pMEI-5 Neo DNA Code No. 3655 Size: 20 μg Shipping at － 20℃ Stored at － 20℃ ＊ 2 years from date of receipt under proper storage conditions. Lot No. Concentration: Volume: μg/μl μl Restriction enzyme map: Amp r 5' LTR MLV U3 MLV R MLV U5 Description: This product is a plasmid vector for producing a retrovirus vector with high expression efficiency. By transfecting the vector into an appropriate packaging cell line, the vector expresses transient or stable transcribed product containing virus packaging signal ( ψ ), target gene and selective marker. This vector possesses LTR and ψ(viral packaging signal), but not the structural gene necessary for particle formation and replication, which are gag , pol , and env . Because this vector contains intron with high ability of splicing, it yields highly transcription efficiency. This vector contains neomycin resistance gene as a selective marker. 2-8 fold higher gene expression level can be expected compared to pDON-AI-2 series. Form: 10 mM 1 mM Tris-HCl, pH8.0 EDTA Preparation: cccDNA was purified by CsCl-EtBr ultracentrifugation. Chain length: 5,820 bp Purity: 1.Contains over 70% double-stranded covalently closed circular DNA (RF I) by agarose gel electrophoresis. 2.Confirmed to maintain cloning sites by dideoxy sequencing method. 3.Confirmed to be cleaved at a single site by restriction enzymes Pma C I, Apa I, Sac II, Not I, Bgl II, Cla I, Bam H I, Sal I, Hpa I. Applications: Retrovirus-mediated gene transfer into mammalian cells. Reference: 1.Kim, H. S., Yu, S. S., Park, S. J., Robbins, D. P., An, S. C. and Kim, S. (1998) Journal of Virology , 72, 994-1004. 2.Yu, S. S., Kim, J. M., and Kim, S. (2000) Gene Ther., 7, 794-804. 5820 bp MLV U5 MLV R MLV U3 3' LTR SD ψ pMEI-5 Neo Intron + SA minimal SV40 promoter Neo MCS PmaCI (1760) Apa I (1765) Sac II (1769) Not I (1771) Bgl II (1779) Cla I (1785) Bam HI (1791) Sal I (1797) Hpa I (1803) r Note: pDON-AI Vectors and pMEI-5 Vectors are covered by U.S. Patent Nos. 6190907, 6451595 or their foreign counterparts, which are owned by ViroMed Inc. (KOREA) and are licensed to Takara Bio Inc. The use of these products is limited for research purposes. It must not be used for clinical purpose or in vitro diagnosis. These products, any transformants or biomaterials obtained by using these products are prohibited to be transferred to third parties. Users must contact TAKARA when they plan to use these products for purposes other than research use. Any inquiries about the licenses relating to these products should be made to Takara Bio Inc. directly or through Takara Bio’s subsidiaries. (Please refer to Takara Bio’ s website. http://www.takara-bio.com). [Takara Bio Inc.] Seta 3-4-1, Otsu, Shiga 520-2193 JAPAN Phone: +81 77-543-7247 Fax: +81 77-543-9254 NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE [L21] pDON Vecter This product is covered by the claims of U.S. Patent No. 6,190,907, 6,451,595 and their foreign counterpart patent claims. Note This product is intended to be used for research purpose only. They are not to be used for drug or diagnostic purposes, nor are they intended for human use. They shall not to be used products as food, cosmetics, or utensils, etc. Takara products may not be resold or transfered, modified for resale or transfer, or used to manufacture commercial products without written approval from TAKARA BIO INC. If you require licenses for other use, please call at +81 77 543 7247 or contact from our website at www.takara-bio.com. Produced by TAKARA BIOTECHNOLOGY（DALIAN）CO., LTD. v201001Da_S pMEI-5 Neo DNA Code No. 3655 Size: 20 μg Shipping at － 20℃ Stored at － 20℃ ＊適切に保存し、受取り後 2 年を目途にご使用ください。 Lot No. （英文面をご覧ください。） 濃度： （英文面をご覧ください。） 容量： （英文面をご覧ください。） ●製品説明 本製品は高発現遺伝子導入用レトロウイルスベクターである。 本ベクターは、パッケージング細胞株へのトランスフェクションによっ て一時的あるいはゲノムに組み込まれてウイルスパッケージングシグナ ル（Ψ）、目的遺伝子、選択マーカーを含む転写産物を安定して発現する。 本ベクターは、LTR とパッケージングシグナル（Ψ 配列）以外の MoMLV 由来遺伝子（gag, pol, env コード配列）を含まず、かつスプライシング能 の高いイントロンを持つ為に、高い転写能が得られる点が特徴である。 また、薬剤選択マーカーとしてネオマイシン耐性遺伝子を有している。 本ベクターを用いることで、pDON-AI-2 シリーズに比べ、約 2 ～ 8 倍の 遺伝子発現が期待でき、導入遺伝子を高発現させることが可能になる。 ●形状 10 mM 1 mM Tris-HCl, pH8.0 EDTA ●調製 CsCl-EtBr 超遠心により、cccDNA を精製した。 Amp r 5' LTR MLV U3 MLV R MLV U5 5820 bp MLV U5 MLV R MLV U3 ●純度 1．二重鎖 covalently closed circular form I（RF I）を 70％以上含んでいる。 2．dideoxy 法によるシーケンスの結果、クローニングサイトが保持され ていることを確認している。 3．制限酵素Pma C I, Apa I, Sac II, Not I, Bgl II, Cla I, Bam H I, Sal I, Hpa I にて 1 ヵ 所切断できることを確認している。 レトロウイルスベクターを介した動物細胞への遺伝子導入。 ●参考文献 1．Kim, H. S., Yu, S. S., Park, S. J., Robbins, D. P., An, S. C. and Kim, S. (1998) Journal of Virology , 72, 994-1004. 2．Yu, S. S., Kim, J. M., and Kim, S. (2000) Gene Ther., 7, 794-804. MCS SD ψ pMEI-5 Neo Intron + SA minimal SV40 promoter 3' LTR ●鎖長 5,820 bp ●用途 ● pMEI-5 Neo DNA の制限酵素地図 Neo PmaCI (1760) Apa I (1765) Sac II (1769) Not I (1771) Bgl II (1779) Cla I (1785) Bam HI (1791) Sal I (1797) Hpa I (1803) r ●使用上の注意 pDON-AI ベクターおよび pMEI-5 ベクターは ViroMed 社（韓国）よりライ センスを受け、タカラバイオ（株）が製造、販売しています。 本製品につきましては、以下の点にご注意ください。 1．使用制限および譲渡禁止 本製品は研究用として販売しております。研究目的以外に使用するこ とはできません。 （また、本製品ならびに本製品により得られた生物材料を第三者へ譲 渡することはできません。） 2．研究目的以外の使用に関するライセンス 本製品を研究目的以外に使用される場合は、個別にライセンス契約の 締結が必要です。 ライセンス契約に関するお問い合わせ先： タカラバイオ株式会社 バイオインダストリー部 TEL. 077-543-7235 FAX. 077-543-2312 ● 注意 本製品は研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨 床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、 家庭用品等として使用しないでください。 タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のため の改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。 v201001Da_S 製品についての 技術的なお問い合わせ先 TaKaRa テクニカルサポートライン Tel 077-543-6116 Fax 077-543-1977
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