LC application data No.720062H(1/2) September 2015 脂溶性ビタミンの分析 Analysis of Fat-soluble Vitamins by Photodiode Array Detection 【はじめに】 5大栄養素の一つであるビタミンは、体の調子を整えるために欠かすことができません。中でも脂溶性ビタミンは、動植物の生 体中に含まれており、代謝における各種の生理作用に関与します。 脂溶性ビタミンは、水に溶けにくく、油に溶けやすいという性質を持つほか、光や酸素などに暴露されることによって分解され やすいという性質を持っています。HPLCは、これらの影響を抑制しながら、測定を行うことが可能なため、ビタミンを安定的に 分離・検出することができます。 今回は、PDA検出器を用いて、脂溶性ビタミン8成分分析した結果を報告します。 Keyword : 脂溶性ビタミン, ビタミンK3, ビタミンA, 酢酸レチノール, ビタミンD2, ビタミンD3, α-トコフェロール, 酢酸-α-トコフェロール, ビタミンK1, Shodex Asahipak ODS-50 4E, PDA検出器 【実験】 [Conditions] [Equipment] Column: Shodex Asahipak ODP-50G 4A (4.6 mmI.D. x 10 mmL, 5 µm) Pump: PU-4180 +Shodex Asahipak ODP-50 4E (4.6 mmI.D. x 250 mmL, 5 µm) Pump option: DG unit Eluent : Acetonitrile/Methanol (50/50) Autosampler: AS-4050 Flow rate: 0.6 mL/min Autosampler option: TC Unit Column temp.: 30 ℃ Column oven: CO-4060 Injection volume: 20 µL Detector: MD-4010 Standard: 8 fat-soluble vitamins 【結果】 図1に、脂溶性ビタミンのクロマトグラム及び等高線を示します。8成分を25分以内で、良好に分離できています。 6 青:220nm 赤:280nm 7 1 2 3 5 8 4 4 5 6 7 8 1 2 3 図1 脂溶性ビタミンのクロマトグラム 1: Vitamin K3 (Menadione) 14 μg/mL, 2: Vitamin A (Retinol)15 μg/mL, 3: Vitamin A acetate (Retinol acetate) 36 μg/mL, 4: Vitamin D2 (Ergocalciferol) 20 μg/mL, 5: Vitamin D3 (Cholecalciferol) 14 μg/mL, 6: Vitamin E acetate (α-Tocopherol acetate) 99 μg/mL, 7: Vitamin E (α-Tocopherol) 103 μg/mL, 8: Vitamin K1 (Phytonadione) 13 μg/mL 〒192-8537 東京都八王子市石川町2967-5 http://www.jasco.co.jp No.720062H(2/2) September 2015 Wavelength [nm] 図2に脂溶性ビタミンのオンピークスペクトルを示します。各成分とも良好にスペクトルを得ることができました。 1 2 3 4 5 6 7 8 6 220nm 7 1 5 2 3 4 8 図2 脂溶性ビタミンのオンピークスペクトル(上)及びクロマトクラム(下) 1: Vitamin K3 (Menadione) 14 μg/mL, 2: Vitamin A (Retinol)15 μg/mL, 3: Vitamin A acetate (Retinol acetate) 36 μg/mL 4: Vitamin D2 (Ergocalciferol) 20 μg/mL, 5: Vitamin D3 (Cholecalciferol) 14 μg/mL, 6: Vitamin E acetate (α-Tocopherol acetate) 99 μg/mL, 7: Vitamin E (α-Tocopherol) 103 μg/mL, 8: Vitamin K1 (Phytonadione) 13 μg/mL 〒192-8537 東京都八王子市石川町2967-5 http://www.jasco.co.jp
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