温度勾配ゲル電気泳動装置温度勾配ゲル電気泳動装置マイクロTG 171 ●電気泳動用パワーサプライ➡P.169 ●実験データ➡P.172 ●垂直式と平行式の両用（特型は平行式専用）平行式TGGE 泳動例ミキサーローテータースターラーおもな用途 ●平行式による多型解析、垂直式のアプリケーション垂直式TGGE 泳動例 ±0.1℃（＊1）温度調節精度 70℃（直線性維持温度勾配40℃）最大温度勾配安全器／安全機能 230×346×231Hmm 本体外形寸法 AC100V・6A（電気泳動用パワーサプライは除く）電源別途必需品（＊3）ゲルカセット、ゲルキャスター、電気泳動用パワーサプライ本体価格 ¥1,078,000 ■別売部品品名マルチスロットロングスロット備考価格平行式用、8ウェル、約2.5µl/ウェル、泳動距離約20mm、100個入 ¥10,000 ¥10,000 垂直式用、1ウェル、約8µl/ウェル、泳動距離約20mm、100個入ゲルカセット（ロングスロット）ゲルキャスター（18枚作製用、特注品） ●外形寸法は突起部を含みません。 ●写真の容器は付属しません。 ●表示価格は消費税を含みません。品名ゲルキャスター備考価格ゲルカセット内にアクリルアミドゲルを作るために必須、3枚作製用 ¥28,000 ●ゲルキャスター（18枚作製用）は特注品です。価格はお問い合わせください。［オフライン総合カタログ2016-2017］学術と産業に貢献します巻末資料索引 ●ゲルキャスター恒温水循環装置ゲルカセット（マルチスロット） ●ゲルカセット（低蛍光性の樹脂製、蛍光ラベルサンプルはそのまま検出可能です）［チラー］ゲルキャスター（3枚作製用）酸素センサー電気培養装置電気泳動関連（＊1）ゲルに対する温度精度は、同一ゲル内が±0.2℃程度、ゲル間が±0.5℃程度です。なお、本製品の使用環境温度範囲は+10℃～+30℃です。空調された室内でご使用ください。ただしバッエアコン等の吹き出し口付近のように直接風が当たるような場所は避けてください。（＊2）ファーウィック（泳動バッファー保持体）は、蒸留水ですすいで数回の再使用が可能です。消耗時（＊3）169ページ掲載のAE-8155等を別途ご用意のため、100個入¥10,000で販売しています。いください。凍結乾燥機ゲルホルダー：平行式TGGE用×3、垂直式TGGE用×3 伝熱シート×4、カバーフィルム×10 バッファーウィック×100（＊2）標準付属品マイクロTG-2（特注品）フタを閉時のみ電気泳動可能、温調器の各種エラー表示遠心式濃縮機低温トラップ 3枚最大ゲル架数ハイブリダイゼーション +10℃〜+80℃ 使用温度範囲インキュベーターマイクロゲル（平行式用）は100～300bpの断片の多型解析には十分ですが、微生物の群集構造解析には泳動距離と温度勾配の解像度が不足気味です。ゲルをミニゲルしサイズまで拡大（172ページ参照）た平行式専用の特型の製作も受けたまわっておりますので、詳細はお問い合わせください。恒温庫マイクロTG 型名投込み式冷却器のご紹介 ■特型（マイクロTG-2）ゲルホルダー（泳動槽）恒温水槽振とう恒温槽や手間がかかるという欠点がありました。マイクロTGは超小型のゲルフォーマットとコンパクトな温度コントロール装置を用いることで、TGGEを格段に便利な手法にしました。従来のTGGE装置では必要だった循環装置は、マイクロTGでは不要です。ゲルカセット（マイクロゲル）アルミブロック恒温槽をかけて行う電気泳動法で、同じ大きさのDNAでもその配列の違いにより分離することができる技術です。TGGEには、温度勾配を泳動方向に対して垂直にかけると平行にかける「平行式「垂直式TGGE」 TGGE」があります。 DNA解析において非常に情報量の多い手法であるTGGEですが、従来では時間ミニ恒温槽 TGGE（Temperature-Gradient Gel Electrophoresis）はゲルに温度の勾配 ■マイクロTGについてビーズ破砕機超音波破砕機 ●平行式による微生物群集構造解析［特型が向く］ ■温度勾配ゲル電気泳動：TGGEについて振とう機 ●マイクロゲル3枚同時泳動（特型はミニゲル2枚）バイオ医薬品開発 ●25mm角のマイクロゲルでTGGE、最短で泳動20分細胞培養おもな特長恒温振とう培養機化によりさらに簡便化しました。温度調節機能内蔵で循環装置は不要です。ＯＤモニター DGGEよりもゲル作成の簡便さと再現性の点で優れるTGGEを、ゲルの小型 172 温度勾配ゲル電気泳動装置（参考資料）マイクロTGの実験データ恒温振とう培養機ＯＤモニター ■分離能検証例マイクロTGの分離能検証例：16S rDNAの部分断片の分離（CGクランプ法＋TGGE）細胞培養バイオ医薬品開発 GCクランプ付きプライマーを用いてPCRで個別に増幅した16S rDNAの部分断片（断片長は同じ）を混合して、TGGEで分離を試みました。結果、「長さが同じでも配列が異なれば分離できる」というTGGEの基本的な作用を確認することができました。通常の電気泳動垂直式TGGE 平行式TGGE ❶：サンプルB 振とう機 ❷：PCR後にサンプルAとBを混合 ❸：サンプルA ❹と❺：その他のサンプルミキサーローテータースターラー Ⓐ ❶❷❸❹❺ Ⓑ マイクロTG-2（特注品）の検証例：DGGEマーカーの分離ビーズ破砕機超音波破砕機アルミブロック恒温槽ミニ恒温槽マイクロTG-2（特注品）用のゲルは、標準タイプのマイクロTG用マイクロゲルと比較して、泳動距離が約5倍になっています（比較写真参照、分かりやすくするためにゲル部に色をつけています）。装置本体内の熱源の幅も変更し、拡大版ゲルの上下両端がそれぞれの設定温度になるように熱源を配置しています。この拡大版ゲルを用いて、DGGEで分離すると10本のバンドが現れる市販のDGGEマーカーの分離を試みました。結果、拡大版ゲルは市販のDGGE装置のゲルと比較したらかなり小さいものの、明確な9本のバンド（1、3～10）と1本のやや薄いバンド（2）を確認することができ、一定のパフォーマンスが得られることを確認できました。ゲルの大きさ比較投込み式冷却器恒温水槽振とう恒温槽ハイブリダイゼーションインキュベーター恒温庫マイクロTG マイクロTG-2 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ［泳動条件］・泳動サンプル：DGGE Marker III 3µ（ l 10 fragments,、ニッポンジーン）・ゲル：6％アクリルアミドゲル（アクリルアミド：ビス19：1、6.5M尿素、TBE）・泳動用バッファー：5×TBE ・温度勾配：48℃ー 63℃ ・電圧：最初の30分を50V、その後100Vで2時間45分・泳動後、ゲルをSYBR Goldで染色しバンドを検出遠心式濃縮機低温トラップ凍結乾燥機マイクロTG アプリケーション例① マイクロTG アプリケーション例② テンプレートDNAセットras Mutant Set c-Ki-ras codon 61 （TaKaRa）を用いて同一コドン内で一塩基のみ異なる8種類のDNA 断片（157bp、GCクランプ付き）を作製し、Heteroduplex Analysis を行ったところ、各種の一塩基置換を移動度の差として検出することができました。各レーンの上2本のバンドがヘテロ二重鎖、3本目以降のバンドはホモ二重鎖です。 GP法とはランダムPCR法と垂直式TGGE法から成る、遺伝子型による 1）生物種の予備的同定法です。ゲノムDNAを鋳型にしてランダムPCR で得た断片のTGGEバンドパターンは生物種固有のものとなることが分かっています。GP法における種の同定は、そのパターンから8つの特徴点を抽出して類似性に関するスコアを算出することで行われます。スコアが1に近づくほど、GP法の上では種が近いことを意味します。ポイントミューテーションの検出（ヘテロ二重鎖法＋TGGE）図1.通常の電気泳動図2.平行式TGGE ゲノムプロフィリング（GP）法酸素センサー電気培養装置電気泳動関連乳酸菌の一種の GPパターン病原性酵母の一種の GPパターン恒温水循環装置［チラー］ 1）Nishigaki, K., Naimuddin, M., Hamano, K.:J.Biochem. , 128, 107-112（2000）巻末資料索引学術と産業に貢献します［オフライン総合カタログ2016-2017］ ●外形寸法は突起部を含みません。 ●写真の容器は付属しません。 ●表示価格は消費税を含みません。