ウイルスベクター関連製品ご購入時のご注意 遺伝子工学 ウイルスベクター アデノウイルスベクター構築システム AdenoQuick Cloning System 製品ページ番号:6058 E. coli 内 で の 相 同 組 換 え を 必 要 とし な い directional cloning により,迅速にアデノウイルスベクターを構築で きるシステムです。コスミドを用いることにより,完全長 のアデノウイルスゲノム DNA をクローニングできます。 *印の製品はウイルスベクター関連製品のため,購入時にご使用者 確認書が必要です。ご注文の際は,フナコシホームページ(http:// www.funakoshi.co.jp/document_download/) に 掲 載 の「 ウ イルスベクター関連製品ご使用者確認書」に必要事項をご記入の上, 販売店担当者にお渡し下さい。 なお,製品をご使用の際には「遺伝子組換え生物等の使用等の規制 による生物の多様性の確保に関する法律(カルタヘナ法) 」および所 属組織における安全管理規定に従い,しかるべき施設で実験を行っ て下さい。詳細は文部科学省ライフサイエンス課のホームページを ご 覧 下 さ い。 (http://www.lifescience.mext.go.jp/bioethics/ anzen.html) 遺伝子工学 フナコシニュース 2015 年 1 月 1 日・15 日合併号(No.580) funakoshi news ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 AdenoQuick Cloning System の原理 特 長 ● 目的遺伝子を挿入したシャトルベクターを,制限酵素処理によ ■ E1 置換型の場合 Expression Cassette る directional cloning でアデノウイルス発現プラスミドに 組み込み,λファージパッケージングによって E. coli を形質 Swal MCS Pacl 転換します。完成したコスミドを直線化した後,ヘルパー細胞 cos pE1.1 2.7 kb (HEK293 細胞など)にトランスフェクションして組換えウイ キットには形質転換の際に必要な,λファージパッケージング ● サイズの大きなアデノウイルスベクターのクローニングは困難 Alw NI Bst API Dra lll Pfl Ml Alw NI or BstAPI or Dra lll or Pfl MI 用の試薬類が含まれています。 Ad5 0-1 Kanr cos とされてきましたが,AdenoQuick システムでは薬剤耐性遺伝 Insert Sfil Sfil 子(カナマイシン)による選択,およびコスミドの λcos 部位 Swal Pacl を利用することにより,36kb 以上のアデノウイルス遺伝子ク (±E4) ローニングに適合し,ほぼ 100%の効率でポジティブクローン ori Ampr 相同組換えを必要とせず,DH5 α,XL-1 Blue,Top10 など 21 AdenoQuick1.1 AdenoQuick1.2 pAd361,pAd362 (±E3) が得られます。 ● ori Kanr ルスを産生させます。 ● PflMl Dralll Bst API Alw NI Ad5 0-1 Ad5 Pac or Swa l l の recAendA 株に形質転換を行えます。 helper cells(293 細胞) ※シャトルベクターに目的遺伝子発現用のプロモーター(CMV な ど)は含まれません。プロモーターと目的遺伝子を含む発現 カセットを挿入して下さい。 アデノウイルスプラスミドとシャトルベクター,コントロール DNA,λファージパッケージング用試薬を含むキットです。 ※第 2 世代アデノウイルスベクター,CrAd については,キット ■ E1 / E3 領域に 2 種類の遺伝子を挿入する場合 Expression cassette Alw NI BstAPI Dralll Pfl Ml cos MCS 製品はありません。ベクター,プラスミド単品を組み合わせて ご購入下さい。 Expression cassette PflMl Dra lll BstAPI Alw NI Swal Pacl Kan 包装 / 価格(¥) AdenoQuick1.1 Kit (10 reactions) * ODI QK-01 F 1 kit / 95,000 pE3.1 2.3 kb pE1.2 Kanr 2.4 kb ori Alw NI or BstAPI or Dra lll or Pfl MI Kanr 95,000 キット内容:pE1.1,AdenoQuick1.2(⊿ E3),ControlAdβgal, λ packaging extract, 10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium AdenoQuick1 Twin Kit (20 reactions) * ODI QK-03 F 1 kit / 136,000 キット内容:pE1.1,AdenoQuick1.1(WT E3),AdenoQuick1.2(⊿ E3), Ad5 0-1 Pac l Swa l Sfi l 1 kit / AlwNI or BstAPI or Dralll or PflMI cos 10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium AdenoQuick1.2 Kit (10 reactions) * ODI QK-02 F Alw NI BstAPI Dra lll PflMl Sfi l ±E4 Ampr ori ΔE3 ΔE1 Sfi l Sfi l AdenoQuick13.1 pAd363 Ad5 Pac or Swa l l ControlAd β gal, λ packaging extract, 10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium AdenoQuick13.1 Kit (10 reactions) * ODI QK-04 F 1 kit / 95,000 helper cells(293 細胞) キット内容:pE1.2,pE3.1,AdenoQuick13.1(⊿ E3) ,ControlAdβgal, λ packaging extract, 10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium お問い合わせ先: 〈試薬〉TEL:03-5684-1620 / FAX:03-5684-1775 / e-mail:[email protected] 本誌に掲載されている製品はすべて研究用です キット内容:pE1.1,AdenoQuick1.1(WT E3) ,ControlAdβgal, λ packaging extract, MCS ori r 品 名 メーカー 商品コード PflMl Dra lll BstAPI Alw NI Ad5 0-1
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