High-Salt High-SaltPrecipitation PrecipitationSolution So Code CodeNo. No.313-06341 313-06341 50 50mlml Ⅰ 製品説明 マニュアル（第 2 版）20140709HT Ⅴ 使用方法 本 品 は ISOGEN、ISOGEN-LS によってポリサッ カライド、プロ テオグリカ ン、グリコーゲ ンなどを多 く 核 酸 溶 液 （500 µl ） 250 µl 含 む試 料 から RNA を抽 出 する際 に、それら夾 雑 High-Salt Precipitation Solution （ 核 酸 溶 液 の 1/2 容 量 ） 物 の混 入 をより効 果 的 に抑 えるために使 用 する溶 軽く転倒混和 液 です。 250 µl また、ISOPLANT や ISOPLANT Ⅱなど、他 の核 Isopropanol （ 核 酸 溶 液 の 1/2 容 量 ） 酸 抽 出 キ ッ ト に も 同 様 の 目 的 で使 用 す る こ とが で 軽く転倒混和 きます。 5 - 15 分 間 室温で静置 遠 心 （ 10 K×g, 15 分 間 ） * Ⅱ 組成 上清を捨てる 1.2 mol/l NaCl，0.8 mol/l Sodium citrate 沈 殿 (オートクレーブ済 み,DNase フリー,RNase フリー) 1 ml 70% エ タ ノ ー ル 軽く混合 Ⅲ 保存方法 遠 心 （ 7.5 K×g, 5 分 間 ） 室温保存 沈 殿 沈殿を風乾 Ⅳ 使 用 上 の注 意 1. ddH 2 O,TE(pH8.0) で 溶 解 本 品 は 試 験 研 究 用 試 薬 ですの で、 医 薬 品 、 その他 の目 的 にはご使 用 になれません。 2. * 12 K× g の場 合 は、遠 心 時 間 を 8 分 間 に 短 縮 可 能 です。 本 品 の 取 扱 い は 、 マ ニ ュア ル 記 載 内 容 通 り に行 ってください。 マニュアル記 載 内 容 と異 3. 核酸溶液（精製後） Ⅵ 参考文献 なっ たお 取 り扱 いに よるト ラ ブルに つきま して Chomczynski, P. and Mackey, K. : BioTechniques, は、弊 社 では責 任 を負 いかねます。 19, 492-495(1995). 低 分 子 RNA の回 収 の場 合 、本 品 のご使 用 関 連 製 品 や実 験 例 などその他 詳 細 については はお勧 めしません。かえって収 量 が低 下 する ニッポンジーンのホームページをご覧 下 さい。 こ と が あ りま す 。 （ 詳 細 は ニ ッ ポ ン ジ ー ン の ホームページをご参 照 ください。） 株 式 会 社 ニッポンジーン 遺 伝 子 工 学 研 究 用 試 薬 http://www.nippongene.co m/ 株式会社ニッポンジーン 〒930-0834 富山市問屋町 1-8-7 TEL 076-451-6548 URL http://www.nippongene.com/ FAX 076-451-6547 Ⅶ 使用例 ① ISOGEN を用 いた RNA 抽 出 の場 合 ② ISOPLANT を 用 い た DNA 抽 出 の 場 合 サンプル サンプル 1 ml 300 µl ISOG EN 溶解またはホモジナイゼーション 室温 5 分間 200 µl SolutionⅠ ボ ル テ ッ ク ス （ 1 ~2 秒 ） 150 µl 放置 SolutionⅡ ボ ル テ ッ ク ス （ 5 ~6 秒 間 ） Chloroform イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン ,50℃ ,15 分 間 15 秒 間 、 激 し く 混 合 150 µl 室温 2 - 3 分間 放置 遠 心 （ 4℃ , 12 K×g, 15 分 間 ） 水 SolutionⅢ ボ ル テ ッ ク ス （ 1 ~2 秒 ） 氷 上 ,15 分 間 相 （ 500 µl ） 遠 心 （ 4℃ , 12 K×g, 15 分 間 ） 250 µl Isopropanol 250 µl High-Salt Precipitation Solution 水 相 2~2.5 倍 量 エ タ ノ ー ル 転倒混和 5 - 15 分 間 混合 遠 心 （ 4℃ , 12 K×g, 10 分 間 ） 室温で静置 遠 心 （ 4℃ , 12 K×g, 8 分 間 ） 沈 沈 殿 （ ゼ ラ チ ン 状 の DNA の 場 合 は 以 下 の 操 作 を 行 う ） 殿 1 - 1.5 ml TE ま た は H 2 O に て 溶 解 (500 µl) 70% エ タ ノ ー ル 250 µl 軽く混合 High-Salt Precipitation Solution (溶 解 液 の 1/2 容 量 ) 遠 心 （ 4℃ , 7.5 K×g, 5 分 間 ） 十分に撹拌 沈 殿 250 µl 沈殿を風乾 Isopropanol (溶 解 液 の 1/2 容 量 ) ddH 2 O,TE (pH8.0) or 0.5 % SDS で 溶 解 撹拌 total RNA 溶 液 直 ち に 遠 心 （ 4℃ , 10 K×g, 15 分 間 ） 沈 殿 注 ) 低 分 子 RNA の回 収 の場 合 、本 品 のご 使 用 はお勧 め 1 ml しません。かえって収 量 が低 下 するこ とがあります。 遠心 沈 70% エ タ ノ ー ル 殿 乾燥 TE (pH8.0) DNA 溶 液 株式会社ニッポンジーン High-Salt Precipitation Solution マニュアル（第 2 版）20140709HT
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