LC application data No.032003H(1/2) June 2015 蛍光検出器 FP-4020 の蛍光スリット幅による検出感度の向上 Improvement of Sensitivity by Emission Side Slit Width of the Fluorescence Detector FP-4020 【はじめに】多環芳香族炭化水素（PAHs）は、縮合芳香族環からなる化合物であり、ディーゼル油や石炭などの炭素含有物質の不完全燃焼によって生成されます。PAHsのうち幾つかは発がん性物質としても知られており、環境中のPAHsの検出及び定量が重要になってきます。一方、これらの検出を行う蛍光検出器では、蛍光側の出射スリットの幅を変更することにより、検出感度を向上させることができます。励起波長と蛍光波長が近接し、バックグラウンドが大きい場合はスリット幅を小さくすることでSN比の向上が期待でき、反対に励起波長と蛍光波長が離れている場合は、スリット幅を大きくすることでSN比の向上が期待できます。今回は、蛍光検出器FP-4020を使用し、スリット幅を20 nm及び40 nmとした時のPAHsの検出感度を比較しましたので報告します。 Keyword : PAHs, CrestPak C18S, FP-4020, スリット幅【実験】 [Equipment] Pump: Pump option: Autosampler: Column oven: Detector: [Conditions] Column: PU-4180 DG unit AS-4150 CO-4061 FP-4020 (Analytical Cell) 表1 Eluent: Flow rate: Column temp.: Wave length: Cell temp.: Injection volume: Standard: タイムプログラム Time (min) Ex (nm) Em (nm) 0.0 3.5 4.1 5.0 6.0 8.5 276 266 250 336 268 262 334 310 402 392 384 408 CrestPak C18S (4.6 mmI.D. x 150 mmL, 5 µm) Acetonitrile/Water (78/22) 1.0 mL/min 40 ̊C Time program (see Table 1) 20 ̊C 1 µL Mixture of 10 ng/mL naphthalene, 1 ng/mL fluorene, anthracene, pyrene chrysene and benzo[a]pyrene in methanol 【結果】図1に、各スリット幅におけるPAHs 6成分のクロマトグラムを示します。 3 1 2 5 6 4 図1 PAHs 6成分のクロマトグラム (青: 20 nm, 赤: 40 nm) 1: Naphthalene, 2: Fluorene, 3: Anthracene, 4: Pyrene, 5: Chrysene, 6: Benzo[a]pyrene 〒192-8537 東京都八王子市石川町2967-5 http://www.jasco.co.jp No.032003H(2/2) June 2015 表2 に、各スリット幅における検出感度を示します。励起波長と蛍光波長が100 nm以上離れている成分（Anthracene, Chrysene, Benzo[a]pyrene）でSN比が向上しました。以上の結果より、微量な成分を検出する場合は各成分の励起波長及び蛍光波長の間隔を考慮してスリット幅を設定することにより、検出感度を向上できることが示されました。表2 各スリット幅における検出感度 (S/N=3) S/N=3 (pg) Slit Width 20 nm 40 nm Naphthalene 0.143 0.145 Fluorene 0.0277 0.0428 Anthracene 0.0160 0.0117 Pyrene 0.0398 0.0420 Chrysene 0.0206 0.0178 Benzo[a]pyrene 0.0431 0.0359 Wavelength Ex (nm) Em (nm) Em-Ex (nm) Naphthalene 276 334 58 Fluorene 266 310 44 Anthracene 250 402 152 Pyrene 336 392 56 Chrysene 268 384 116 Benzo[a]pyrene 262 408 146 〒192-8537 東京都八王子市石川町2967-5 http://www.jasco.co.jp