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ユビキチン化タンパク質の分離・濃縮キット
UbiQapture® -Q キット
高結合型アフィニティーマトリックスを用いて細胞抽出物、組織ライセートからリジン残基結合型モノ
/ ポリユビキチン化タンパク質を分離するキットです。分離したタンパク質は、添付のユビキチン特異
的抗体またはターゲットタンパク質特異的抗体を用いてウエスタンブロット解析できます。
特長 ● ユビキチン鎖長を問わずユビキチン化タンパク質を特異的に分離できます
● ヒト、マウス、ラット、酵素などの様々な動物種の細胞 / 組織サンプルや幅広い
溶解バッファーに使用可能
アプリケーション
● 細胞または組織ライセートからユビキチン化タンパク質複合体の全長を分離・検出
● 細胞フリーの in vitro アッセイからユビキチン化タンパク質の精製 / プルダウン
● 脱ユビキチン酵素を用いたユビキチン／ユビキチン鎖の切断による活性型／ネイティブタンパク質の遊離
● 高塩濃度バッファーを用いた活性型／ネイティブユビキチン化タンパク質の分離
構成内容
●
●
●
UbiQapture® -Q matrix
ユビキチン化タンパク質ライセートコントロール (Ub- ライセート )
ユビキチン複合体特異的 HRP 標識抗体
ユビキチン化のタイプ
＝ユビキチンモノマー
ユビキチンには 7 つのリジン残基とグリシルグリシンモチーフが
C 末端にあります。Ｃ末端グリシン残基が基質タンパク質内のリジ
ン残基側鎖の εアミノグループにイソペプチド結合を介して順次
結合していきます。このようにしてユビキチンはモノマー、マル
チプルモノマー、ポリマーとしてユビキチン自身が重合していき
ます。修飾を受けた基質タンパク質の運命は修飾の部位、程度に
より様々です。
細胞ライセート
基質
タンパク質
Ub
結合 / キャプチャー
溶出
図1　アッセイ原理
ユビキチン化タンパク質の機能
モノ
ユビキチン化
ウェスタンブ
ロットで解析
基質
基質
UbiQapture-Q™ matrix
・プロテアソーム分解
・オートファジー
・細胞周期
・染色質リモデリング
・DNA修復
基質
基質
・エンドシトーシス
・NFκb活性化
・免疫応答
・タンパク質輸送機構の活性修飾
マルチ
ユビキチン化
ポリ
ユビキチン化
基質
タンパク質
基質
タンパク質
Ub Ub
図 3　ユビキチン化タンパク質由来の濃縮細胞ライセート
のウエスタンブロット解析
出発物質 (Starting Material: SM) や非結合フラクション
(Unbound Fraction: UF)、溶出フラクション (Elution
Fraction: EL) に含まれるユビキチンタンパク質複合体を、
1:1000 に希釈されたユビキチン複合体に特異的な HRP 標
識抗体 ( 品番： BML-PW0150) を用いて、ウエスタンブロッ
トにより検出した。
Ub
Ub
Ub
Ub Ub
図2　ユビキチン修飾のタイプ
SM UF
EL
Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
品名
UbiQapture® -Q kit
品番
BML-UW8995-0001
キット構成品単品
品名
適用
交差性
種由来
Anti Mono and Polyubiquitinylated Conjugates
WB/ ELISA/ IHC
略号
種問わず
IHC: 免疫組織化学
-
包装
1 kit
希望販売価格
\76,000
Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
免疫動物
クローン番号
品番
包装
希望販売価格
Mouse
FK2
BML-PW0150-0025
BML-PW0150-0100
25 µg
100 µg
\16,000
\54,000
WB: ウエスタンブロット
SUMO 化タンパク質の分離
SUMO-Qapture® -Ｔキット
高結合型アフィニティーマトリックスを用いて細胞抽出物、組織ライセートから SUMO 化タンパク質を分離するキットです。
アプリケーション
● 細胞または組織ライセートから SUMO 化タンパク質複合体のキャプチャーと分離、ウエスタンブロットによる検出と解析
● 変性状態のフリー SUMO 化タンパク質を用いたプロテオミクス解析による SUMO 修飾タンパク質基質の同定
● SUMO 化 in vitro アッセイによる SUMO 化タンパク質の選択的な精製 / プルダウン
構成内容
●
●
●
●
●
●
SUMO-Qapture®-T matrix
SUMO-1 コントロール ( リコンビナントタンパク質 )
SUMO-2 コントロール ( リコンビナントタンパク質 )
SUMO-3 コントロール ( リコンビナントタンパク質 )
抗 SUMO-1 ポリクローナル抗体
抗 SUMO-2/3 ポリクローナル抗体
図 1 SUMO 修飾タンパク質由来ライセートの SUMO-Qapture® 濃縮によるウエスタンブロット解析
左：SUMO-1、右：SUMO-2/3
レーン 1：MWM
レーン 2：非結合フラクション（上清）レーン 3：溶出フラクション（精製後）
レーン 4：洗浄液 1
レーン 5：洗浄液 2
レーン 6：出発物質（精製前）
kDa
250
kDa
148
148
250
98
98
64
64
50
50
36
36
22
22
1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6
Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
品名
SUMO-Qapture® -Ｔ kit
PolySUMO 化タンパク質の分離
品番
BML-UW1000A-0001
包装
1 kit
希望販売価格
\59,000
PolySUMO-Qapture® -Ｔキット
高結合型アフィニティーマトリックスを用いて細胞抽出物、組織ライセートから polySUMO 化タンパク質を分離する
キットです。
アプリケーション
10% 10% 100%
SM UF
EL
● 細胞または組織ライセートからの polySUMO 化タンパク質複合体のキャプチャーと分離、
ウエスタンブロットによる検出と解析
● 生化学的特定、基質特異的免疫沈降による 2 次精製、またはフリーの活性型／ネイティブ
polySUMO 化タンパク質を用いた、プロテオミクス解析による polySUMO 修飾タンパク
質の同定
● SUMO 化 in vitro アッセイによる polySUMO 化タンパク質の選択的な精製／プルダウン
構成内容
PolySUMO-Qapture® matrix
PolySUMO 化タンパク質ライセートコントロール
● PolySUMO-Qapture® 溶出バッファー
関連商品
● 抗 SUMO-2/3 ポリクローナル抗体
●
●
250
148
MW (kDa)
98
64
50
36
図 2　PolyＳＵＭＯ修飾タンパク質由来ライセートの
polySUMO-Qapture® 濃縮によるウエスタンブロット解析
出発物質 (Starting Material: SM) や非結合フラクション (Unbound
Fraction: UF)、溶出フラクション (Elution Fraction: EL) に含まれる
polySUMO 複合体を、1: 500 に希釈された抗 SUMO-2/3 抗体 ( 品番：
BML-PW0150) を用いて、ウエスタンブロットにより検出した。
22
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Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
品名
PolySUMO-Qapture® -Ｔ kit
品番
BML-UW0955-0001
包装
1 kit
希望販売価格
\66,000
（12201）
● 希望販売価格･･･「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。
記載の希望販売価格は２０１5 年 2 月１日現在の希望販売価格です。
予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。
● 使用範囲･･･記載の商品は全て、「研究用試薬」です。
人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意下さい。
品名
品番
包装
希望販

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