ロイコトリエン類の一斉分析 Analysis of Leukotrienes by LC/MS/MS

Application No. L2103
ロイコトリエン類の一斉分析
Analysis of Leukotrienes by LC/MS/MS
ロイコトリエン(LT)はアラキドン酸から生合成される生理活性物質で、その中でもアミノ酸が結合したLTC4、LTD4及
びLTE4は喘息と深く関連しています。ここではLTsとその代謝物を液体クロマトグラフィー/質量分析法(LC/MS/
MS)により、高感度分析に最適なMRMモードで一斉分析を行いました。
キーワード : ロイコトリエン; 代謝物; LC/MS/MS; 多重反応モニタリング
Key words : Leukotrienes; Metabolites; Liquid Chromatography/Mass spectrometry; Multiple Reaction Monitoring (MRM); UHPLC
Column
: L-column2 ODS (USP category : L1)
Sample
:
1. 20-COOH-LTB4
5. LTC4
2. 20-OH-LTB4
3. LTD4
6. LTF4
7. LTB4
4. LTE4
8. 12-Keto-LTB4
in C2H5OH/H2O (50/50) (0.5 mg/L each)
[Analytical conditions]
Column
: L-column2 ODS (C18, 2μm, 12 nm)
Column size : 2.1 mm I.D. ×150 mm L.
Mobile phase : A: CH3CN; B: 0.1% HCOOH in H2O
A/B, 30/70-80/20 (0-30 min)
Flow rate
: 0.4 mL/min
Temperature : 40℃
Detection
: ESI-MS(-)
Inj. Vol.
: 2 μL
System
: LC: Ultimate 3000 Bio RS (Thermo Fisher Scientific K.K.); MS/MS: 3200 Q TRAP (AB Sciex)
■ロイコトリエン類の一斉分析
3
1
4, 5
6
2
7
8
Fig. Mass chromatogram of Leukotrienes and the metabolites using LC/MS/MS
1/2
無断転用禁止
Application Data Sheet for LC
Application No. L2103
■MRMクロマトグラム
20-COOH-LTB4
20-OH-LTB4
LTD4
LTE4
LTC4
LTF4
LTB4
12-Keto-LTB4
Table MRM transitions and retenstion time of Leukotrienes and the metabolites
No
1
2
3
4
5
6
7
8
Name
20-COOH-LTB4
20-OH-LTB4
LTD4
LTE4
LTC4
LTF4
LTB4
12-Keto-LTB4
Q1(m/z)
365.0
351.0
495.1
438.1
624.1
567.1
335.0
333.0
Q3(m/z)
129.0
195.2
143.0
115.1
143.1
171.2
195.1
179.0
Time(min)
3.60
3.89
7.57
9.68
9.68
10.16
12.91
14.37
ロイコトリエン類の中でもアミノ酸が結合したLTC4、LTD4、LTE4、LTF4のピーク形状はカラムによってはテーリングの
起こりやすい化合物です。L-column2 ODS 2μm を使用したところ、シャープなピークを示しました。また、カラム圧
もUHPLCカラムにしては低く、今回の条件で最大50 MPaでした。
移動相は必ずろ過してからお使いください。
Saka1401
東京事業所 クロマト技術部
Chromatography Department, CERI Tokyo
2/2
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