B-cell ELISpot イムノグロブリン ＆ B細胞応答研究ツール ELISpot のヒントとコツ、 溶液サンプル中の抗体反応を測定するために 技術情報をコスモ・バイオウェブ上で紹介しています。 デザインされたアッセイはたくさんありますが、 http://www.cosmobio.co.jp/ELISpot 抗体分泌細胞（antibody-secreting cell；ASC） そのものにフォーカスしたアッセイの数はわずか です。その中のひとつが B-cell ELISpot キットです。 図 2. B-cell ELISpot の原理 ELISpot 技術をお使いいただける研究 1 1）キャプチャー抗 Ig 抗体を 96 ウェル ELISpot プレートに固相化 ● 液性免疫研究 ● ワクチンで誘導された抗体応答 2-4）細胞を加えインキュベーションし、分泌抗体をキャ プチャー抗体に結合させる ● B 細胞が分泌する異なるアイソタイプ 抗体の測定 5）細胞を除去後、ウェルにビオチン標識抗原（抗原特異 的細胞の検出）（B）あるいはビオチン標識抗 Ig 抗体 （すべての抗体分泌細胞の検出）（C）を加える ELISpot はサンプル中の抗体分泌細胞と抗 2 6-7）ストレプトアビジン - 酵素、基質を加えてスポッ トを可視化 8） 顕微鏡あるいは ELISpot リーダーでス ポットを評価・数値化 原特異的抗体分泌細胞の高感度な測定と同定 3 の両方が可能です（図 1）。 ヒト、サル、マウスサンプルの異なるアイソタイプの B 細胞分泌抗体の解析用キットと抗原特異的抗体分泌細胞検出 4 システムをご用意しています。 さらに従来法のプロトコールを改良して、抗原をプレートに固定化するので B はなく、抗 Ig 抗体をコートして、抗原はビオチン化して検出に使用すること B B B B B B 5 B が可能です（図 2）。 B B B B B B B B B B B E B ストレプト アビジン- 酵素 B C E E E C E E A E E E E B E E A E E E E E E E B B B B ビオチン化 抗Ig抗体 B ビオチン化 抗原 B B B B B B E E B 抗原特異的IgG Ig ELISpot ELISpot Antigen-specific B B B 細胞から分泌 されたIg 抗原 B E E E B 6 E B B E B E E B B B キャプチャー用 抗Ig抗体 B B E B E E E B B E B B 7 E B E E B B B トータル ELISpot TotalIgIgG ELISpot 8 図 1. 抗原特異的 B-cell ELISpot の 2 つの手法の図式化 (A) 抗原を固相化に使用 (B) 抗原をビオチン標識して＊ 検出に使用 図の例では Ig 産生細胞に限定した解析を示し、Ig 分泌細胞の総数は (C) で示すように定量 する。 ＊B-Cell ELISpot キットにビオチン標識キットは含まれておりません。 Antigen-specific (B) Total Ig (C) B-cell ELISpot イムノグロブリン＆B 細胞応答研究ツール 構成内容 ●キャプチャー抗体 ●基質（BCIP/NBT-plus または TMB） ●ビオチン標識検出抗体 ●白色 ELISpot プレート ●ストレプトアビジン -ALP または -HRP ●リコンビナント IL-2 ＊ ＊メモリー B 細胞の刺激処理用試薬入り （品番 3810-2AW-Plus と 3810-2HW-Plus には CD40 抗体とリコンビナント IL-4 が含まれます） ●R848 ＊ 商品リスト Mabtech AB メーカー略号：MAB 品名 適用種 kit Human IgA ELISpot PLUS kit Human IgE ELISpot PLUS Human IgM ELISpot PLUS Monkey IgA ELISpot PLUS Mouse IgA ELISpot PLUS Mouse IgG ELISpot kit kit kit PLUS Mouse IgM ELISpot Human kit Human IgG ELISpot PLUS PLUS Human 品番 希望販売価格 ALP 4 プレート分 ** 3860-2AW-Plus ¥102,000 HRP 4 プレート分 ** 3860-2HW-Plus ¥102,000 ALP 4 プレート分 ** 3810-2AW-Plus ¥128,000 4 プレート分 ** 3810-2HW-Plus ¥128,000 Human, ALP 4 プレート分 ** 3850-2AW-Plus ¥102,000 Monkey HRP 4 プレート分 ** 3850-2HW-Plus ¥102,000 Human Monkey Mouse kit 包装 HRP Mouse kit 検出 Mouse ALP 4 プレート分 ** 3840-2AW-Plus ¥128,000 HRP 4 プレート分 ** 3840-2HW-Plus ¥128,000 ALP 4 プレート分 ** 3860M-2AW-Plus ¥82,000 HRP 4 プレート分 ** 3860M-2HW-Plus ¥82,000 ALP 4 プレート分 ** 3835-2AW-Plus ¥128,000 HRP 4 プレート分 ** 3835-2HW-Plus ¥128,000 ALP 4 プレート分 ** 3825-2AW-Plus ¥102,000 HRP 4 プレート分 ** 3825-2HW-Plus ¥102,000 ALP 4 プレート分 ** 3845-2AW-Plus ¥128,000 HRP 4 プレート分 ** 3845-2HW-Plus ¥128,000 ＊＊ 白色プレート ELISpot が気になる方には、このカタログがオススメ！ マブテック社の ELISpot キットを中心に、全商品を掲載した日本語カタログです。 原理やアプリケーション例、FAQ も掲載しています。 1 コスモのホームページへ Go! PDF がダウンロードできます ! 2 トップページの「記事 ID 検索」をクリック！ 記事 ID 検索 1004 で、 検索してください。 1004 www.cosmobio.co.jp 3 記事 ID「1004」を入力し、 または、弊社商品取扱い販売店様へ 検索をクリック！ ご請求ください。 ● 希望販売価格 ･･･「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は２０１4 年 10月１日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。 ● 使 用 範 囲 ･･･ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。 弊社商品取扱い販売店、 または Web から ご請求ください。 (12103)
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