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ウイルスベクター関連製品ご購入時のご注意
遺伝子工学
ウイルスベクター
アデノウイルスベクター構築システム
AdenoQuick Cloning System
製品ページ番号:6058
E. coli 内 で の 相 同 組 換 え を 必 要 とし な い directional
cloning により,迅速にアデノウイルスベクターを構築で
きるシステムです。コスミドを用いることにより,完全長
のアデノウイルスゲノム DNA をクローニングできます。
*印の製品はウイルスベクター関連製品のため,購入時にご使用者
確認書が必要です。ご注文の際は,フナコシホームページ(http://
www.funakoshi.co.jp/document_download/) に 掲 載 の「 ウ
イルスベクター関連製品ご使用者確認書」に必要事項をご記入の上,
販売店担当者にお渡し下さい。
なお,製品をご使用の際には「遺伝子組換え生物等の使用等の規制
による生物の多様性の確保に関する法律(カルタヘナ法)
」および所
属組織における安全管理規定に従い,しかるべき施設で実験を行っ
て下さい。詳細は文部科学省ライフサイエンス課のホームページを
ご 覧 下 さ い。
(http://www.lifescience.mext.go.jp/bioethics/
anzen.html)
遺伝子工学
フナコシニュース 2015 年 1 月 1 日・15 日合併号(No.580)
funakoshi news
※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。
AdenoQuick Cloning System の原理
特 長
●
目的遺伝子を挿入したシャトルベクターを,制限酵素処理によ
■ E1 置換型の場合
Expression Cassette
る directional cloning でアデノウイルス発現プラスミドに
組み込み,λファージパッケージングによって E. coli を形質
Swal
MCS
Pacl
転換します。完成したコスミドを直線化した後,ヘルパー細胞
cos
pE1.1
2.7 kb
(HEK293 細胞など)にトランスフェクションして組換えウイ
キットには形質転換の際に必要な,λファージパッケージング
●
サイズの大きなアデノウイルスベクターのクローニングは困難
Alw NI
Bst API
Dra lll
Pfl Ml
Alw NI or BstAPI or
Dra lll or Pfl MI
用の試薬類が含まれています。
Ad5 0-1
Kanr
cos
とされてきましたが,AdenoQuick システムでは薬剤耐性遺伝
Insert
Sfil Sfil
子(カナマイシン)による選択,およびコスミドの λcos 部位
Swal
Pacl
を利用することにより,36kb 以上のアデノウイルス遺伝子ク
(±E4)
ローニングに適合し,ほぼ 100%の効率でポジティブクローン
ori
Ampr
相同組換えを必要とせず,DH5 α,XL-1 Blue,Top10 など
21
AdenoQuick1.1
AdenoQuick1.2
pAd361,pAd362
(±E3)
が得られます。
●
ori
Kanr
ルスを産生させます。
●
PflMl
Dralll
Bst API
Alw NI
Ad5 0-1
Ad5
Pac or Swa
l
l
の recAendA 株に形質転換を行えます。
helper
cells(293 細胞)
※シャトルベクターに目的遺伝子発現用のプロモーター(CMV な
ど)は含まれません。プロモーターと目的遺伝子を含む発現
カセットを挿入して下さい。
アデノウイルスプラスミドとシャトルベクター,コントロール
DNA,λファージパッケージング用試薬を含むキットです。
※第 2 世代アデノウイルスベクター,CrAd については,キット
■ E1 / E3 領域に 2 種類の遺伝子を挿入する場合
Expression cassette
Alw NI
BstAPI
Dralll
Pfl Ml
cos MCS
製品はありません。ベクター,プラスミド単品を組み合わせて
ご購入下さい。
Expression cassette
PflMl
Dra lll
BstAPI
Alw NI
Swal
Pacl
Kan
包装 / 価格(¥)
AdenoQuick1.1 Kit (10 reactions) *
ODI
QK-01
F
1 kit /
95,000
pE3.1
2.3 kb
pE1.2
Kanr 2.4 kb
ori
Alw NI or BstAPI or
Dra lll or Pfl MI
Kanr
95,000
キット内容:pE1.1,AdenoQuick1.2(⊿ E3),ControlAdβgal, λ packaging extract,
10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium
AdenoQuick1 Twin Kit (20 reactions) *
ODI
QK-03
F
1 kit / 136,000
キット内容:pE1.1,AdenoQuick1.1(WT E3),AdenoQuick1.2(⊿ E3),
Ad5 0-1
Pac l Swa l
Sfi l
1 kit /
AlwNI or BstAPI or
Dralll or PflMI
cos
10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium
AdenoQuick1.2 Kit (10 reactions) *
ODI
QK-02
F
Alw NI
BstAPI
Dra lll
PflMl
Sfi l
±E4
Ampr ori
ΔE3
ΔE1
Sfi l
Sfi l
AdenoQuick13.1
pAd363
Ad5
Pac or Swa
l
l
ControlAd β gal, λ packaging extract, 10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium
AdenoQuick13.1 Kit (10 reactions) *
ODI
QK-04
F
1 kit /
95,000
helper
cells(293 細胞)
キット内容:pE1.2,pE3.1,AdenoQuick13.1(⊿ E3)
,ControlAdβgal, λ packaging
extract, 10% Maltose, 1 M MgSO4, SM medium
お問い合わせ先:
〈試薬〉TEL:03-5684-1620 / FAX:03-5684-1775 / e-mail:[email protected]
本誌に掲載されている製品はすべて研究用です
キット内容:pE1.1,AdenoQuick1.1(WT E3)
,ControlAdβgal, λ packaging extract,
MCS
ori
r
品 名 メーカー 商品コード
PflMl
Dra lll
BstAPI
Alw NI
Ad5 0-1