脱ユビキチン化酵素(DUB)活性測定用試薬 UbiQ社は、各種の脱ユビキチン化酵素活性測定用試薬を販売しています。通常はアミド系とイソペプチド系の試 薬です。 fluorescence/bioluminescence DUB activity assay reagents1 ユビキチンがアミド基を介してリポータ ーに結合しており、脱ユビキチン化酵 素(DUB)によって分解されると蛍光を 発するか、酵素反応性を持つようにな ります。 Isopeptide based fluorescence polarization (FP) DUB activity assay reagents2 ユビキチン(Ub)/ユビキチン様タンパク質(UbL)がネイティブのイソペプチド基を介して TAMRA 標識タンパク質に結合されています。この高分子量試薬は励起されると大きく偏 光します。この試薬が DUB に分解されると標識されている色素はより小さく速い回転を するペプチドに共有結合した形となり偏光度は小さくなります。DUB 活性はこの偏光の 違いによってモニターできます。 Luc, Rh110, AMC read-out Class I FP Class II FP native isopeptide bond native isopeptide bond Ub Ub substrate based peptide Lys-Gly Ub Ub-Rh110Gly Class 2 FP reagent Class 1 FP reagent Specifications Specifications AMC: exc/emi - 380/460nm Rh110Gly: exc/emi - 485/535nm Luc: exc/emi - 400/505nm native isopeptide bond high wavelength read out exc/emi - 550/590 nm proven in numerous industrial scale HTS campaigns Reagents Reagents Code Name Code Name UbiQ-001 UbiQ-002 UbiQ-036 Ub-AMC Ub-Rh110Gly Ub-Luc UbiQ-012 UbiQ-019 UbiQ-020 UbiQ-021 UbiQ-022 UbiQ-073 Ub-FP Nedd8-FP SUMO1-FP SUMO2-FP SUMO3-FP ISG-15FP Specifications native isopeptide bond high wavelength read out exc/emi - 550/590 nm proven in numerous industrial scale HTS campaigns introduces substrate context custom design possible Reagents Code Name UbiQ-043 UbiQ-044 UbiQ-045 UbiQ-046 UbiQ-047 UbiQ-048 UbiQ-049 K6(Ub) Ub(1-14)-FP K11(Ub) Ub(4-17)-FP K27(Ub) Ub(20-33)-FP K29(Ub) Ub(22-35)-FP K33(Ub) Ub(26-39)-FP K48(Ub) Ub(41-54)-FP K63(Ub) Ub(56-69)-FP UbiQ-029 K561(Ub) FANCD2(557-565)FP UbiQ-030 UbiQ-038 K13(Ub) PTEN(5-21)-FP K119(Ub) H2AX(115-143)- UbiQ-039 K119(Ub( H2AX(115-143)S140(PO4)-FP Literature 1 (a) Dang et al. Biochemistry 1998, 37, 1868. (b) Mason et al. Biochemistry 2004, 43, 6535. (c) Hassiepin et al. Analytical Biochem 2007, 371, 201. (d) Orcutt et al. Biochim Biophys Acta 2012, 1823, 2079. 2 (a) Huang and Aulabuagh Methods in Molecular Biology 2009, 565, 127. (b) Tirat et al. Analytical Biochemistry 2005, 343, 244. (c) Geurink and El Oualid et al. ChemBiochem 2012, 13, 293. (d) Mevissen et al. Cell 2013, 154, 169. fact sheet, June 2014 〒541-0047 大阪市中央区淡路町 2 丁目 2 番 5 号 TEL:06-6231-6146 FAX:06-6231-6149 〒300-2655 茨城県つくば市万博公園西 F26 街区 1 インプレス 103 TEL:029-848-3220 FAX:029-848-3221
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