RS 140624 CTL(MT,mWT1,PMDC11)4w.pptx

健常人(MT)のCD8+T細胞とPMDC11
共培養法によるCTL誘導材料と方法
v  WT1ペプチドワクチン療法を受けた健常人の末梢血単核球から抗FITCマイクロ
ビーズを用いてCD8+T細胞の分離を行った。
v  CD8+T細胞と以下の3つを共培養した。
①mWT1 peptide(10µg/ml)
②PMDC11
③PMDC11 pulsed mWT1 peptide(10µg/ml)
v  CD8+ T細胞(1.2x106/well)を24ウェルプレートに1.5mlで共培養した。
v  細胞はRPMI 1640 (5%AS) supplemented with IL-2 (50U/ml) and IL-7 (10 ng/ml)
で培養を行った。
v  培養一週間後にmWT1テトラマー解析を行い、CD8+T 細胞は毎週PMDC11で刺
激を行った。
140604-140624
mWT1 tetramer-PE mWT1 peptide
PMDC11 pulsed
mWT1peptide PMDC11
0.04
0.04
0.03
0.03
0.03
0.03
7days
CD8-FITC mWT1 tetramer-PE 0.6×106個
1.1×106個
004 MT CTL 2w mWT1peptide.004
1.4×106個
005 MT CTL 2w PMDC11.005
0.96
006 MT CTL 2w pulsed PMDC11.006
0.05
0.04
14days
100
101
102
CD8-FITC
103
0.6×106個
104
100
101
102
CD8-FITC
103
CD8-FITC 1.8×106個
104
100
101
102
CD8-FITC
103
104
2.3×106個
140604-140624
mWT1 tetramer-PE mWT1 peptide
PMDC11 pulsed
mWT1peptide PMDC11
004 MT CTL mWT1 pep.004
005 MT CTL PMDC11.005
0.02
006 MT CTL PMDC11 pep+.006
0.02
0.05
21days
100
101
102
CD8-FITC
103
104
101
102
CD8-FITC
103
104
CD8-FITC 1.5×105個
mWT1 tetramer-PE 100
1.6×106個
0.02
0.02
100
101
102
CD8-FITC
103
104
2.1×106個
0.06
28days
CD8-FITC 7.5×104個
4.3×106個
3.7×106個
140604-140624

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