バイオ医薬品のためのセルベースアッセイシステム 機能的スクリーニング QC・ロットリリース試験 中和抗体測定 PathHunter セルベースアッセイ 近年のバイオ医薬品開発の増加により、最先端のセルベースアッセイの需要が高まっています。確実、シンプルかつターゲット特異的な DiscoveRxのPathHunter®バイオアッセイは、バイオ医薬品開発のあらゆるステージをサポートします。 バイオ医薬品 有効成分がタンパク質由来（成長ホルモン、インスリン、抗体など）、生物由来の物質（細胞、ウイルス、バクテリアなど） により産生される医薬品。これらは化学合成の低分子医薬品に比べて分子が大きく、構造が複雑であり、その特性や性質は一般に製造 工程そのものに依存します。 バイオ医薬品は、Biologics、Biological Medicine、Biopharmaceuticalsなどとも呼ばれます。 バイオ医薬品開発のためのアプリケーション R&Dグループ - 細胞内結合、機能的スクリーニング、効力測定 製造・バイオ分析グループ - QC・ロットリリース試験のためのバイオアッセイおよび安定性試験 臨床免疫学グループ - 中和抗薬物抗体の検出用のセルベースアッセイ PathHunterアッセイのラインナップ Receptor Assay Pathway Assay Ligand Ligand Ligand Ligand PK PK EA Activation-based Protein Recruitment PK EA EA EA EA EA Binding-based Internalization Ligand-dependent Dimerization Activation-based Signaling Event EA EA 複数の機能アッセイからお客様の研究目的に合わせたアッセイをご選択いただけます。 PathHunterアッセイのアプリケーション 1500 Heregulin Anti-ErbB3 1 1000 RLU Mean RLU 2000 B C D 80000 4000 1000000 60000 3000 40000 Anti-ErbB3 2 Anti-ErbB3 3 500 20000 Agonist/Antagonist (g/mL) 2000 1000 0 10 -10 10 -9 10 -8 10 -7 10 -6 Antibody [g/ml] 10 -5 10 -4 600000 400000 200000 Anti-GLP1 Antibody Anti-ErbB3 4 0 10 -12 10 -11 10 -10 10 -9 10 -8 10 -7 10 -6 10 -5 10 -4 Negative Control 800000 RLU 2500 RLU A 0 10 -13 10 -12 10 -11 10 -10 10 -9 10 -8 10 -7 10 -6 10 -5 DADLE [M] 0 10 -10 control antibody anti-Receptor 10 -8 10 -6 10 -4 10 -2 Antibody (g/ml) Applications of PathHunter Assays. (A) Functional anti-ErbB3 antibodies show a dose-dependent inhibition of signal in PathHunter ErbB2-ErbB3 assay, which detects the recruitment of SH2-domain protein upon activation of the receptor. (B) Anti-ligand antibody against the GLP1 protein demonstrates a dose-dependent inhibition in the PathHunter GLP1R assay, which detects the recruitment of β-arrestin upon activation of the GPCR. (C) A receptor internalization assay with an agonist for OPRD1, a GPCR opioid receptor, which detects internalization of the GPCR to the late endosome. (D) Anti-receptor antibody against the TGF βR2 demonstrates a dose dependent inhibition in the PathHunter TGF βR1 /R2 dimerization assay, which detects the dimerization of the two receptors when bound by their ligand. US: tel | 1.866.448.4864 e | [email protected] www.discoverx.com PathHunter Applications 細胞ライセート・上清・血清中における薬物活性の測定 Assay in Bacterial Lysate Assay in Human Serum 25000 20000 300000 8000 No FBS 7000 20% FBS 6000 60% FBS 40% FBS 80% FBS 5000 15000 RLU RLU Anti-CCL20 in Serum 400000 200000 8.5% 4.25% 10000 2.13% 5000 4000 3000 2000 100000 0% 1000 0 0 0 10-12 10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5 10-4 10-11 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6 10-5 10-4 10-3 GIP [M] 10-8 Histamine [M] 10-7 10-6 10-5 10-4 10-3 Anti-CCL20 mAb [g/mL] + 10nM CCL20 High tolerance of complex biological samples. PathHunter assays can detect functional biologics in various samples, such as human serum, plasma, hybridoma lysates and bacterial lysates. Above, we validated with GIPR assay with up to 8.5% bacterial lysate, the HRH1 assay with up to 10% normal human serum and were able to detect antibody-based inhibition of the CCL20 ligand in up to 80% serum without any loss of sensitivity. PathHunterアッセイによる優れたバイオアッセイパフォーマンス 分析法バリデーション 30000 20000 GLP1 [M] 250000 Exendin-4 [M] 200000 RLU RLU IGF1 [g/ml] hGH [g/ml] 10000 400000 300000 Vial #1 Vial #2 Vial #3 Vial #4 Vial #5 150000 100000 50000 0 -12 10 -11 10 -10 10 -9 10 -8 10 -7 10 Agonist Concentration -6 10 -5 10 Inter-lot reproducibility 200000 Lot 1 Lot 2 Lot 3 100000 0 -12 -11 -10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0 -12 -11 -10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 10 10 10 10 10 10 10 10 10 Exendin-4[M] Exendin-4[M] Assay Linearity Measured Relative to Potency, % Intra-lot reproducibility RLU Target-specific response 200 Y = 1.114*X - 9.500 R2=0.9986 150 100 50 0 0 50 100 150 200 Expected Relative Potency,% 簡便なプロトコルで迅速に結果を得ることができます ワンステップのアッセイプロトコル Plate Cells Read Luminescence Treat with Agonist/Molecule Add compounds Addition of Detection Reagents 1-24 hours US: tel | 1.866.448.4864 e | [email protected] 2-4 hours www.discoverx.com PathHunterアッセイオプション 業界最大級のバイオ医薬品のためのセルベースアッセイコレクション 600種類以上のGPCRアッセイ 30種類以上のRTKアッセイ Assays for Multiple GPCR Families RTK Assays Receptor Assays Acetylcholine CRHR1&2 MCHR1&2 Prokineticin c-KIT ErbB4 TNF receptor Adenosine Dopamine Melanocortin PRLHR c-MET FGFR1 TGFbR1&2 IGF1R BMP receptors Adrenoreceptor Endothelin Melatonin Prostanoid c-Ret-GFRα2 Anaphylotoxin Estrogen GRM Protease DDR1 INSR TLR receptors Angiotensin Formylpeptide Motilin PTH receptor DDR2 INSR IL17 receptors Apelin Free Fatty Acid NMUR1&2 Relaxin (Internalization) Frizzled receptor Bile Acid GABBR1&2 NPBWR1&2 Serotonin Bombesin Galanin NPFFR1&2 Somatostatin Bradykinin Ghrelin NPSR1 Succinate Calcitonin Glucagon Neuropeptide Y Tachykinin Calcium-Sensing Glutamate Neurotensin TAAR1 Cannabinoid Glycoprotein H Opioid TRHR Chemerin GNRHR Orexin UTS2R Chemokine 5HT Receptors Orphans Vasopressin Cholecystokinin Histamine Orthologs VIP & PACAP Class A Orphan HCA Receptors OXGR1 Class B Orphan KISS1R P2Y Complement Leukotriene QRFPR Corticotropin LPA & S1P PTAFR EphA4 PDGFRa EphA5 PDGFRb EphA7 TrkA EphB1 TrkA-P75 EphB2 TrkB EphB3 TrkB-P75 EphB4 TrkC ErbB1 TrkC-P75 Cytokine Receptors GCSF Receptor Epo Receptor GHR PRLR ErbB2-ErbB3 バイオ医薬品開発のためのアッセイの一部のみをご紹介しています。最新および完全なアッセイリストはDiscoveRxウェブサイトをご参照ください。 www.discoverx.com/biologicsmenu 各種製品およびサービス アッセイキット 安定発現細胞株 受託サービス カスタムアッセイ Ready-to-useの凍結細胞 各種GPCR安定発現細胞株 DiscoveRxの経験と専門性 全ての技術に対応 検出試薬 検証済みの培養試薬 多様なサービスの選択肢 R&Dチームとの連携 HTSスクリーニング対応 200プロジェクト以上の実績 培養試薬(培地およびプレート) PathHunterアッセイの特長 高耐性 – さまざまな生物学的サンプルにも対応 迅速 – 短時間のアッセイ 的確 – ターゲット特異的な機能応答 高感度 – 低濃度(nM)から測定可能 簡便 – ワンステップで簡易なプロトコル 確実 – 正確・直線的・高い再現性 本社所在地: 42501 Albrae Street, Fremont CA 94538 USA URL: http://www.discoverx.com/ 電話: +1-510-979-1415 (内線123 日本語可) FAX: +1-510-979-1650 Eメール: [email protected] 所在地: 〒135-0016 東京都江東区東陽2-2-20東陽駅前ビル URL: http://www.cosmobio.co.jp/ 技術サービス部 電話: 03-5632-9616 FAX: 03-5632-9614 Eメール: [email protected] DiscoveRx 42501 Albrae Street, Fremont, CA 94538 © 2015 DiscoveRx Corporation. 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