脂溶性ビタミンの分析

LC application data
No.720062H(1/2)
September 2015
脂溶性ビタミンの分析
Analysis of Fat-soluble Vitamins by Photodiode Array Detection
【はじめに】
5大栄養素の一つであるビタミンは、体の調子を整えるために欠かすことができません。中でも脂溶性ビタミンは、動植物の生
体中に含まれており、代謝における各種の生理作用に関与します。
脂溶性ビタミンは、水に溶けにくく、油に溶けやすいという性質を持つほか、光や酸素などに暴露されることによって分解され
やすいという性質を持っています。HPLCは、これらの影響を抑制しながら、測定を行うことが可能なため、ビタミンを安定的に
分離・検出することができます。
今回は、PDA検出器を用いて、脂溶性ビタミン8成分分析した結果を報告します。
Keyword : 脂溶性ビタミン, ビタミンK3, ビタミンA, 酢酸レチノール, ビタミンD2, ビタミンD3, α-トコフェロール,
酢酸-α-トコフェロール, ビタミンK1, Shodex Asahipak ODS-50 4E, PDA検出器
【実験】
[Conditions]
[Equipment]
Column:
Shodex Asahipak ODP-50G 4A (4.6 mmI.D. x 10 mmL, 5 µm)
Pump:
PU-4180
+Shodex Asahipak ODP-50 4E (4.6 mmI.D. x 250 mmL, 5 µm)
Pump option:
DG unit
Eluent :
Acetonitrile/Methanol (50/50)
Autosampler:
AS-4050
Flow rate:
0.6 mL/min
Autosampler option: TC Unit
Column temp.:
30 ℃
Column oven:
CO-4060
Injection volume:
20 µL
Detector:
MD-4010
Standard:
8 fat-soluble vitamins
【結果】
図1に、脂溶性ビタミンのクロマトグラム及び等高線を示します。8成分を25分以内で、良好に分離できています。
6
青:220nm
赤:280nm
7
1
2 3
5
8
4
4
5
6 7
8
1
2 3
図1 脂溶性ビタミンのクロマトグラム
1: Vitamin K3 (Menadione) 14 μg/mL, 2: Vitamin A (Retinol)15 μg/mL, 3: Vitamin A acetate (Retinol acetate) 36 μg/mL,
4: Vitamin D2 (Ergocalciferol) 20 μg/mL, 5: Vitamin D3 (Cholecalciferol) 14 μg/mL, 6: Vitamin E acetate (α-Tocopherol
acetate) 99 μg/mL, 7: Vitamin E (α-Tocopherol) 103 μg/mL, 8: Vitamin K1 (Phytonadione) 13 μg/mL
〒192-8537 東京都八王子市石川町2967-5
http://www.jasco.co.jp
No.720062H(2/2)
September 2015
Wavelength [nm]
図2に脂溶性ビタミンのオンピークスペクトルを示します。各成分とも良好にスペクトルを得ることができました。
1
2
3
4
5
6
7
8
6
220nm
7
1
5
2 3
4
8
図2 脂溶性ビタミンのオンピークスペクトル(上)及びクロマトクラム(下)
1: Vitamin K3 (Menadione) 14 μg/mL, 2: Vitamin A (Retinol)15 μg/mL, 3: Vitamin A acetate (Retinol acetate) 36 μg/mL
4: Vitamin D2 (Ergocalciferol) 20 μg/mL, 5: Vitamin D3 (Cholecalciferol) 14 μg/mL, 6: Vitamin E acetate (α-Tocopherol
acetate) 99 μg/mL, 7: Vitamin E (α-Tocopherol) 103 μg/mL, 8: Vitamin K1 (Phytonadione) 13 μg/mL
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