ウシ精巣性ヒアルロニダーゼ活性に及ぼすオリゴ糖の影響 ○柿崎育子 1, 小泉英誉 1, 陳鳳超 1, 多田羅洋太 1, 須藤晋一郎 2, 後藤昌史 2, 4, 黒田喜幸 2, 中村敏也 2, 3, 遠藤正彦 1 1 3 弘前大・院医・高度先進医学研究セ・糖鎖工学, 2 糖鎖医学, 弘前大・院保・医療生命科学・生体機能科学, 4 サンスター（株）研究開発部 ウシ精巣性ヒアルロニダーゼ（BTH）は、ヒアルロン酸およびコンドロイチン硫酸 に作用する酵素である。本酵素は、加水分解反応と糖転移反応を触媒するが、反応機 構の詳細は明らかにされていない。BTH の阻害剤は、反応機構に関する研究や医学応 用を目指した研究に有用と考えられる。本研究では、BTH の加水分解反応および糖転 移反応に及ぼすグリコサミノグリカンオリゴ糖の影響を検討した。 ヒアルロン酸及びコンドロイチン硫酸由来のオリゴ糖は、BTH（シグマ アルドリ ッチ（株）, Type 1-S）による部分分解あるいは化学処理により調製した。BTH によ る加水分解反応には、ヒアルロン酸（ （株）フードケミファ, Mr＝80,000）あるいはヒ アルロン酸 8 糖を基質として用いた。糖転移反応には、ピリジルアミノ化したヒアル ロン酸 6 糖をアクセプター、また、ヒアルロン酸（Mr＝80,000）をドナーとして用い た。反応生成物の分析は、YMC-Pack Polyamine II カラム（（株）ワイエムシィ）を用 いた HPLC で行った。 BTH の加水分解反応において、コンドロイチン 4-硫酸及びコンドロイチン 6-硫酸 の 4 糖、6 糖が濃度依存的に阻害効果を示した。糖転移反応においては、ヒアルロン 酸、コンドロイチン 4-硫酸、コンドロイチン 6-硫酸の 4 糖、6 糖が濃度依存的に阻害 効果を示したが、コンドロイチン硫酸の阻害効果の方が高い可能性が示された。2 糖 である N-アセチルヒアロビウロン酸、N-アセチルコンドロシンは両反応において阻害 効果を示さなかった。加水分解反応と糖転移反応の反応系は異なるが、現在、さらに オリゴ糖を調製し、両反応におけるオリゴ糖の阻害効果の違いについて検討中である。
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