PMDC11由来エクソソームを用いたサイトメガロウイルスpp65 (CMVpp65)特異的細胞傷害性T細胞の誘導 材料と方法 u CD8+ T 細胞をMACS 磁気ビーズを用いて健常人(EO)末梢血単核 球より分離した。 u CD8+ T 細胞 (5×105 cells/well 96-well 丸底プレート)をCMVpp65 (HLA-A*24:02拘束性, 終濃度10 µg/ml)をパルスしたPMDC11の培 養上清より分離した(1×106 細胞/mlでAIM-V培地に浮遊し、パルス した上清1mlより分離)エクソソームを用いて刺激した。 u 細胞は、IL-2 (50U/ml) and IL-7 (10 ng/ml) 添加RPMI1640 (5%自己 血清) で培養した u エクソソームによる刺激は毎週行った。 140225-140326 exosomes isolated from 14 days CMVpp65-tetramer-PE PMDC11 w/o peptide PMDC11 w/ peptide 0.02 0.09 21 days CMVpp65-tetramer-PE CD8-FITC 0.04 0.66 CD8-FITC exosomes isolated from CMVpp65-tetramer-PE PMDC11 w/o peptide 0.04 PMDC11 w/ peptide 18.8 CD8-PerCP/Cy5.5 28 days 0.49 100 99.51 PD-1-APC 0.00 CD8-PerCP/Cy5.5
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