマーSK l l1およびプロ｝ ブSK188を屠いた系では全て陰性であった。 さらにHTLV−II5検体（SKlll／S Kl88のPCRで陽怪）にっいて2重PCR を行ったが、全て陰性であった。 考察3行った二種類のPCR法ともI F法の結 果と完全に一致したことより、抗体スクリーニ ングの確認法としてI F法は現在のところ最も 適した方法と考えられる。 HTLV−I Iについては輸血による感染が 確認されており（3）、感染経路や病態の研究 においても1型とI I型を識別していくことは 重要と考えられる。 一45一 レ
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