タンパク質定量 抗体ペア、ELISAおよびマルチプレックスアッセイ Novex® 免疫アッセイ Life Technologies ™ では、高感度で特異的な、細胞内または細胞外タンパク質の検出のために、広範囲な免疫ベース の製品を、簡便ですぐに使えるフォーマットで提供しています。当社では、単一分析物の解析のための抗体ペアキットお よび酵素結合免疫吸着測定（ELISA）キット、さらに複数ターゲット同時解析のためのマルチプレックスアッセイを開発 しました。Novex® 免疫アッセイは、以下の研究に使用することが可能です。 ターゲットとするタンパク質： • サイトカイン • ケモカイン • シグナリングタンパク質 • 受容体 • 神経生物学マーカー • 成長因子 • 接着分子 種： • ヒト • マウス • ラット • サル • ブタ • ウシ サンプルのタイプ： • 血清 • 血漿 • 細胞培養上清 • 細胞溶解物 • 組織ホモジネート •尿 • 脳脊髄液 • その他のサンプルタイプ 抗体ペアキット、ELISAキットおよびマルチプレックスアッセイキットの特性 免疫アッセイのタイプ 抗体ペアキット （3ページ） ELISAキット （5ページ） マルチプレックスアッセイキット （14ページ） ready-to-use試薬 分析感度* ダイナミックレンジ* いいえ；1晩のコーティング過程が必要 はい はい 約10 pg/mL 約10 pg/mL 約10 pg/mL 約5∼250 pg/mL 約5∼250 pg/mL** 約5∼2,000 pg/mL インキュベーション時間* 4時間 2.5∼4時間 3.5時間 マルチプレックス化機能 なし なし あり 1ウェルあたりのターゲット数 リードアウト 1 HRP-TMB（比色分析） 1 HRP-TMB（比色分析） 必要な装置 マイクロプレートリーダー マイクロプレートリーダー 1∼50 R-PE（蛍光） Luminex®装置（Luminex® 100™/200™、 MAGPIX®またはFLEXMAP 3D® System） 装置リード時間 2分間 2分間 20∼60分間 * すべてのアッセイには、固有の特性があります。Novex ®抗体ペア、ELISA またはマルチプレックスアッセイキットに添付されているそれぞれのプロトコールをご参照ください。 ** 本表に示す値は、標準的な比色分析 ELISA キットに関するものです。 キット内容物 ELISAキット 抗体ペア • • • • • 捕捉抗体 検出抗体 スタンダードタンパク質 ストレプトアビジン-HRP 別売りバッファーキット • • • • • • • • • 抗体コート済 96ウェルプレート 検出抗体 スタンダードタンパク質 HRPコンジュゲート 希釈バッファー 洗浄バッファー 発色体 停止溶液 プレートカバー シングルプレックスビーズキット • • • • 抗体コート済捕捉ビーズ 検出抗体 スタンダードタンパク質 別売りバッファーキット マルチプレックスパネル • • • • • • • 抗体コート済捕捉ビーズ混合物 検出用抗体混合物 スタンダードタンパク質 濃縮 SAV-R-PE 希釈バッファー 洗浄バッファー プレート 当社ウェブサイト www.lifetechnologies.com/immunoassayから、以下の情報が入手可能です。 • ご使用になるターゲットタンパク質に基づいて、アッセイを検索することが可能なImmunoassay Selection Guide • 当社の抗体ペアキット、ELISAキットならびにNovex®マルチプレックスアッセイキットおよび装置のすべてに関する情報 • 当社の免疫アッセイ検出システムに関する情報 • アッセイの特性および感度を示すデータ 2 Life Technologies | Immunoassays 抗体ペアキット Novex® 抗体ペアキットには、マッチング、滴定、および 完全な至適化がすでに行われている捕捉（コーティング） 抗体および検出抗体が含まれています。これらのキットを 使用することにより、お客様独自の ELISA、またはマッチ ング抗体ペアを用いた他のすべてのアッセイプラットフォー ムを構築することが可能となります。利便性を考慮し、当 社では抗体ペアキットとの使用に至適化された、easy-touse の簡便なバッファーおよび溶液として、Buffer Set for Antibody Pairs という製品もご提供しています。 • 最大限のフレキシビリティーを実現する、簡便なフォー マット • コスト削減 • 至適化された試薬およびプロトコールの簡便性 ターゲット サイズ 製品番号 5 plates CHO0115 ヒト 各抗体ペアキットは、10 枚の ELISA プレート（細胞内ター ゲット用は 5 枚）での使用に十分な量の試薬を供給し、以 下のものが含まれています。 • 捕捉抗体 Akt [pS473] 5 plates CHO0095 • 検出抗体 • 組換えスタンダードタンパク質 • HRP コンジュゲート IFN-γ 10 plates CHC1233 IL-1β 10 plates CHC1213 IL-1ra 10 plates CHC1183 IL-2 10 plates CHC1243 IL-4 10 plates CHC1283 当 社 の Assay Buffer Set（ 製 品 番 号 CNB0011） は、10 枚の ELISA プレートでの使用に十分な量の試薬を供給し、 以下のものが含まれています。 • コーティングバッファー A • • • • • コーティングバッファー B アッセイバッファー（5 倍） 洗浄バッファー（25 倍） 安定化発色剤（基質） 停止溶液 さらに詳しい情報に関しては C-Met (soluble) 5 plates CHO0315 C-Met (total) 5 plates CHO0285 ERK1/2 [pTpY185/187] IL-6 10 plates CHC1263 IL-8 10 plates CHC1303 IL-10 10 plates CHC1323 IL-12 (p40/p70) 10 plates CHC1563 IL-23 heterodimer 10 plates CHC2493 IP-10 10 plates CHC2363 MCP-1 10 plates CHC1013 MIP-1β 10 plates CHC2293 MMP-3 10 plates CHC1543 SAA 10 plates CHA2513 TGF-β1 10 plates CHC1683 TNF-α 10 plates CHC1753 VEGF 10 plates CHG0113 www.lifetechnologies.com/buildyourownimmunoassay をご参照ください。 Life Technologies | Antibody pair kits 3 ターゲット サイズ 製品番号 マウス IFN-γ Ig isotyping (6 targets) 10 plates 6 plates CMC4033 992000 The Antibody Pair Buffer Set includes the following components (sufficient reagents for 10 plates): Assay Buffer (5x) 200 mL x 1 bottle Coating Buffer A 100 mL x 1 bottle Coating Buffer B 100 mL x 1 bottle IL-1β 10 plates CMC0813 IL-4 10 plates CMC0043 IL-5 10 plates CMC0053 IL-6 10 plates CMC0063 Stabilized Chromogen 25 mL x 4 bottles IL-10 10 plates CMC0103 Stop Solution 100 mL x 1 bottle IL-12 10 plates CMC0123 抗体ペアバッファーセット内容物 IL-13 10 plates CMC2223 Assay Buffer (5x) 200 mL x 1 bottle DS98200 IL-23 10 plates CMC2493 Coating Buffer A 100 mL x 1 bottle CB07100 KC 10 plates CMC1063 Coating Buffer B 100 mL x 1 bottle CB01100 TGF-β1 10 plates CHC1683 Wash Buffer (25x) 100 mL x 1 bottle WB01 TNF-α 10 plates CMC3013 Wash Buffer (25x), Bulk Pack 1.0 L bottle WB02 25 mL x 1 bottle SB01 IL-2 10 plates CRC0023 Stabilized Chromogen, Bulk Pack IL-6 10 plates CRC0063 Stop Solution IL-10 10 plates CRC0103 Stop Solution, Bulk Pack IL-13 10 plates CRC0133 TGF-β1 10 plates CHC1683 TNF-α 10 plates CRC3013 IFN-γ 10 plates CSC4033 IL-2 10 plates CSC1243 IL-4 10 plates CSC1283 IL-10 10 plates CSC0103 TNF-α 10 plates CSC1753 TGF-β1 10 plates CHC1683 10 plates CAC1233 ラット トリ IFN-γ Life Technologies | Antibody pair kits Wash Buffer (25x) Stabilized Chromogen ブタ 4 抗体ペアバッファーセット 100 mL x 3 bottles CNB0011 1.0 L bottle SB02 25 mL bottle SS03 1.0 L bottle SS04 ELISAキット Novex® ELISA キットは、サイトカイン、ケモカイン、ベータ アミロイドおよびシグナルターゲットの特異的な定量測定を 可能とします（表 1） 。当社の ELISA キットには、コーティン グされた 96 ウェルプレートおよび必要なすべての試薬が含 まれていますので、 入手後すぐにご使用いただけます。さらに、 キットに特異的なパフォーマンス情報を含む、詳細で分かり やすいプロトコールが含まれています。サンプルを添加して アッセイをランするだけで、定量結果は約半日以内に入手す ることが可能です（図 1） 。 表1．当社が提供する3種類のNovex® ELISAキットフォーマットの特性 ELISAのタイプ スタンダード比色分析ELISA 超高感度比色分析ELISA Chemi ELISA 分析感度* 10 pg/mL未満 1 pg/mL未満 1 pg/mL未満 ダイナミックレンジ* 5∼250 pg/mL 0.5∼20 pg/mL 0.5∼2,500 pg/mL インキュベーション時間* 約4時間 4∼5時間 約3.5時間 リードアウト HRP-TMB（比色分析） HRP-TMB（比色分析） AP-CSPD（化学発光法） 必要な装置 マイクロプレートリーダー マイクロプレートリーダー 化学発光法が可能なマイクロプレート リーダー * 各 Novex® ELISA キットに添付されているプロトコールをご参照ください。 スタンダードと細胞抽出物をインキュベートし、 吸引して4回洗浄します 検出抗体とインキュベートし、 吸引して4回洗浄します HRP抗ウサギ抗体とインキュベートし、 吸引して4回洗浄します 安定化発色剤とインキュベートします 停止溶液を添加し、450 nmでリードします タンパク質 HRP抗ウサギ抗体 抗体 図1．迅速で簡単な Novex® ELISA キットによる代表的な 4 時間のプロトコール。捕捉 抗体は 96ウェルプレートの底部にあらかじめコーティングされています。サンプルまた はスタンダードをウェルに添加し、インキュベートすることによりターゲットのタンパ ク質を結合させます。ウェルを洗浄して非結合性物質を除去した後、検出抗体を添加 して標的タンパク質をはさむサンドイッチ構造を形成します。ここに抗ウサギ抗体（本 図に示したもの）に結合したHRP、または検出抗体がビオチンに結合している場合に はストレプトアビジンに結合した HRP を加えます。続いて HRP に対する発色基質を 添加することにより酵素反応が起こり、溶液が青色に変化します。最後に反応を停止 させると、サンプル中のターゲットタンパク質の量に比例して溶液が黄色に変化しま す。結果はマイクロプレート中において450 nmでリードされます。 Life Technologies | ELISA kits 5 当社の ELISA キットは、スタンダードキャリブレーション、正確さ、感度、特異性、回収率、ロット間の一貫性、直線性 および平行性を含む、業界基準の特性に適合するように開発されています（表 2、表 3、図 2 ∼ 4） 。当社では、生理学 的に適切な感度をターゲットとして各タンパク質の研究を行い、可能な限り十分に確立されたモデルにおいて試験を行っ ています。当社のキットは、血清、血漿、細胞培養上清および細胞溶解物などのサンプルタイプにおいて、シグナリン グまたはリン酸化タンパク質用に検証されています。当社の ELISA キットは ISO 13485 認定施設において厳格な品質 管理の元に製造されており、優れた品質と再現性が保証されています。 当社製品は、 • 高感度、正確で一貫したパフォーマンス • 血清、血漿、組織培養上清および溶解物におけるバリデーション • ready-to-use で簡便なアッセイのわずか半日での実行 を可能とします。 当社のスタンダード比色測定分析ELISAキット、超高感度比色分析ELISAキットおよび化学発光ELISAキット の詳細に関しては www.lifetechnologies.com/elisakitsをご参照ください。 表2．Novex® ELISAキットの厳格なアッセイバリデーションにより一貫した信頼性のある結果が保証されます。 特性 内容 利点 スタンダードキャリブレーション 可能な場合はNIBSCに対しキャリブレート 正確な定量、 および複数のプラットフォームにわたる一貫し た参照標準を実現 正確さ アッセイ内のCVは10%未満 アッセイ間のCVは10%未満、 毎回一貫した結果を入手可能 感度 （図2） 適切な量のタンパク質 量の少ないタンパク質の検出が可能 特異性 類似の分析物を用いて交叉反応性試験を実行 測定対象タンパク質の正確な測定を保証 回収率 バッファーはマトリックス効果を最低限に抑えるように至滴化 血清および血漿における正確な定量を保証 ロット間の一貫性 （図3） セット内のレンジを測定するために自社コントロールによる試 験を実施 新しいロットで一貫した結果を保証 希釈の直線性 アッセイの定量範囲における直線性のある結果 サンプルの段階希釈物を正確に定量 平行性 （図4） 組換えタンパク質スタンダードが天然タンパク質を模倣 確信のあるサンプル測定が可能 表3．回収試験。ヒト血清、EDTA血漿、クエン酸血漿、ヘパリン血漿および 10%ウシ胎児血清を含む組織培養培地に添加した、組換えヒトIL-23ヘテロ 二量体の回収率をNovex® Human IL-23 Heterodimer ELISA Kit（製 品番号KHC0231） を使用して測定しました。 サンプルタイプ 平均回収率 血清 99% EDTA血漿 88% クエン酸血漿 83% ヘパリン血漿 86% RPMI + 10%ウシ胎児血清 116%* DMEM + 10%ウシ胎児血清 100% * 時折見られる100% を超える推定回収率は、実験値の許容範囲内にあります。 6 Life Technologies | ELISA kits 3.5 Life Technologies 3.0 他社 OD 450 nm 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 0.01 0.1 1 10 100 MMP9 (ng/mL) 図2．より高い感度。標準曲線から、Novex® ELISA Kit（製品番号 KHC3061）で は、他社のキットと比較して、さらに低レベルのMMP9タンパク質の測定が可能で あることが示されています。 100 IFN-γ (IU/mL) C1 C2 C3 C4 10 1 A B C D E F G H I J 図 3．ロット間の一貫性。各製造ロットに関して、4 種類のレベルのコントロール検 体（C1∼ C4）を使 用して解 析した結果、ロット間の変動が低い（ 20% 未満）こと が確認されました。 3.5 ラットIL-6に関する、 組換え体と天然物の間の平行性 OD 450 nm 製品番号 96 tests 96 tests 96 tests KHO1071 KHP0041 KAP1461 Akt [pT308] Akt1 (total) Akt1 [pS473] Angiopoietin-2 APO/FAS APP APRIL Aggregated Aβ Aβ40 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests KHO0201 KHO0531 KHO0541 KHC1641 KHS9501 KHB0051 KHC3051 KHB3491 KHB3481 KHB3482 KHB3441 KHB3442 KHB3544 KHO1211 KHO1091 KAS0251 KHS4001 KHO2031 KHO0251 KHO0281 KHO2041 KHA0031 KHO0231 KHO0241 KHO1051 KHG0061 KHG0062 KHR9061 KHR9071 KHR9081 KHS2011 KAC2231 KAQ0621 KHS9521 KHG0021 KHG0022 KHC2031 KHC2032 KHC2011 KAQ1081 KHO0701 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests KAC2211 KHO0661 KHO0671 KHO0331 KHO0341 KHS5411 KHC4011 KHC4032 KAC1231 Aβ42 Aβ42 (ultrasensitive) β-catenin (total) Caspase-3 CD23 CD40L (soluble) c-Met (soluble) c-Met (total) c-Met [pYpYpY1230/34/35] c-Myc (total) C-reactive protein (CRP) CREB CREB [pS133] Cytochrome c EGF EGFR EGFR [pY1173] EGFR [pY1068] ELAM-1 (soluble) Eotaxin/CCL11 Estradiol Fas ligand (soluble) FGF basic G-CSF 2.5 GM-CSF Growth hormone Her2 (total) 2.0 1.5 スタンダード 1.0 クエン酸血清 血清 ヘパリン血清 0.5 EDTA血清 TC 0 サイズ K ELISA製造ロット 3.0 ターゲット ヒト ACC-1 [pS79] Adiponectin Aggrecan 0 1,000 濃度 2,000 3,000 (pg/mL) 図 4 ．平行性試験により、組換えスタンダードが天然サンプルと同等であることが 確認されています。Novex® Rat IL-6 ELISA Kit（製品番号 KRC0061）を使用し て、組換えサンプルスタンダードから得られたデータ（青色線）は、血清、クエン 酸血漿、ヘパリン血漿、EDTA 血漿および組織培養（TC）から得られたデータと極 めて良好に相関しており、正確な定量が確認されています。 HGF Histone H3 (total) Histone H3 [pS10] HSP27 (total) HSP27 (pS82) ICAM-1 (soluble) IFN-α IFN-α (multi subtype) IFN-γ* Life Technologies | ELISA kits 7 ターゲット IFN-γ IgG1, 2, 3, 4* IL-1ra IL-1α IL-1β* IL-1β IL-1β (ultrasensitive) IL-2* IL-2 IL-2R IL-3 IL-4* IL-4 IL-4 (ultrasensitive) IL-5 IL-6* IL-6 IL-6R IL-8* IL-8 IL-8 (ultrasensitive) IL-10* IL-10 IL-10 (ultrasensitive) IL-12 (p40/p70) IL-12 (p70) IL-13 IL-13 (ultrasensitive) IL-15 IL-16 IL-17 IL-23 heterodimer Insulin IP-10 IR (total) IR [pY1158] IR [pYpY1162/1163] サイズ 製品番号 96 tests 5 plates 192 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests KHC4021 KHC4021C KHC4022 991000 KAC1181 KAC1191 KAC1211 KHC0011 KHC0011C KHC0012 KHC0014 KAC1241 KHC0021 KHC0021C KHC0022 KHR0021 KHC0031 KAC1281 KHC0041 KHC0044 KHC0043 KHC0051 KAC1261 KHC0061 KHC0061C KHC0062 KHR0061 KAC1301 KHC0081 KHC0081C KHC0082 KHC0084 KHC0083 KAC1321 KHC0101 KHC0101C KHC0102 KHC0104 KHC0104C KHC0103 KAC1561 KHC0121 KHC0122 KAC1568 KHC0131 KHC0132 KHC0134 KHC0133 KHC0151 KHC0152 KHC0161 KAC1591 KHC0231 KAQ1251 KAC2361 KHR9111 KHR9121 KHR9131 *スタンダードはあらかじめ分注されています。ビオチンは検出抗体に直接結合しています。 8 Life Technologies | ELISA kits ターゲット IR [pY1334] IκBα (total) IκBα [pS32] JNK 1/2 (total) JNK 1/2 [pTpY183/185] Leptin Leukotriene B4 Leukotriene E4 LIF-HILDA MCP-1/CCL2 MIP-1α/CCL3 MIP-1β/CCL4 MMP-2 MMP-3 MMP-9 Osteocalcin p21 (total) p27Kip1 p38 MAPK (total) p38 MAPK [pTpY180/182] p70-S6K [pT389] PAI-1 PARP (cleaved) PRAS40 (total) PRAS40 [pT246] Prostaglandin E2 P-selectin (soluble) RANTES/CCL5* RANTES/CCL5 RBP4 Resistin Retinoblastoma (Rb) (total) Retinoblastoma (Rb) [pT821] SAA (serum amyloid A) SMAD2 (total) SMAD2 [pS465/467] STAT5a (total) STAT5a [pY694] STAT5b [pY699] Tau (total) Tau [pS396] Tau [pS199] Tau [pT231] Tau [pT181] TGF-β1 (activated/treated) TIMP-1 TNF-RI TNF-RII TNF-α* サイズ 製品番号 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests KHR9161 KHO0211 KHO0221 KHO0121 KHO0131 KAC2281 KHL1741 KHL1761 KAC1351 KHC1011 KHC1012 KAC2201 KAC2291 KHC3081 KHC3082 KAC1541 KHC3061 KAQ1381 KHO5421 KHO5321 KHO0061 KHO0071 KHO0581 KHC3071 KHO0741 KHO0411 KHO0421 KHL1701 KHS2021 KAC1511 KHC1031 KHC1032 KHP0081 KHP0051 KHO0011 KHO0021 KHA0011 KHA0011C KHA0012 KHO2021 KHO2011 KHO0751 KHO0761 KHO5721 KHB0041 KHB0042 KHB7031 KHB7041 KHB8051 KHO0631 KAC1688 KHC1491 KAC1761 KAC1771 KAC1751 ターゲット TNF-α TNF-α (ultrasensitive) TNF-α VCAM-1 (soluble) VEGF α-Synuclein ヒト、マウス JAK2 (total) JAK2 [pYpY1007/1008] NFκB P65 (total) ヒト、マウス、ラット 4EBP-1 (total) 4EBP-1 [pT46] Akt Akt [pS473] AMPKα [pT172] ERK1/2 ERK1/2 [pTpY185/187] FAK (total) FAK [pY397] GSK-3β (total) GSK-3β [pS9] IGF-1R [pYpY1135/1136] IRS-1 (total) IRS-1 [pS312] p70-S6K (total) STAT3 [pY705] サル IFN-γ IL-2 IL-4 IL-6 IL-8 IL-10 IL-12 IL-12 (p70) TNF-α マウス Adiponectin (ACRP30) Aβ42 IFN-α IFN-β IFN-γ Ig サイズ 製品番号 96 tests 5 plates 192 tests 192 tests 96 tests 5 plates 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests KHC3011 KHC3011C KHC3012 KHC3013 KHC3014 KHC3014C KHT0601 KHG0111 KHG0112 KHB0061 96 tests 96 tests 96 tests KHO5521 KHO5621 KHO0371 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests KHO0681 KHO0691 KHO0101 KHO0111 KHO0651 KHO0081 KHO0091 KHO0431 KHO0441 KHO0451 KHO0461 KHO0501 KHO0511 KHO0521 KHO0571 KHO0481 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests KPC4021 KPC4022 KPC0021 KPC0022 KPC0041 KPC0061 KPC0081 KPC0101 KPC0121 KPC9121 KPC3011 KPC3012 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 6 plates KMP0041 KMB3441 KMC4011 KMC4041 KMC4021 KMC4021C KMC4022 992000 ターゲット IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-12 (p70) IL-13 IL-17 IL-23 KC Leptin MCP-1/CCL2 PRAS40 (total) PRAS40 [pT246] RANTES/CCL5 SAA (serum amyloid A) Tau Tau [pS199] TNF-α VEGF マウス、ラット Aβ40 [1-40] ラット Adiponectin (ACRP30) Growth hormone IFN-γ IL-1β IL-2 *スタンダードはあらかじめ分注されています。ビオチンは検出抗体に直接結合しています。 IL-4 IL-6 IL-10 IL-12 サイズ 製品番号 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 192 tests KMC0011 KMC0011C KMC0012 KMC0021 KMC0021C KMC0022 KMC0041 KMC0042 KMC0051 KMC0061 KMC0061C KMC0062 KMC0101 KMC0102 KMC0121 KMC0121C KMC0122 KMC9121 KMC2221 KMC3021 KMC0231 KMC1061 KMC2281 KMC1011 KMC1012 KMO0411 KMO0421 KMC1031 KMA0021 KMB7011 KMB7041 KMC3011 KMC3011C KMC3012 KMG0111 KMG0112 96 tests KMB3481 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 5 plates 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 192 tests 480 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests KRP0041 KRC5311 KRC4021 KRC4022 KRC0011 KRC0011C KRC0012 KRC0021 KRC0022 KRC0041 KRC0061 KRC0062 KRC0061C KRC0101 KRC0102 KRC0121 KRC0122 Life Technologies | ELISA kits 9 ターゲット IL-12 (p70) IL-13 サイズ 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 96 tests 5 plates 192 tests IL-18 Leptin MCP-1/CCL2 MIP-2 RANTES/CCL5 TNF-α 製品番号 KRC2371 KRC0131 KRC0132 KRC2341 KRC2281 KRC1011 KRC1012 KRC1021 KRC1022 KRC1031 KRC3011 KRC3011C KRC3012 ターゲット ブタ IFN-γ IL-4 IL-8 IL-10 TNF-α ウシ IFN-γ 複数種：ブタ、 ウシ、イヌ、ネコ、 ウマ SAA (serum amyloid A) サイズ 製品番号 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests 96 tests 192 tests KSC4021 KSC4022 KSC0041 KSC0042 KSC0081 KSC0082 KSC0101 KSC0102 KSC3011 KSC3012 96 tests KBC1231 96 tests KAA0021 化学発光ELISAキット 比色分析および蛍光検出システムと比較して、化学発光検出には極めて大きな利点が存在します。ELISA に関しては、 以下のような利点が含まれます。 • 高感度―血清および血漿中における発現量の少ないタンパク質の測定が可能となります（図 5）。 • 広いダイナミックレンジ―広いアッセイレンジにより、推測によるサンプル希釈を最小限に抑えることが可能です。 Chemi ELISAキットの詳細に関しては、www.lifetechnologies.com/chemielisasをご参照ください。 10,000 ターゲット 化学発光ELISA シグナル対ノイズ 超高感度ELISA 製品番号 ヒト スタンダードELISA 1,000 サイズ 100 IL-1β 96 tests KHC0019 IL-6 96 tests KHC0069 TARC 96 tests KHC3089 96 tests KRC3019 ラット TNF-α 10 1 0.1 1 10 100 1,000 10,000 濃度 (pg/mL) 図5．Human IL-1β Chemi ELISA Kit（製品番号 KHC0019）、Human IL-1β Ultrasensitive ELISA Kit（製品番号KHC0014）およびスタンダードHuman IL-1β ELISA Kit（製品番号KHC0011）の標準曲線の比較。化学発光キットは他 のフォーマットと比較してより広いダイナミックレンジを有しています。さらに、キ ットの感度は1pg/mL 未満であり、一般的な ELISA キットと比較して約10 倍優れ ています。 10 Life Technologies | Chemiluminescent ELISA kits 神経生物学ELISAキット Life Technologies™ では、アルツハイマー病、パーキンソ ン病およびその他の神経変性状態の研究を支援するため に、Aβ（β‐アミロイド） （表 4） 、タウ（図 6、7）および α‐シヌクレインタンパク質の正確で感度の高い定量を可 能とする Novex® 神経生物学 ELISA キットを提 供してい ます。これらのキットにより、 • ランが容易なサンドイッチ ELISA フォーマット • あらかじめコーティングされた 8 ウェルのストリップベー スのフォーマット • 一貫性があり、正確で高感度な測定が提供されます。 神経生物学用の当社のELISA キットの詳細に関して は、www.lifetechnologies.com/neuroelisasをご 参照ください。 2.4 表4． 直線性。 β‐アミロイド1-42を含むヒト脳脊髄液をアッセイ レンジの範囲内でStandard Diluent Bufferにより段階希釈 しました。APPで形質転換した細胞由来の天然β‐アミロイド 1-42を10%ウシ胎児血清含有RPMIに添加し、アッセイレン ジの範囲内でStandard Diluent Bufferにより段階希釈しま した。サンプルと期待される濃度との間の直線回帰分析から は、0.99の相関係数が得られました。 （時折見られる100%を超 える期待値は、実験値の許容範囲内にあります。） 脳脊髄液 希釈 測定値 （pg/mL） 期待値 （pg/mL） 期待値 （%） 1/4 341.0 341.0 – 1/8 185.4 170.5 108 1/16 94.6 85.3 107 1/32 41.2 42.6 97 希釈 測定値 （pg/mL） 期待値 （pg/mL） 期待値 （%） 1/2 152.1 152.1 – 1/4 76.4 76.0 101 1/8 38.4 38.0 101 1/16 15.2 19.0 80 細胞培養上清 2.0 OD 1.6 1.2 ターゲット 0.8 0 600 1,200 1,800 濃度 (pg/mL) 図 6．Human Tau (Total) ELISA Kit（製品番号 KHB0041）の代表的な 7点標準 曲線。ダイナミックレンジは 31∼2,000 pg/mL、分析感度は12 pg/mL 未満です。 2.0 OD 450 nm 1.5 1.0 Aβ40 96 tests 192 tests KHB3481 KHB3482 Aβ42 96 tests 192 tests KHB3441 KHB3442 Aβ42 (ultrasensitive) 96 tests KHB3544 Aggregated Aβ 96 tests KHB3491 APP 96 tests KHB0051 α-Synuclein 96 tests KHB0061 Tau (total) 96 tests 192 tests KHB0041 KHB0042 Tau [pS199] 96 tests KHB7041 Tau [pS396] 96 tests KHB7031 Tau [pT181] 96 tests KHO0631 Tau [pT231] NEW 96 tests KHB8051 Aβ40 96 tests KMB3481 Aβ42 96 tests KMB3441 Tau (total) 96 tests KMB7011 Tau [pS199] 96 tests KMB7041 マウス 0.5 組換えHuタウ 天然Huタウ 0 製品番号 ヒト 0.4 0 サイズ 0 200 400 600 800 1,000 1,200 pg/mL Hu タウ 図7．天然ヒト（Hu）タウをStandard Diluent Bufferで段階希釈しました。各希 釈物の OD 値を標準曲線に対してプロットしました。天然タンパク質と組換えタン パク質間の平 行 性から、スタンダードがサンプル中の天 然 Hu タウ含量を正確に 反映していることが示されています。 Life Technologies | Neurobiology ELISA kits 11 リン酸ELISA™ キット ターゲット 種反応性 サイズ 製品番号 シグナリングに関与する、細胞内タンパク質の研究用に、 4E-BP1 (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0681 当社では総タンパク質およびリン酸化タンパク質、修飾タ 4E-BP1 [pT46] Human, mouse, rat 96 tests KHO0691 ンパク質、または切断部位特異的タンパク質の測定のため の Novex® リン酸 ELISA ™ キットを提供しています。これ ACC1 (total) Human 96 tests KHO1071 ACC1 [pS79] Human 96 tests KHO1061 らのキットには以下のような利点があります。 Akt (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0101 • 特異性 ― 解析対象に対して 2 種類の抗体を使用する Akt [pS473] Human, mouse, rat 96 tests KHO0111 Akt1 [pS473] (ultrasensitive) Human 96 tests KHO0541 Akt [pT308] Human 96 tests KHO0201 AMPKα [pT172] Human, mouse, rat 96 tests KHO0651 β-Catenin (total) Human 96 tests KHO1211 Caspase-3 (active) Human 96 tests KHO1091 c-Myc Human 96 tests KHO2041 CREB (total) Human, mouse 96 tests KHO0231 CREB [pS133] Human, mouse 96 tests KHO0241 Cytochrome c Human 96 tests KHO1051 リン酸 ELISA キットの詳細に関しては、 EGFR (full-length) Human 96 tests KHR9061 www.lifetechnologies.com/phosphoelisas EGFR [pY1068] Human 96 tests KHR9081 をご参照ください。 EGFR [pY1173] Human 96 tests KHR9071 ことによりウェスタンブロットよりも優れた特異性が実 現します。 • 感度―ウェスタンブロットよりも高感度です。 • 定量―ウェスタンブロットとは異なり、定量的なデー タが得られます（図 8） 。 • 中等度のスループット― 96 ウェルのフォーマットで、4 時間以内に結果を入手することが可能です。濃度測定解 析の必要はありません。 ™ 4.0 A OD 450 nm 3.0 2.0 1.0 0 0 0.63 1.25 2.5 5 10 20 40 タンパク質 (µg) B 図 8 ．ウェスタンブロット由来のデータを、リン酸ELISA™アッセイの定 量 結果を用 いて確認しました。 ［ A ］STAT 5a [pY694] Human ELISA Kitアッセイ（製品番号 KHO0761）を使用して取得した定量データ。［ B］NuPAGE® Novex®ゲル（製品番 号 NP0321）を使用したウェスタンブロット結果。アッセイは並行して行いました。 12 Life Technologies | phosphoELISA™ kits ERK1/2 (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0081 ERK1/2 [pTpY185/187] Human, mouse, rat 96 tests KHO0091 FAK (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0431 FAK [pY397] Human, mouse 96 tests KHO0441 GSK-3β (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0451 GSK-3β [pS9] Human, mouse, rat 96 tests KHO0461 HER2 (total) Human 96 tests KHO0701 Histone H3 (total) Human 96 tests KHO0661 Histone H3 [pS10] Human, mouse, rat 96 tests KHO0671 HSP27 (total) Human 96 tests KHO0331 HSP27 [pS82] Human 96 tests KHO0341 IGF-1R [pYpY1135/1136] Human, mouse, rat 96 tests KHO0501 IκBα (total) Human 96 tests KHO0211 IκBα [pS32] Human 96 tests KHO0221 IR (total) (β-subunit) Human, mouse, rat 96 tests KHR9111 IR [pY1158] Human, mouse, rat 96 tests KHR9121 IR [pY1334] Human, mouse, rat 96 tests KHR9161 IR [pYpY1162/1163] Human, mouse, rat 96 tests KHR9131 IRS-1 (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0511 ターゲット 製品番号 細胞および組織抽出バッファー* サイズ 製品番号 96 tests KHO0521 Cell Extraction Buffer 100 mL FNN0011 96 tests KHO5521 NP40 Lysis Buffer 100 mL FNN0021 Human, mouse 96 tests KHO5621 Tissue Extraction Reagent I 100 mL FNN0071 Human, mouse 96 tests KHO0121 Denaturing Cell Extraction Buffer 100 mL FNN0091 種反応性 IRS-1 [pS312] Human, mouse, rat JAK2 (total) Human, mouse JAK2 [pYpY1007/1008] JNK 1/2 (total) サイズ JNK 1/2 [pTpY183/185] Human, mouse 96 tests KHO0131 c-Met (total) Human 96 tests KHO0251 c-Met [pYpYpY1230/1234/1235] Human 96 tests KHO0281 NF-κBP65 [total] Human, mouse 96 tests KHO0371 p21 Waf1/Cip1 (total) Human 96 tests KHO5421 p27Kip1 Human, mouse, rat 96 tests KHO5321 p38 MAPK (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0061 p38 MAPK [pTpY180/182] Human, mouse, rat 96 tests KHO0071 p70-S6K (total) Human, mouse, rat 96 tests KHO0571 p70-S6K [pT389] Human 96 tests KHO0581 PARP (cleaved) [214/215] Human 96 tests KHO0741 PRAS40 (total) Human 96 tests KHO0411 PRAS40 (total), mouse Human, mouse, rat 96 tests KMO0411 PRAS40 [pT246] Human 96 tests KHO0421 PRAS40 [pT246], mouse Human, mouse, rat 96 tests KMO0421 Rb (total) Human 96 tests KHO0011 Rb [pT821] Human 96 tests KHO0021 SMAD2 (total) Human 96 tests KHO2021 SMAD2 [pSpS465/467] Human 96 tests KHO2011 STAT3 [pY705] Human 96 tests KHO0481 STAT5a [pY694] Human 96 tests KHO0761 STAT5a (total) Human 96 tests KHO0571 STAT5b [pY699] Human 96 tests KHO5721 Tau (total) Human Human 96 tests 192 tests KHB0041 KHB0042 Tau [pS199] Human 96 tests KHB7041 Tau [pS396] Human 96 tests KHB7031 Tau [pT181] Human 96 tests KHO0631 Tau [pT231] Human 96 tests KHB8051 Tau (total) Mouse 96 tests KMB7011 Tau [pS199] Mouse 96 tests KMB7041 * 細胞および組織抽出バッファーは、いずれのアッセイキットにも含まれていません。 Life Technologies | phosphoELISA™ kits 13 Luminex® 装置プラットフォーム用の マルチプレックスアッセイ Novex® マルチプレックスアッセイは、幅広い種類のサンプル中における、複 数のタンパク質の同時分析を可能とします。Novex® マルチプレックスアッセイ は、Luminex® xMAP®（マルチアナライトプロファイリング）テクノロジーに基 づき、マルチプレックス解析の効率と、ELISA の精度、感度、再現性および簡 便性を同時に実現させます。 当社のマルチプレックスキットに関しては、厳格な品質試験が行われ、入手可 能な場合にはマッチングする Novex® ELISA キットに対するキャリブレーショ ンが実行されているため（表 5） 、異なるタンパク質分析プラットフォームを使 1,000 用しても、同等な分析結果が確実に得られる事が保証されます。 迅 速かつ効率的 ― 貴 重なサンプルの 使 用量はわずか 50 μL で、最高 800 • 100 種類のタンパク質の同時分析が可能です。 利用しやすさ―xMAP® テクノロジーに基づいた Novex® イムノアッセイ キットのメニューは、選択の幅が広く、さらに拡大を続けています。 • • 経済的 ― 複数のウェスタンブロットおよび ELISA アッセイと比較して、 大幅な時間短縮とコスト削減が可能となります。 高い特異性― 他のターゲットとほとんど交差反応を示しません（表 6） 。 ELISA (pg/mL) • 600 400 200 y = 0.9431x + 66.932 R2 = 0.9868 0 0 Life Technologies™ で は、Luminex® xMAP® テクノロジー の 使 用を 簡 単で 信 頼 性のあるものとするために、Novex® マルチプレックスアッセイキット、 Luminex® マルチプレックス解析装置の全ラインアップ、xPONENT® データ 解析ソフトウェア、さらにオンサイトのデモンストレーションおよびテクニカル サポートを含めた広範囲にわたるアッセイおよび装置の技術サポートを提供し ています。 200 400 600 800 1,000 Novex® マルチプレックス (pg/mL) 図 9．ELISA および Novex ®マルチプレックスアッセ イの結果の強い相関性。組織培養上清液中のマウス GM-CSF に関して、ELISA および Novex ®マルチプ レックスアッセイによる試験を行いました。3 桁のサ ンプル希釈範囲における、結果の相関係数は 0.9868 でした。 表5．Novex®マルチプレックスキットの厳格なアッセイ検証は、一貫した信頼性のある結果を保証します。 特性 内容 ELISAとの比較評価（図9） ELISAデータと相関します（90%を超える相関） 回収率 血清および血漿に関する試験 感度* 生理学的に適切な量である、 10 pg/mL未満（検出可能なシグナルが、バックグラウンド上2 SDを超える場合） 正確さ （図10） 細胞間アッセイのCV：10%未満 細胞内アッセイのCV：10%未満 特異性 他の分析物および抗体に関して交差反応性試験を実行 希釈の直線性 天然サンプルとの平行性 （図11） アッセイの範囲において、 サンプル希釈と期待される濃度の間に高い相関係数 （R2 > 0.99） 同等性の確認のために、 組換えスタンダードを天然サンプルと比較 * すべてのアッセイには、それぞれ固有の特性があります。ご使用になられるNovex®マルチプレックスキットに添付されているプロトコールをご参照ください。 14 Life Technologies | Multiplex assays 1,400 蛍光強度中央値 1,200 1,000 800 600 400 200 0 IL-1 IL-10 IL-6 GM-CSF IL-5 IFN-γ TNF-α IL-2 IL-4 IL-8 図 10 ．アッセイ精 度 。橙 色 および 灰 色 のカラムはそれぞ れ、異 なる日に 測 定 さ れた 24 反復の 結 果を 表しています。すべての ケースにおいて CV は 10% 未 満 でし た。データは、Novex® Cytokine Human Magnetic 10-Plex Panel（製品番号 LHC0001M）を使用して作成しました。 A B 100% 100% 79% 回収率 50% 50% 0% 0% 17% Novex® アッセイ メーカー 2 メーカー 3 IL 性 基 1, -塩 M -17 IP GM -1 a -C M SF IP M 1b CP IL 1 -1 VE 5 G IF F N IL -g -1 R TN A Fa IL -2 IL IP 7 -1 0 IL -4 IL -8 25% キ シ ン 25% FG F 66% 75% IL G- 1b CS IL F -1 IL 0 -1 3 IL -6 エ IL オ -1 タ 2 回収率 75% Novex® アッセイ メーカー 2 メーカー 3 図11．天然サンプルとの平行性。Novex®マルチプレックスアッセイを評価するために、23 種類のヒトタンパク質マーカーをヒト血清サンプルに添加し、Novex®マルチプ レックスアッセイキットおよび他メーカー2 社による類似のキットを使用し、それぞれのメーカーが指示する使用方法に従ってサンプル処理を行いました。マルチプレック スサンプルは、MAGPIX®システム上で定量を行い、各マーカーに関する回収率［ A ］および各群全体の回収率の平均値［ B］を算出しました。 表6．Cytokine Human 10-Plex Panel（製品番号LHC0001）由来の特性データからは顕著な交差反応は示されていませ ん。数値は、一連の10-プレックスアッセイにおいて各組換えタンパク質を個別に解析して得られた、平均蛍光強度（MFI）単位 を表しています。 抗体ビーズキット 組換えタンパク質 IL-1β IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-8 IL-10 TNF-α IFN-γ GM-CSF 6,332 38 38 48 44 39 41 32 32 41 IL-2 41 11,324 41 54 72 39 51 55 41 40 IL-4 37 47 10,503 36 40 44 39 36 39 36 IL-5 13 17 15 8,265 11 12 11 10 10 12 IL-6 9 26 25 11 6,827 27 12 7 8 8 IL-8 37 40 40 34 42 10,002 41 60 70 46 IL-10 32 33 32 33 31 32 8,151 30 35 33 TNF-α 27 27 25 25 22 27 23 6,642 25 25 IFN-γ 18 15 12 16 12 19 12 10 3,540 13 GM-CSF 51 50 50 51 70 52 46 47 51 4,932 Life Technologies | Multiplex assays 15 Luminex®テクノロジーの仕組み Luminex® xMAP® テクノロジーは、異なる強度の赤色および近赤外蛍光色素で内部染色された、ポリスチレンビーズ または常磁性微小球体を使用しています。染色された各ビーズには特有の番号またはビーズ領域が与えられ、それぞれの ビーズを区別することが可能となっています。Novex® マルチプレックス免疫アッセイキットでは、その後各ビーズセット が 1 つの特定の分析対象に適した捕捉抗体でコーティングされます（図 12） 。各分析対象に特異的な複数のビーズを、96 ウェルのマイクロプレートアッセイフォーマットの単一のウェルに同時に添加し、Luminex® 解析用装置を使用して最高 100 種類までのターゲットを同時に検出および定量することが可能です。当社では、ポリスチレンまたは常磁性のビーズ をご提供しています。 抗原特異的な捕捉抗体が微小球体に 結合しています 試験サンプル由来の抗原が微小球体に結合します 標識された二次抗体の結合によりシグナルが 発生します 図12．ビーズベースのアッセイに使用されるプロトコール（Luminex社） マルチプレックスアッセイとELISAの比較 Novex® マルチプレックスアッセイは、ELISA とほぼ同様 の方法で実行されます（図 13） 。両者のステップは類似して ® いますが、Novex マルチプレックスアッセイでは、ウェ ルに接着した抗体を捕捉するのではなく、抗体特異的捕捉 ビーズを 96 ウェルプレートに添加する点が異なります。そ の後サンプルがマイクロプレートのウェルに添加されます。 Novex® アッセイの ワークフロー ウェルの予洗 ビーズの添加 洗浄 ® Novex マルチプレックスアッセイキットでは、既知濃度の タンパク質スタンダードが供給されていますので、解析す るタンパク質の標準曲線を作成することが可能です。 インキュベーション後、ビーズはフィルタープレート（ポリス チレンビーズの場合）またはマグネチックセパレーター（常 磁性ビーズの場合）を用いて洗浄されます。ビーズは二次 検出抗体の溶液中に再懸濁されます。インキュベーション と洗浄のステップがもう一度繰り返された後、ストレプト アビジン -R-PE が添加されます。ビーズは再び洗浄され、 ® Luminex 装置上での分析のための準備が完了します。 16 Life Technologies | Multiplex assays 検出抗体を添加して 1時間インキュベーション 洗浄 ストレプトアビジン-R-PEを添加して 30分間インキュベーション インキュベーションバッファー、 スタンダードおよびサンプルを 添加して2時間インキュベーション 洗浄 洗浄 再懸濁してLuminex® 検出システムを 使用しデータを取得 図13．Novex®マルチプレックスアッセイキットを使用したワークフロー Novex®マルチプレックスマグネチックアッセイ Luminex® xMAP®（マルチアナライトプロファイリング） テクノロジーに基づいた Novex® マルチプレックスアッセ イは、多彩なプラットフォームにより、単一または複数の 分析物に関するよりフレキシブルで範囲の広いアレイオプ ションを提供します。新しいマグネチックマルチプレックス アッセイは、入念な設計および試験を行っているため、当 社のポリスチレンベースの Novex® マルチプレックスアッ セイと同じ成分を使用して、感度、レンジおよび相関性を 最大限に高めることが可能です。 Novex®マグネチックマルチプレックスアッセイには以下 のような利点があります。 • 手持ち式の96ウェルマグネチックセパレーターによる、容易 な洗浄 （図14） • 自動化が可能な洗浄ステップ • 真空マニホールド洗浄、フィルタープレートの目詰まりおよび ビーズロスの排除 図14 ．マグネチック96ウェルセパレーター（製品番号A14179） マーカー ビーズタイプ ヒト用シングルプレックスビーズキット Adiponectin Polystyrene Polystyrene Aggregated Aβ Polystyrene Aggregated α-synuclein Aβ40 Polystyrene Polystyrene Aβ42 BDNF Polystyrene CD30 (soluble) Polystyrene C-reactive protein (CRP) Polystyrene DR5 Polystyrene EGF Polystyrene EGFR (total) Polystyrene EGFR [pY1068] Polystyrene Eotaxin/CCL11 Polystyrene FGF basic Polystyrene G-CSF Polystyrene GDNF Polystyrene GM-CSF Polystyrene GRO-α Polystyrene HGF Polystyrene IFN-α Polystyrene Polystyrene IFN-γ IGF-1R [pYpY1135/1136] Polystyrene IL-10 Polystyrene IL-12 (p40/p70) Polystyrene IL-12 (p70) Polystyrene IL-13 Polystyrene IL-15 Polystyrene IL-16 Polystyrene IL-17 Polystyrene IL-1ra Polystyrene Polystyrene IL-1α Polystyrene IL-1β Polystyrene IL-1β (ultrasensitive) IL-2 Polystyrene IL-2R Polystyrene IL-3 Polystyrene IL-4 Polystyrene IL-5 Polystyrene IL-6 Polystyrene Polystyrene IL-6R (soluble) Polystyrene IL-7 Polystyrene IL-8 Polystyrene Polystyrene LHR0051 LHG0061 LHR9061 LHR9081 LHC2231 LHG0021 LHC2031 LHC7041 LHC2011 LHC1061 LHG0071 LHC4011 LHC4031 LHO0501 LHC0101 LHC0121 LHC9121 LHC0131 LHC0151 LHC0161 LHC0171 LHC0711 LHC0811 LHC0011 LHC0013 LHC0021 LHR0021 LHC0031 LHC0041 LHC0051 LHC0061 LHC0063 LHR0061 LHC0071 LHC0081 LHC0083 Insulin IP-10 IRS-1 (total) Leptin MCP-1/CCL2 MCP-2/CCL8 MCP-3/CCL7 MIG/CXCL9 MIP-1α/CCL3 MIP-1β/CCL4 PDGF-BB RANTES/CCL5 Resistin LHP0021 LHC1081 LHO0511 LHP0011 LHC1011 LHC1111 LHC1571 LHC1091 LHC1021 LHC1051 LHG0041 LHC1031 LHP0051 Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene 製品番号 LHP0041 LHB3491 LHB0071 LHB3481 LHB3441 LHC7071 LHS6031 LHP0031 Life Technologies | Multiplex assays 17 マーカー ビーズタイプ 製品番号 SAA (serum amyloid A) Polystyrene LHP0061 Tau (total) Polystyrene LHB0041 Tau [pT181] Polystyrene LHB7051 Polystyrene LHG0121 TGF-β1 (activated/treated) TNF-RI Polystyrene LHC3021 TNF-RII Polystyrene LHC3031 Polystyrene LHC3011 TNF-α Polystyrene LHC3013 TNF-α (ultrasensitive) VEGF Polystyrene LHG0111 ヒト、マウス用シングルプレックスビーズキット JNK 1/2 (total) Polystyrene LHO0071 JNK 1/2 [pTpY183/185] Polystyrene LHO0081 p38 MAPK (total) Polystyrene LHO0031 p38 MAPK [pTpY180/182] Polystyrene LHO0041 ヒト、マウス、ラット用シングルプレックスビーズキット Akt (total) Polystyrene LHO0091 Akt [pS473] Polystyrene LHO0101 Polystyrene LHO0451 GSK-3β (total) GSK-3β [pS9] Polystyrene LHO0461 IGF-1R (total) Polystyrene LHO0491 IR (total) Polystyrene LHR9111 IR [pYpY1162/1163] Polystyrene LHR9131 p70S6K (total) Polystyrene LHO0181 p70S6K [pTpS421/424] Polystyrene LHO0191 PRAS40 (total) Polystyrene LHO0411 PRAS40 [pT246] Polystyrene LHO0421 サル用シングルプレックスビーズキット G-CSF Polystyrene LPC2031 IFN-γ Polystyrene LPC4031 IL-10 Polystyrene LPC0101 IL-12 Polystyrene LPC0121 IL-17 Polystyrene LPC0171 IL-2 Polystyrene LPC0021 IL-4 Polystyrene LPC0041 IL-6 Polystyrene LPC0061 IL-8 Polystyrene LPC0081 IP-10 Magnetic LPC1171M MCP-1/CCL2 Polystyrene LPC1011 Polystyrene LPC1021 MIP-1α/CCL3 Polystyrene LPC1051 MIP-1β/CCL4 Polystyrene LPC1031 RANTES/CCL5 Polystyrene LPC3011 TNF-α マウス用シングルプレックスビーズキット FGF basic Polystyrene LMG0021 G-CSF Polystyrene LMC2031 GM-CSF Polystyrene LMC2011 Polystyrene LMC4031 IFN-γ IL-10 Polystyrene LMC0101 IL-12 (p40/p70) Polystyrene LMC0121 IL-12 (p70) Polystyrene LMC9121 IL-13 Polystyrene LMC0131 IL-17 Polystyrene LMC0171 Polystyrene LMC0811 IL-1α Polystyrene LMC0011 IL-1β IL-2 Polystyrene LMC0021 IL-4 Polystyrene LMC0041 IL-5 Polystyrene LMC0051 IL-6 Polystyrene LMC0061 18 Life Technologies | Multiplex assays: singleplex kits マーカー ビーズタイプ IP-10 Polystyrene KC Polystyrene MCP-1/CCL2 Polystyrene MIG/CXCL9 Polystyrene Polystyrene MIP-1α/CCL3 MIP-1β/CCL4 Polystyrene RANTES/CCL5 Polystyrene Polystyrene TNF-α VEGF Polystyrene ラット用シングルプレックスビーズキット GM-CSF Polystyrene IFN-γ Polystyrene IL-10 Polystyrene IL-12 (p40/p70) Polystyrene Polystyrene IL-1α Polystyrene IL-1β IL-2 Polystyrene IL-4 Polystyrene IL-6 Polystyrene TNF-α Polystyrene 製品番号 LMC1081 LMC1061 LMC1011 LMC1091 LMC1021 LMC1051 LMC1031 LMC3011 LMG0111 内容 バッファーキット Human Extracellular Protein Buffer Reagent Kit Intracellular Protein Buffer Reagent Kit Human Ultrasensitive Cytokine Buffer Reagent Kit Mouse Extracellular Protein Buffer Reagent Kit Multispecies Growth Factor Buffer Reagent Kit Neuroscience Buffer Reagent Kit 種 製品番号 Human, monkey LHB0001 Human LHB0002 Human LHB0003 Mouse, rat LMB0001 Human, mouse, rat Human LMB0002 LRC2011 LRC4031 LRC0101 LRC0121 LRC0811 LRC0011 LRC0021 LRC0041 LRC0061 LRC3011 LNB0001 内容 マーカー（バッファーキットは各パネルに含まれます） ビーズ タイプ 製品番号 IL-2, IL-4, IL-5, IL-9, IL-10, IL-13, Il-17, IFN-γ Magnetic LHC0015M ヒト Hu Th1/Th2/Th17 Magnetic 8-plex Panel NEW Cytokine Human Magnetic 10-Plex Panel GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α Magnetic LHC0001M Inflammatory Cytokine Human Magnetic 5-Plex Panel GM-CSF, IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α Magnetic LHC0003M Cytokine Human Magnetic 25-Plex Panel Eotaxin, GM-CSF, IFN-α, IFN-γ, IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-2R, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12 (p40/p70), IL-13, IL-15, IL-17, IP-10, MCP-1, MIG, MIP-1α, MIP1β, RANTES, TNF-α Magnetic LHC0009M Cytokine Human Magnetic 30-Plex Panel EGF, eotaxin, FGF basic, G-CSF, GM-CSF, HGF, IFN-α, IFN-γ, IL-1β, IL-1ra, IL2, IL-2R, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12 (p40/p70), IL-13, IL-15, IL-17, IP-10, MCP-1, MIG, MIP-1α, MIP-1β, RANTES, TNF-α, VEGF Magnetic LHC6003M Cytokine Ultrasensitive Human Magnetic 10-Plex Panel GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α Magnetic LHC6004M Cytokine Human 10-Plex Panel Th1/Th2 Cytokine Human 5-Plex Panel GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10 GM-CSF, IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α Polystyrene LHC0001 Polystyrene LHC0002 Growth Factor Human 4-Plex Panel Chemokine Human 5-Plex Panel EGF, FGF basic, G-CSF, VEGF Eotaxin, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, RANTES Death Receptor Human 3-Plex Panel Cytokine II Human 5-Plex Panel Polystyrene Polystyrene Polystyrene Polystyrene TNF-RI, TNF-RII, DR5 IFN-α, IL-12 (p40/p70), IL-13, IL-15, IL-17 Eotaxin, GM-CSF, IFN-α, IFN-γ, IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-2R, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, Polystyrene LHC0009 IL-8, IL-10, IL-12 (p40/p70), IL-13, IL-15, IL-17, IP-10, MCP-1, MIG, MIP-1α, MIP1β, RANTES, TNF-α ENA-78, I-309/CCL1, MDC/CCL22, MIP-3α/CCL20, TARC/CCL17 Polystyrene LHC0012 α α β Eotaxin, GRO- , IP-10, MCP-1, MCP-2, MCP-3, MIG, MIP-1 , MIP-1 , RANTES Polystyrene LHC6001 Inflammatory Cytokine Human 5-Plex Panel Cytokine Human 25-Plex Panel Human Chemokine II 5-Plex Panel Chemokine Human 10-Plex Panel Polystyrene LHC0003 LHC0004 LHC0005 LHC0006 LHC0007 Matrix Metalloprotein Human 3-Plex Panel Cytokine Human 30-Plex Panel MMP-3, MMP-9, MMP-13 Polystyrene LHC6002 Cytokine Ultrasensitive Human 10-Plex Panel GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α Polystyrene LHC6004 Acute Phase 4-Plex Panel Apoptosis 3-Plex Panel Akt Pathway Phospho Magnetic 7-Plex Panel β2 microglobulin, haptoglobin, CRP, Gc globulin Cytochrome c, caspase-3 [175/176], PARP [214/215] Akt [pS473], GSK-3β [pS9], IRS-1 [pS312], IGF-1R [pYpY1135/1136], IR [pYpY1162/1163], p70S6K [pTpS421/424], PRAS40 [pT246] Polystyrene LHC6006 Polystyrene LHO0007 Magnetic LHO0001M Akt Pathway Total Magnetic 7-Plex Panel Akt, GSK-3β, IGF-1R, IR, IRS-1, p70S6K, PRAS40 Magnetic Akt Pathway Phospho 7-Plex Panel Akt [pS473], GSK-3β [pS9], IRS-1 [pS312], IGF-1R [pYpY1135/1136], IR [pYpY1162/1163], p70S6K [pTpS421/424], PRAS40 [pT246] Polystyrene LHO0001 Akt Pathway Total 7-Plex Panel Akt, GSK-3β, IGF-1R, IR, IRS-1, p70S6K, PRAS40 Polystyrene LHO0002 EGF, eotaxin, FGF basic, G-CSF, GM-CSF, HGF, IFN-γ, IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15, IL-17, IP-10, I-TAC, MCP-1, MDC, MIF, MIG, MIP-1α, MIP-1β, RANTES, TNF-α, VEGF IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-10, TNF-α IL-8, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, RANTES Magnetic EGF, eotaxin, FGF basic, G-CSF, GM-CSF, HGF, IFN-α, IFN-γ, IL-1β, IL-1RA, IL- Polystyrene LHC6003 2, IL-2R, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12 (p40/p70), IL-13, IL-15, IL-17, IP-10, MCP-1, MIG, MIP-1α, MIP-1β, RANTES, TNF-α, VEGF LHO0002M ヒト、マウス、ラット サル Monkey Cytokine 29-Plex Magnetic Panel NEW Th1/Th2 Cytokine Monkey 5-Plex Panel Chemokine Monkey 5-Plex Panel LPC0005M Polystyrene LPC0001 Polystyrene LPC0002 マウス Cytokine Mouse Magnetic 10-Plex Panel Inflammatory Cytokine Mouse Magnetic 4-Plex Panel GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12 (p40/p70), TNF-α GM-CSF, IL-1β, IL-6, TNF-α Magnetic LMC0001M Magnetic LMC0003M Cytokine Mouse Magnetic 20-Plex Panel FGF basic, GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IL-12 (p40/p70), IL-17, IP-10, KC, MCP-1, MIG, MIP-1α, TNF-α, VEGF Magnetic LMC0006M Cytokine Mouse 10-Plex Panel GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12 (p40/p70), TNF-α Polystyrene LMC0001 Life Technologies | Multiplex assays: multiplex kits 19 内容 マーカー（バッファーキットは各パネルに含まれます） ビーズ タイプ 製品番号 Th1/Th2 Cytokine Mouse 6-Plex Panel IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12 (p40/p70) Polystyrene LMC0002 Inflammatory Cytokine Mouse 4-Plex Panel GM-CSF, IL-1β, IL-6, TNF-α Polystyrene LMC0003 Chemokine Mouse 5-Plex Panel IP-10, KC, MCP-1, MIG, MIP-1α Polystyrene LMC0005 Cytokine Mouse 20-Plex Panel FGF basic, GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IL-12 (p40/p70), IL-17, IP-10, KC, MCP-1, MIG, MIP-1α, TNF-α, VEGF Polystyrene LMC0006 ラット Cytokine Rat Magnetic 10-Plex Panel NEW GM-CSF, IL-1α, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12 (p40/p70), TNF-α Magnetic Cytokine Rat 10-Plex Panel GM-CSF, IL-1α, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12 (p40/p70), TNF-α Polystyrene LRC0002 LRC0002M IL-1β, IL-4, IL-8, IL-10, IFN-γ, IFN-α, TNF-α Magnetic ブタ Swine Cytokine 7-Plex Magnetic Panel NEW facebook.com/LifeTechnologiesJapan @LifetechJPN 販売店 ライフテクノロジーズジャパン株式会社 本社：〒108-0023 東京都港区芝浦 4-2-8 大阪：〒564-0052 大阪府吹田市広芝町 10-28 コールセンター テクニカルサポート オーダーサポート カスタムプライマーについて TEL.03-6832-9300 FAX. 03-6832-9580 TEL.06-6339-8165 FAX. 06-6339-8138 0120-650591（携帯からでもご利用いただけます） 0120-477-392 FAX：0120-477-120 TEL：03-6832-6980 FAX：03-6832-9584 TEL：03-6832-6980 FAX：03-6832-9585 サービスラボ 営 業 部 TEL：03-5753-3006 FAX：03-5753-3007 TEL：03-6832-9300 FAX：03-6832-9580 研究用にのみ使用できます。診断目的およびその手続き上での使用は出来ません。記載の社名および製品名は、弊社または各社の商標または登録商標です。 標準販売条件はこちらをご覧ください。www.lifetechnologies.com/TC The trademarks mentioned herein are the property of Life Technologies Corporation or their respective owners. © 2013, Life Technologies Japan Ltd. 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