eBioscience Home 磁気ビーズを用いた 簡便な細胞分離 MagniSort™ Magnetic Cell Separation キット カラム不要、磁気ビーズによる細胞のポジティブ・ネガティブ分離 細胞の in vitro 活性化、フローサイトメトリー用の染色やフローサイトメトリーによる ソーティング、遺伝的解析を目的とした磁気分離、さらには他のダウンストリーム実験 などは信頼できる抗体試薬が成功の鍵を握ります。当社の多種多様な抗体製品と免疫 分野での強みを活かして、MagniSort™ 製品が開発されました。これは、細胞を濃縮 するための磁気分離技術で、カラムを必要としません。カラムを用いた分離法に比べる と、少ない手間で迅速に処理でき、しかも著しいコスト削減が図れます。細胞特異的 に反応する混合抗体試薬と専用装置を用いて、ノイズの少ない実験結果が得られます。 抗体 磁気ビーズ ポジティブ分画 洗浄 ■ カラム不要の迅速かつ穏やかなプロトコル ネガティブ分画 濃縮の生物学 MagniSort™ Magnetic Cell Separation キットを 使えば、細胞に結合する大きな粒子の影響に煩わさ れることはありません。標的とする細胞を高い精度で 安定して分離できるうえに、例えば T 細胞の活性化 を引き起こすことも、分離後の T 細胞分化の研究に 支障をきたすこともないことが実証されています。 カラムを用いたキットに比べて MagniSortTM キット の優れた点 作業効率が向上する 細胞は、カラムを通らないので穏やかに分離できる 使い捨てカラムを利用せずコストが削減できる キットあたり 2×109 個の細胞が処理できる MagniSortTM キットによる分離法とカラムを用いた分離法との比較 MagniSortTM キットの精製度 1×107 個のヒト正常末梢血液 細胞を選別しない場合(黒色)、 他社製のカラム式ヒト CD3 磁気 ビーズを用いて(紫色)、もしくは MagniSortTM Human CD3 Positive Selection Kit を用い て(オレンジ色)選別した場合。 細胞は anti-CD19 APC および anti-CD3(クローン SK7)FITC で染色した。 回収率 割合 割合(他社比) 純度 ドナー ドナー ポジティブセレクションは分離された細胞に刺激を与えない MagniSortTM キット MagniSortTM キットによるポジティブセレクション MagniSortTM Mouse CD3 Positive Selection Kit(上列)、お よび他社製のカラム方式マウス CD3 磁気ビーズ(下列)を用いて マウス T 細胞を脾臓細胞から選別後、細胞増殖色素 CPD-eFluor® 450 で標識。培地のみで1日(黒色グラフ)、2日 (赤色グラフ)、3日間(青色グラフ)培養した。細胞は CPD-eFluor® 450(左図)について解析、あるいは anti-CD25 (右図)で染色した。ヒストグラムは CD3 陽性 T 細胞を表している。 カラム方式キット 黒=1 日目 赤=2 日目 青=3 日目 細胞分離と濃縮 磁気細胞分離方法は、異種細胞の混合サンプルから目的の細胞を分離します。多くの T 細胞の in vitro 刺 激実験のように、完全な精製度を必要としない場合は、フローサイトメトリーによるソーティングあるいは化学 的勾配といった過酷な分離工程に細胞をさらすことなく、高い純度で回収できます。 濃縮前 MagniSortTM Mouse CD4 T Cell Enrichment Kit マウス脾臓細胞を選別せずに(左図)、および MagniSortTM Mouse CD4 T Cell Enrichment Kit による選別後(右図)、 Anti-Mouse CD4 PE(製品番号 12-0041)で染色。Fixable Viability Dye によって識別された全生存細胞が解析に使わ れた。 濃縮後 in vitro 活性化および極性化 ナイーブ CD4 T 細胞のような休止期細胞は、T 細胞の分化経路を研究するために、刺激する必要がある場 合があります。架橋結合し、同種抗原(多くは細胞表面受容体)を介して人為的にシグナルを伝達することが できる抗体は、リコンビナントサイトカインやリコンビナント抗体(阻害シグナルを中和する)との組み合わせに より、決まった生物学的経路を通る特異的な方向へ分化を誘導することができるのです。 T 細胞極性化条件 種類 製品番号 ヒト マウス Anti-VD3 (plate coated) 16-0039 16-0037 16-0031 16-0038 16-0038 16-0033 16-0032 Anti-CD28 16-0289 16-0281 IL-2 14-8029 34-8029 14-8021 34-8021 IL-4 14-8049 34-8049 14-8041 34-8041 IL-12 14-8129 34-8129 14-8121 34-8121 Th0 Th1 Th2 Th17 役割 - T 細胞受容体に結合および架橋後、T 細胞へシグナル 1 を伝 達 - T 細胞へ共刺激性シグナル 2 を伝達。T 細胞の in vitro 活性 化に必須 - 活性化 T 細胞により発現 - 活性化 T 細胞の増殖およびクローン増殖を媒介 - Th2 のプライミングと成熟に必須 - 成熟中の Th2 の自己分泌 - 高濃度の IL-4 は、ナイーブ T 細胞から Th1 への分化を阻害 - 活性化マクロファージにより産生 - Th1 の生存および増殖促進 - メモリー/エフェクターTh1 数の維持 - Th2 の形成阻害 TGF-1 14-8348 34-8348 14-8342 34-8342 IL-6 14-8069 34-8069 14-8061 34-8061 Anti-IL-4 16-7048 16-7041 Anti-IFN 16-7318 16-7312 Anti-IL-12 16-7285 16-7285 - IL-6 と IL-23 と共に、ナイーブ T 細胞が Th17 へ分化するた めの必須因子 - IL-17 特異的転写因子の活性化に必須 - RORγt と IL-21 の発現を誘導。それにより Th17 における IL-17A、IL-17F、IL-23R の発現を活性化 - Th1 分化阻害と Th2 分化促進 - Th2 分化阻害と Th1 分化促進 - Th2 分化阻害と Th1 分化促進 フローサイトメトリーによる解析 フローサイトメトリーは、含まれるタンパク質、RNA、細胞の性状(増殖やアポトーシスなど)などに関するさま ざまなパラメーターを利用して、一秒間に数千もの細胞を検出するという素晴らしい能力を有しています。その 一方で、この解析の精度は試薬の中で反応性の最も弱いものに準ずることになります。そのため、信頼でき る、有効性が立証された抗体がフローサイトメトリー実験には欠かせません。 刺激なし 刺激後 Th17 の分化 Th17 極性化した(Human IL-23 Recombinant Protein [製品 番号 14-8239]を使用)、CD4 陽性、正常ヒト末梢血液細胞を、タ ンパク質輸送阻害試薬(製品番号 00-4980)のみ(左図)、あるい は細胞刺激試薬(製品番号 00-4975)とタンパク質輸送阻害試薬 ( 右 図 ) で 5 時 間 、 染 色 前 処 理 を 施 し 、 Anti-Human IL-17A PerCP-Cy5.5(製品番号 45-7179)および Anti-Human IL-17F eFluor® 660(製品番号 50-7169)を用いて細胞内染色した。細 胞は、Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set (製品番号 88-8824)を用いて固定・透過処理を施し、Fixable Viability Dye eFluor® 450(製品番号 65-0863)によって識別 された生存細胞を解析に用いた。 ご注文情報 製品番号 MAG-4902-10 MSNB-6002-71 MSNB-6002-74 MSPB-6003-71 MSPB-6003-74 8802-6830-74 8802-6832-74 8802-6833-74 8802-6834-74 8802-6835-74 8804-6810-74 8804-6818-74 8804-6819-74 8802-6831-74 8804-6811-74 8804-6813-74 8804-6814-74 8804-6812-74 8804-6815-74 8804-6816-74 8804-6802-74 8802-6840-74 8802-6841-74 8802-6842-74 8802-6860-74 8802-6861-74 8802-6847-74 8802-6865-74 8802-6848-74 8802-6849-74 8802-6862-74 8802-6846-74 8802-6843-74 8802-6844-74 8802-6817-74 8802-6863-74 8804-6820-74 8804-6827-74 8804-6828-74 8804-6821-74 8804-6822-74 8804-6824-74 8804-6825-74 8804-6864-74 製品名 MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM MagniSortTM 包装 税別価格(円) Magnet 1個 125,000 Negative Selection Beads 25 反応 12,700 Negative Selection Beads 200 反応 51,400 Positive Selection Beads 25 反応 12,700 Positive Selection Beads 200 反応 51,400 Human CD3 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Human CD8 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Human CD19 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Human CD14 Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Human CD56 Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Human T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human B cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human NK cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD4 T cell 2-Step Enrichment Kit 200 反応 130,500 Human CD4 T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD4 Memory T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD4 Naive T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD8 T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD8 Memory T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD8 Naive T cell Enrichment Kit 200 反応 125,000 Human CD45 Depletion Kit, 200 反応 112,100 Mouse CD3 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Mouse CD4 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Mouse CD8 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Mouse CD11b Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD11c Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD19 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Mouse CD45 Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD45.1 Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD45.2 Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD49b Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD45R (B220) Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse CD90.1 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Mouse CD90.2 Positive Selection Kit 200 反応 110,300 Mouse CD335 (NKp46) Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse F4/80 Positive Selection Kit 200 反応 112,100 Mouse T cell Enrichment Kit 200 反応 101,100 Mouse B cell Enrichment Kit 200 反応 101,100 Mouse NK cell Enrichment Kit 200 反応 101,100 Mouse CD4 T cell Enrichment Kit 200 反応 101,100 Mouse CD8 T cell Enrichment Kit 200 反応 101,100 Mouse CD4 Naive T cell Enrichment Kit 200 反応 112,100 Mouse CD8 Naive T cell Enrichment Kit 200 反応 112,100 Mouse CD45 Depletion Kit 200 反応 112,100 *キットの最新情報はホームページをご覧ください。 *本製品は試験研究用ですので、診断の目的には使用できません。 eBioscience製品に関するお問合せ <在庫や納期に関するお問合せ> eBioscience Hotline TEL:03-6430-4070 または [email protected] <見積りやご注文に関するお問合せ> 営業部 TEL:03-6430-4020 または [email protected] <学術的なお問合せ>テクニカルサポート TEL:03-6430-4030 または [email protected] アフィメトリクス・ジャパン株式会社 所在地: 〒105-0013 東京都港区浜松町 1-24-8 ORIX 浜松町ビル 7 階 TEL: 03-6430-4020 FAX: 03-6430-4021 E-mail: [email protected] http://www.affymetrix.com/jp/ 取扱店
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