ABS-2746_Mailer_v4.qxd 05.9.26 3:33 PM ページ1 Product Bulletin TaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays 表3 製品規格 P/N Size Status Concentration Volume Delivered Reaction Size* Reactions 4362691 Small Inventoried 20X 187.5 µL 5 µL 25 µL 750 150 *反応ボリュームは、使用する反応ブロックにより異なります。384-ウェルブロックでは5 µl、96-ウェルブロックでは25 µlで反応を行います。 表4 他のTaqMan® Assay Type SNP Genotyping AssaysとTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assaysとの比較 Status Size Number of 5-µL Reactions* Performance Validated with 180 DNA Samples Number of Assays Drug Metabolism Inventoried Small 750 Yes >2,000 Validated Inventoried Small 750 Yes ~160,000 Coding Inventoried Small 750 No ~30,000 Made-to-order Small 750 No >2 million Pre-Designed Custom Made-to-order Small Medium Large Applied Biosystems 7900HT Fast Applied Biosystems 7500 リアルタイ Applied Biosystems 7300 リアルタイ リアルタイムPCRシステム − 究極の ムPCR システム − 拡張性必要とす ム PCR システム − 基礎分野の研究 パフォーマンスと柔軟性 るユーザーのための多機能モデル 者のための経済性に優れたスタンダー • ユーザーご自身で交換できるサンプ • 先進的な5色対応の光学検出系の採 ドモデル ルブロックには、384-ウェル、96-ウェ 用により、広範囲の色素に対応でき、 • 4色対応の検出系で、主要なすべて ル、TaqMan® Low Density Array、 また励起波長はフィルター毎に変更 のアプリケーションに対応します。 Fast 96-ウェルの4種があります(オプ されており、長波長(赤色)色素に ション) 。 対する感度を改善しています。 • 寿命の長い488 nmアルゴンイオン • Relative Quantitation Softwareの機 レーザーと、500 - 660nm波長域の全 能により、最大10枚のプレートの遺 波長での検出を組み合わせることで、 伝子発現データを、1度に解析する 優れた色素識別能を発揮します。 ことが可能です。 No がシンプルでわかりやすく、多機能 ソフトウェアを採用しています。 • 精密な光学系とCCDカメラにより、 精度、再現性、信頼性ともに高い結 極めて簡単な設定で自動化を実現し コードしています。 ロールシステムにより、優れた再現 性と一貫した高品質のデータを提供 エンタープライズ版ソフトウェアにより数 • SNPs、insertion/deletion、複数塩 基におよぶ多型(MNPs)など幅広 します。 い変異が検出可能です。 百から数千のプレートを同時に解析す ることが可能です。 (21 CFR part 11に • 常時在庫しているinventoried assay 準拠。オプション。 ) 特長と優位性 • ターゲットとなる多型が存在する 遺伝子は220種以上におよび、薬物 果を提供します。 • 特許取得済みのサンプル温度コント N/A *384-ウェルサンプルブロック使用 • 実験のセットアップ、データの処理 代謝酵素や薬物輸送タンパク質を • オートメーションアクセサリーにより、 ます。 1,000 3,000 12,000 基礎研究および臨床研究のためのTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays で、パフォーマンスは検証済みで す。 特長 優位性 Ordering Information 220種以上の薬物代謝遺伝子の調節因子やコーディング領域の 内部に存在する有用な多型2,000以上がターゲットです。※注1 特定薬物の代謝速度に関係する多型や、これまでタイピングが困 難とされていた多型の研究が可能。 商品名 各アッセイは任意に選択して、注文することができます。 研究の目的に応じて自由にアッセイを選択することができ、 アッセイを制限されることはありません。 TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays ® TaqMan®ケミストリにより、1つのプラットフォームで、 SNPs、in/dels、MNPsなど各種多型に対応可能です。 各アッセイは、dme.appliedbiosystems.comから注文できます。 アッセイコレクションは既存のリアルタイムPCRプラットフォーム を用いて検出できるよう開発が行われています。 新規のアッセイもこれまでと全く同じ実験条件で(90秒のエク ステンションタイムと50回のサイクル数が必要となりますが、 他の条件は全て同じです。)シームレスな統合が可能です。 For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 必要なアッセイを選択するための時間とエネルギーは必要ありま せん。 配列相同性による問題の克服および特異的な多型検出のために、 高度なバイオインフォマティクス技術が用いられています。 厳密なWet Validationにより、信頼性の高いターゲットSNPs のデータを提供します。 Applera シーケンシングプロジェクトで得られた新規の SNPターゲット変異が含まれています。 他の手法では入手が困難な情報が簡単にアクセスでき、研究に重 要なSNPsをいち早く調査することが可能です。 ※注1 2005年8月末現在、1,560Assays。順次追加する予定です 商品番号 small scale 4362691 本製品には、プロトコル、Assey Information File (AIF)、DME Assay Index、トラブルシューティングガイドの入ったCDが付属されています。 各種多型が検出可能です。 個々の多型と一般的なアレル名との関連づけ、またゲノム上の 物理的な位置を得るため、高度なバイオインフォマティクス技術が 用いられています。 サイズ • 4人種で合計180人のDNAサンプル についてデータを検証済みです。 • 公開されているallele nomenclatureサイトを参照しています。 イントロダクション NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE: The purchase price of TaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays, P/N 4362691 includes a limited, non-transferable license under U.S. Patents Nos. 5,538,848, 5,876,930, 6,030,787 and 6,258,569, and corresponding claims in patents outside the U.S., owned by the Applera Corporation (“Applera”), and U.S. Patent No. 5,804,375 (claims 1-12 only), owned by Roche Molecular Systems, Inc. and corresponding claims outside the U.S. owned by F. Hoffmann-La Roche Ltd. (collectively, “Roche”), to use only this portion of probe solely to perform the purchaser’s own internal research and development activities. This product may also be used to perform 5' nuclease assays under service licenses from Applera. No rights are granted under any other patent or patent claim, expressly, by implication, or by estoppel, including U.S. Patents Nos. 5,210,015 or 5,487,972, covering the 5' nuclease process, owned by Roche, or corresponding claims in patents outside the United States. Further information on purchasing licenses for these patented processes may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA. Notice to Purchaser: TaqMan® probes are covered by U.S. Patent 5,723,591, and foreign counterparts and patents pending owned by Applera Corporation, and are covered by U.S. Patents 5,801,155 and 6,084,102 and foreign counterparts licensed to Applied Biosystems. 2 2 0 種を超 す 薬 物 代 謝 酵 素 遺 伝 子 (DMEs)および薬物輸送タンパク質遺 伝子上に存在する、2000種以上 (※注1) のユニークな多型を検出するTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays が発売になりました。これらの遺伝子 多型は、患者体内の薬物代謝速度に 関係することがあり、薬効や副作用 研究用にのみ使用できます。診断目的およびその手続き上での使用は出来ません。 Applied Biosystems is a registered trademark and AB (Design), Applera and myScience are trademarks of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries. の発生に影響を与える可能性があり ます。これまで、こうした遺伝子多 TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc. 記載の社名および製品名は、弊社または各社の商標または登録商標です。 型を効果的に同定するための技術や © 2005 Applied Biosystems Japan Ltd,. All Rights reserved. 製品が少なかったため、遺伝子の複 Printed in JAPAN, GTA001-A0509OB 雑な性質についての研究には制限が お問い合せ先 本 社: アプライドバイオシステムズジャパン株式会社 〒104-0032 東京都中央区八丁堀4-5-4 セイは、全て表現型に現れる可能性 がある多型、すなわち調節領域や FAX. 03(5566)6501 コーディング領域、スプライシング 大 阪: に関連した部位の多型のみをター TEL. 06(6389)1201 FAX. 06(6389)1206 www.appliedbiosystems.co.jp ありました。本製品に含まれるアッ TEL. 03(5566)6100 〒564-0052 大阪府吹田市広芝町10-28 www.appliedbiosystems.co.jp 取扱店: TaqMan® Drug Metabolism Genotyping 薬物代謝に関わる遺伝子 Assaysの開発には、高度なバイオイ 薬物代謝酵素をコードする遺伝子は、 ンフォマティクス技術、厳密な 医薬品(もしくは化学物質)に対す ウェットバリデーションの手法が用 る反応性に影響を与えるため、医薬 いられています。アッセイはallele 品開発や臨床研究において重要な nomenclatureサイトを含む、幾つか ターゲットとなります。主要な遺伝 のパブリックSNPデータベースをも 子は以下の通りです。 とに設計されており、4人種から得ら れた180人のDNAサンプルからパ フォーマンスを確認してます。またこ れらのTaqMan® DME (drug metabolism enzyme) assaysは、アプライドバイオ システムズのTaqMan® SNP Genotyping Assaysやリアルタイム PCR システムと共 • CYP2D6: 57種あるチトクローム P450ファミリーの遺伝子の1つであ り、抗不整脈剤、抗うつ剤、抗精 神病薬、ßブロッカーや鎮痛剤など の20-25%がこの酵素により代謝さ れるとされています。 に使用することが可能です。 ゲットにしています。 ※注1 9月12日現在、1560アッセイ。順次追加予定です。 www.appliedbiosystems.co.jp 表1 DME Assay Index Assay ID Gene Symbol C____559715_20 UGT1A4 C___2307598_20 C__30634116_20 C__27861809_10 C__25625805_10 UGT1A1 Gene Symbol Alias Allele Nomenclature Polymorphism UDPGT|UGT1D|UGT1* 4|HUG-BR2 UGT1A1*6,c.211G>A A/G GNT1|UGT1|UDPGT|UGT1 A|UGT1*1|HUG-BR1 UGT1A1*27,c.686C>A CYP2C19 CYP2C9 MIM:191740 T154A A/G CYP2C19*3,c.636G>A Phenotype Q229P T/C CPCJ|CYP2C|CYP 2C|P450C2C|P450IIC19 NCBI SNP Reference MIM:606429 A/C TPMT Amino Acid Change *212W rs1800460 PharmGKB:PA124 |MIM:124020 R144C CPC9|CYP2C|CYP2C10|P450I IC9|P450 MP-4|P450 PB-1 CYP2C9*2A,c.430C>T|CYP2C9*2A,g. 3608C>T|CYP2C9*2B,c.430C>T|CYP 2C9*2B,g.3608C>T|CYP2C9*2C,c.43 0C>T|CYP2C9*2C,g.3608C>T C/T CYP3A4*7,c.167 g.6004G>A C/T D56G PharmGKB:PA130 |MIM:124010 A/G E308G|E308G MIM:136132 C__30634213_10 CYP3A4 HLP|CP34|CYP3A|NF25|CYP3 A3|P450C3|P450PCN1|CP33 C___2220257_30 FMO3 FMOII|MGC34400|dJ127D3.1 C__27529541_20 N A T 1 A C__25599886_40 NR1I2 ARq|PAR2|BXR|PAR|PRR|PXR| SAR|SXR|ONR1|PAR1 A C 1 G>A|CYP3A4*7, NAT1*17,g.190C>T C / C/T T hCV SNP Type Gene Name hCV559715 Intron UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A4 NM_007120 Mis-sense Mutation UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 NM_000463 Mis-sense Mutation thiopurine transferase NM_000367 Nonsense Mutation cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 19 hCV2307598 MIM:187680 rs4986893 MIM:601130|Phar mGKB:PA126 rs1799853 rs16947 R 6 4 W MIM:108345 P66S|P27S|P2 7S PharmGKB:PA378 |MIM:603065 NCBI Gene Reference hCV30634116 hCV27861809 S-methyl- Cytogenetic Band TGACGCCTCGTTGTACATCAGAGAC[A/G] GAGCATTTTACACCTTGAAGACGTA 228389777 35 2q,2q37,2q3 TTTCTGTGCGACGTGGTTTATTCCC[A/C] GTATGCAACCCTTGCCTCAGAATTC 228390252 TCACCTGGATTAATGGCAACTAATG[T/C] TCCTCTATCCCAAATCATGTCAAAT 19377237 ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTG[A/G] ATCCAGGTAAGGCCAAGTTTTTTGC 90280519 Context Sequence NM_000769 0 0.2 0.11 Homo sapiens 中にも含まれています。 35 2q,2q37,2q3 35 6p22,6p2,6p 35 10q24,10q,10q2 2 6 10 0 0.03 0 0 0 0.01 0 0.14 0 0.03 0 0.03 Homo sapiens Homo sapiens 0 0 Homo sapiens NM_006894| NM_001002294 AAGCCTAACGTGAAGGAATTCACAG[A/G] GACCTCGGCCATTTTGAGGATGGG 144193147 35 1q,1q23,1q2 1 0.15 0.01 0.23 0.19 Homo sapiens N-acetyltransferase 1 (arylamine N-acetyltransferase) NM_000662 TTTTGATCAAGTTGTGAGAAGAAAT[C/T] GGGGTGGATGGTGTCTCCAGGTCAA 17045677 3 nuclear receptor subfamily 1, group I, member 2 NM_022002|NM_0 03889|NM_033013 GGACACAGAGTCTGTTCCTGGAAAG[C/T] CCAGTGTCAACGCAGATGAGGAAGT 117935283 35 hCV27529541 Mis-sense Mutation hCV25599886 Mis-sense Mutation 35 10q24,10q,10q2 10 0.17 0.02 0 0 Homo sapiens 表2 5 8p22,8p2,8p 8 0 0 0 0 Homo sapiens 3q13.1,3q13,3q 1,3q 3 0 0.08 0 0 Homo sapiens DMEコレクションに含まれるアッセイとそれに付随する情報の例。アレル名とrs#については存在するもののみ記載。dme.appliedbiosystems.comより、ファイルをダウンロードすることが可能です。 • NAT1とNAT2(N-アセチルトラ 1. アッセイコンポーネントとDNAテンプレート ンスフェラーゼ): この遺伝子から Forward primer できる酵素は、最も重要な結核の薬 F Q 5' ガン性物質を代謝します。 MGB Probe Q Reverse primer A G であるイソニアジドやさまざまな発 • MDR1(ABCB1, P-糖タンパク質 V MGB Probe [C/T] 3' 5' LEGEND Reverse primer V 薬物輸送に関わる遺伝子の代表で MGB Probe F Q MGB Probe Q A G Forward primer す。これらの遺伝子は細胞膜を介し た代謝産物の輸送に関わっています。 [C/T] 3' ここに挙げたもの以外の遺伝子の例に 全なリストは dme.appliedbiosys- F Forward primer 実験が可能であり、アッセイのパフォー す。 マンスを各々に最適化する必要はありま Q G MGB Q C Match のを一部改良し、90秒のエクステンショ ンタイム、50サイクルで反応します。その 他すべての装置条件は、アプライドバイ FAM™ dye 高い再現性と容易な操作性を兼ね備え オシステムズのTaqMan® Genotyping Quencher たTaqMan ® によるアレル識別技術を Minor Groove Binder 採用しています。それぞれのアッセイ す。反応手順の統一と簡便化するため AmpliTaq Gold® DNA Polymerase には、多型を検出するための2種類の に、全てのTaqMan® Genotyping Assays アレル特異的なプローブと一対のプラ にDrug Metabolism Assayと共通のサー Probe Primer イマーが含まれています。プローブと マルサイクリング条件を用いることも可能 Template プライマーはともにゲノム中で特有の です。 VIC® dye F Q MGB Probe TaqMan® Genotyping Assay Technologyの採用 A V Extended Primer tems.comで入手可能です。 多型の同定とマッピング ル名やdbSNPのrs#が記載されていま TaqMan® Genotyping Assaysでは、 V MGB 5' 3. シグナルの発生 ついては表 2に示しています。また完 全アッセイは、すべて同じ反応条件での せん。アッセイの反応条件は、従来のも 2. 熱変性したDNAテンプレートとアニールするアッセイコンポーネント 1): 多剤耐性遺伝子の一つであり、 DME Assay Index ファイルには、アレ 3' [G/A] DNA template 図 1 1. TaqMan® Genotyping Assay の4つのコンポーネントとターゲットDNAテンプレート(SNP を括弧内に示しています)。2. 熱変性したDNAテンプレートとアニールする各コンポーネント。3. シグナ ルの発生によるアレルの検出。 これらのDMEコレクションの多型には 一 塩 基 多 型( S N P s )、挿 入 や 欠 失 Assaysで採用されているものと同じで ® ケミストリーを用いた 検証済みの優れたパフォーマンス ジェノタイピング技術の高い特異性を 各々のアッセイについて、まずAfrican 実現します。そしてその特異性の高さ American が、偽遺伝子を含む非常に相同性の高 DNAサンプル(3 ng) を使用し、2反復 45人 、Caucasian45人 の ( i n / d e l s )、複 数 塩 基 に わ た る 多 型 報、更にはアプライドバイオシステムズ 連部位に存在する多型のみをセットとし い遺伝子ファミリー中に存在するター のテストを行います。ここで良好な結果 (MNPs)があります。そのデータソース 独自のSNPデータベースが含まれます。 て選出しました。allele nomenclature ゲットにおいても特異的に検出できま が得られたアッセイは、さらに各45人ず は3種類で、dbSNP、HGMD、allele まず初めに220遺伝子の全ての多型を サイトは、DMEにある多型と、一般的 す。すべてのアッセイデザインにおい つのChineseおよびJapaneseのDNAサ nomenclatureサイト等のデータベース、 抽 出し 、そ の 中 から 調 節 因 子 やコー なアレル名と整合性をとるために利用 て、BLASTプログラムによるゲノム ンプルを用いたテストを行っています。 しました。無料でダウンロード可能な 全体との相同性チェックが行われ、ゲ すべてのテストにおいて再現性、シグナ ノム中で特有のデザインであることを ル強度、確実なジェノタイプの判定がで 医薬品業界における共同研究による情 ディング領域、もしくはスプライシング関 確認しています。 www.appliedbiosystems.co.jp www.appliedbiosystems.co.jp きるかどうか評価しています。 製品としての柔軟性 各アッセイは1本単位、もしくはセッ にこのシステムは次世代のソフトウェ プ ロ ー ブ ( VIC も し く は 6- ア技術を採用することにより、高い利 FAMTMでラベル)、2種類の遺伝子特異 便性を実現します。もちろん、このリ 的なプライマーを含むシングルチュー アルタイム PCR システムは、パフォー ブで供給されます。各アッセイは20× マンス、品質、信頼性を兼ね備えた、 濃度に調整されており、5-µLの反応系 アプライドバイオシステムズの実績に で750反応が可能です(表 3) 。 支えられた製品です。 ® 遺伝子リスト(サンプル) Official Gene Symbol Alias Entrez Gene ID Gene Description ABCB1 ABC20; CD243; CLCS; GP170; MDR1; P-gp; PGY1 5243 ATP-binding cassette, subfamily B (MDR/TAP), member 1 ABCC1 ABC29; ABCC; GS-X; MRP; MRP1 4363 ATP-binding cassette, subfamily C (CFTR/MRP), member 1 ABCC2 ABC30; CMOAT; DJS; MRP2; cMRP 1244 ATP-binding cassette, subfamily C (CFTR/MRP), member 2 ADH1A ADH1 124 alcohol dehydrogenase 1A (class I), alpha polypeptide ADH5 ADH-3; ADHX; FDH 128 alcohol dehydrogenase 5 (class III), chi polypeptide 1312 catechol-O-methyltransferase COMT CYP1A1 AHH; AHRR; CP11; CYP1; P1-450; P450-C; P450DX 1543 cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1 CYP1A2 CP12; P3-450; P450(PA) 1544 cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 2 全てのアッセイでも、研究に合わせて CYP1B1 CP1B; GLC3A 1545 cytochrome P450, family 1, subfamily B, polypeptide 1 選択することができます。各アッセイ CYP2A6 CPA6; CYP2A; CYP2A3; P450C2A; P450PB 1548 cytochrome P450, family 2, subfamily A, polypeptide 6 はアプライドバイオシステムズのウェ CYP2B6 CPB6; CYP2B; CYPIIB6; IIB1; P450 1555 cytochrome P450, family 2, subfamily B, polypeptide 6 ブサイト、dme.appliedbiosys- CYP2C19 CPCJ; CYP 2C; CYP2C; P450C2C; P450IIC19 1557 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 19 tems.com のページからmyScienceSM CYP2C9 CPC9; CYP2C; CYP2C10; P450 MP-4; P450 PB-1; P450IIC9 1559 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 9 CYP2D6 CPD6; CYP2D; CYP2D@; CYP2DL1; P450-DB1; P450C2D 1565 cytochrome P450, family 2, subfamily D, polypeptide 6 DPYD DHP; DPD 1806 dihydropyrimidine dehydrogenase FMO3 FMOII; MGC34400; dJ127D3.1 2328 flavin containing monooxygenase 3 2952 glutathione S-transferase theta 1 トで注文することができます。1遺伝 子上の1アッセイでも、複数遺伝子の を通じて注文できます。 DME Assay Indexファイル 配列を持つようにデザインされてお り、TaqMan り使いやすいものにしています。さら MGB Homo sapiens 0 mono- のTaqMan SNP Genotyping Asays同 様、2種類のアレル特異的なTaqMan ® 0 flavin containing oxygenase 3 ションであり、リアルタイムPCRをよ 0 7 Mis-sense Mutation なニーズに対応できる強力なソリュー います。アプライドバイオシステムズ 2 7q22,7q2,7q hCV2220257 注後速やかに発送できる体制を整えて Species ウンロードでき、製品に添付されるCDの 35 cytochrome P450, family 3, subfamily A, polypeptide 4 タイムPCRシステムは、研究者の多様 Chromosome 94109937 Mis-sense Mutation アプライドバイオシステムズのリアル アッセイは、製造後ストックされ、受 Minor Allele Frequency Chinese ACATTCCATGTCAAACATACAAAAG[C/T] CCTGGGAGGAGAAACAAAATAATAT hCV30634213 製品を迅速に供給するためにすべての dme.appliedbiosystems.comからダ Minor Allele Frequency Japanese NM_017460 NM_000771 強力なリアルタイムPCR システム Minor Allele Frequency African American 90442165 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 9 迅速なデリバリーと使いやすいフォーマット バ イオ シ ステム ズ の ウェブ サイト の Minor Allele Frequency Caucasian GATGGGGAAGAGGAGCATTGAGGAC[C/T] GTGTTCAAGAGGAAGCCCGCTGCCT Mis-sense Mutation hCV25625805 Location on NCBI Assembly NCBI Assembly Build DME Assay Index ファイルはアプライド 全てのアッセイの詳細情報は、DME GSTT1 Assay Index ファイルに入っています。 NAT1 AAC1 9 N-acetyltransferase 1 (arylamine N-acetyltransferase) クスト配 列( 多 型 および 前 後 2 5 b p )、 NAT2 AAC2 10 N-acetyltransferase 2 (arylamine N-acetyltransferase) NCBIアセンブリ上の位置、dbSNP rs SLC15A2 PEPT2 6565 solute carrier family 15 (H+/peptide transporter), member 2 #や、また存在する一般的なアレル名が UGT1A1 GNT1; HUG-BR1; UDPGT; UGT1; UGT1*1; UGT1A 54658 UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 リストアップされています。さらに、遺 UGT1A6 GNT1; HLUGP; HLUGP1; MGC29860; UDPGT; UGT1; UGT1*6; UGT1F 54578 UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A6 このファイルには、各アッセイのコンテ 伝子名(およびaliases)、SNPタイプ、ア ミノ酸置換、ウェットバリデーションより こちらには220種の薬物代謝酵素および薬物輸送タンパク質遺伝子のうちの一部を示しています。完全なリストは dme.appliedbiosystems.comにアクセスし てご覧ください。 得られた4人種各45人でのマイナーアレ ル 頻 度 の 情 報 も記 載 されて います。 www.appliedbiosystems.co.jp ABS-2746_Mailer_v4.qxd 05.9.26 3:33 PM ページ2 表1 DME Assay Index Assay ID Gene Symbol C____559715_20 UGT1A4 C___2307598_20 C__30634116_20 C__27861809_10 C__25625805_10 UGT1A1 Gene Symbol Alias Allele Nomenclature Polymorphism UDPGT|UGT1D|UGT1* 4|HUG-BR2 UGT1A1*6,c.211G>A A/G GNT1|UGT1|UDPGT|UGT1 A|UGT1*1|HUG-BR1 UGT1A1*27,c.686C>A CYP2C19 CYP2C9 MIM:191740 T154A A/G CYP2C19*3,c.636G>A Phenotype Q229P T/C CPCJ|CYP2C|CYP 2C|P450C2C|P450IIC19 NCBI SNP Reference MIM:606429 A/C TPMT Amino Acid Change *212W rs1800460 PharmGKB:PA124 |MIM:124020 R144C CPC9|CYP2C|CYP2C10|P450I IC9|P450 MP-4|P450 PB-1 CYP2C9*2A,c.430C>T|CYP2C9*2A,g. 3608C>T|CYP2C9*2B,c.430C>T|CYP 2C9*2B,g.3608C>T|CYP2C9*2C,c.43 0C>T|CYP2C9*2C,g.3608C>T C/T CYP3A4*7,c.167 g.6004G>A C/T D56G PharmGKB:PA130 |MIM:124010 A/G E308G|E308G MIM:136132 C__30634213_10 CYP3A4 HLP|CP34|CYP3A|NF25|CYP3 A3|P450C3|P450PCN1|CP33 C___2220257_30 FMO3 FMOII|MGC34400|dJ127D3.1 C__27529541_20 N A T 1 A C__25599886_40 NR1I2 ARq|PAR2|BXR|PAR|PRR|PXR| SAR|SXR|ONR1|PAR1 A C 1 G>A|CYP3A4*7, NAT1*17,g.190C>T C / C/T T hCV SNP Type Gene Name hCV559715 Intron UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A4 NM_007120 Mis-sense Mutation UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 NM_000463 Mis-sense Mutation thiopurine transferase NM_000367 Nonsense Mutation cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 19 hCV2307598 MIM:187680 rs4986893 MIM:601130|Phar mGKB:PA126 rs1799853 rs16947 R 6 4 W MIM:108345 P66S|P27S|P2 7S PharmGKB:PA378 |MIM:603065 NCBI Gene Reference hCV30634116 hCV27861809 S-methyl- Cytogenetic Band TGACGCCTCGTTGTACATCAGAGAC[A/G] GAGCATTTTACACCTTGAAGACGTA 228389777 35 2q,2q37,2q3 TTTCTGTGCGACGTGGTTTATTCCC[A/C] GTATGCAACCCTTGCCTCAGAATTC 228390252 TCACCTGGATTAATGGCAACTAATG[T/C] TCCTCTATCCCAAATCATGTCAAAT 19377237 ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTG[A/G] ATCCAGGTAAGGCCAAGTTTTTTGC 90280519 Context Sequence NM_000769 0 0.2 0.11 Homo sapiens 中にも含まれています。 35 2q,2q37,2q3 35 6p22,6p2,6p 35 10q24,10q,10q2 2 6 10 0 0.03 0 0 0 0.01 0 0.14 0 0.03 0 0.03 Homo sapiens Homo sapiens 0 0 Homo sapiens NM_006894| NM_001002294 AAGCCTAACGTGAAGGAATTCACAG[A/G] GACCTCGGCCATTTTGAGGATGGG 144193147 35 1q,1q23,1q2 1 0.15 0.01 0.23 0.19 Homo sapiens N-acetyltransferase 1 (arylamine N-acetyltransferase) NM_000662 TTTTGATCAAGTTGTGAGAAGAAAT[C/T] GGGGTGGATGGTGTCTCCAGGTCAA 17045677 3 nuclear receptor subfamily 1, group I, member 2 NM_022002|NM_0 03889|NM_033013 GGACACAGAGTCTGTTCCTGGAAAG[C/T] CCAGTGTCAACGCAGATGAGGAAGT 117935283 35 hCV27529541 Mis-sense Mutation hCV25599886 Mis-sense Mutation 35 10q24,10q,10q2 10 0.17 0.02 0 0 Homo sapiens 表2 5 8p22,8p2,8p 8 0 0 0 0 Homo sapiens 3q13.1,3q13,3q 1,3q 3 0 0.08 0 0 Homo sapiens DMEコレクションに含まれるアッセイとそれに付随する情報の例。アレル名とrs#については存在するもののみ記載。dme.appliedbiosystems.comより、ファイルをダウンロードすることが可能です。 • NAT1とNAT2(N-アセチルトラ 1. アッセイコンポーネントとDNAテンプレート ンスフェラーゼ): この遺伝子から Forward primer できる酵素は、最も重要な結核の薬 F Q 5' ガン性物質を代謝します。 MGB Probe Q Reverse primer A G であるイソニアジドやさまざまな発 • MDR1(ABCB1, P-糖タンパク質 V MGB Probe [C/T] 3' 5' LEGEND Reverse primer V 薬物輸送に関わる遺伝子の代表で MGB Probe F Q MGB Probe Q A G Forward primer す。これらの遺伝子は細胞膜を介し た代謝産物の輸送に関わっています。 [C/T] 3' ここに挙げたもの以外の遺伝子の例に 全なリストは dme.appliedbiosys- F Forward primer 実験が可能であり、アッセイのパフォー す。 マンスを各々に最適化する必要はありま Q G MGB Q C Match のを一部改良し、90秒のエクステンショ ンタイム、50サイクルで反応します。その 他すべての装置条件は、アプライドバイ FAM™ dye 高い再現性と容易な操作性を兼ね備え オシステムズのTaqMan® Genotyping Quencher たTaqMan ® によるアレル識別技術を Minor Groove Binder 採用しています。それぞれのアッセイ す。反応手順の統一と簡便化するため AmpliTaq Gold® DNA Polymerase には、多型を検出するための2種類の に、全てのTaqMan® Genotyping Assays アレル特異的なプローブと一対のプラ にDrug Metabolism Assayと共通のサー Probe Primer イマーが含まれています。プローブと マルサイクリング条件を用いることも可能 Template プライマーはともにゲノム中で特有の です。 VIC® dye F Q MGB Probe TaqMan® Genotyping Assay Technologyの採用 A V Extended Primer tems.comで入手可能です。 多型の同定とマッピング ル名やdbSNPのrs#が記載されていま TaqMan® Genotyping Assaysでは、 V MGB 5' 3. シグナルの発生 ついては表 2に示しています。また完 全アッセイは、すべて同じ反応条件での せん。アッセイの反応条件は、従来のも 2. 熱変性したDNAテンプレートとアニールするアッセイコンポーネント 1): 多剤耐性遺伝子の一つであり、 DME Assay Index ファイルには、アレ 3' [G/A] DNA template 図 1 1. TaqMan® Genotyping Assay の4つのコンポーネントとターゲットDNAテンプレート(SNP を括弧内に示しています)。2. 熱変性したDNAテンプレートとアニールする各コンポーネント。3. シグナ ルの発生によるアレルの検出。 これらのDMEコレクションの多型には 一 塩 基 多 型( S N P s )、挿 入 や 欠 失 Assaysで採用されているものと同じで ® ケミストリーを用いた 検証済みの優れたパフォーマンス ジェノタイピング技術の高い特異性を 各々のアッセイについて、まずAfrican 実現します。そしてその特異性の高さ American が、偽遺伝子を含む非常に相同性の高 DNAサンプル(3 ng) を使用し、2反復 45人 、Caucasian45人 の ( i n / d e l s )、複 数 塩 基 に わ た る 多 型 報、更にはアプライドバイオシステムズ 連部位に存在する多型のみをセットとし い遺伝子ファミリー中に存在するター のテストを行います。ここで良好な結果 (MNPs)があります。そのデータソース 独自のSNPデータベースが含まれます。 て選出しました。allele nomenclature ゲットにおいても特異的に検出できま が得られたアッセイは、さらに各45人ず は3種類で、dbSNP、HGMD、allele まず初めに220遺伝子の全ての多型を サイトは、DMEにある多型と、一般的 す。すべてのアッセイデザインにおい つのChineseおよびJapaneseのDNAサ nomenclatureサイト等のデータベース、 抽 出し 、そ の 中 から 調 節 因 子 やコー なアレル名と整合性をとるために利用 て、BLASTプログラムによるゲノム ンプルを用いたテストを行っています。 しました。無料でダウンロード可能な 全体との相同性チェックが行われ、ゲ すべてのテストにおいて再現性、シグナ ノム中で特有のデザインであることを ル強度、確実なジェノタイプの判定がで 医薬品業界における共同研究による情 ディング領域、もしくはスプライシング関 確認しています。 www.appliedbiosystems.co.jp www.appliedbiosystems.co.jp きるかどうか評価しています。 製品としての柔軟性 各アッセイは1本単位、もしくはセッ にこのシステムは次世代のソフトウェ プ ロ ー ブ ( VIC も し く は 6- ア技術を採用することにより、高い利 FAMTMでラベル)、2種類の遺伝子特異 便性を実現します。もちろん、このリ 的なプライマーを含むシングルチュー アルタイム PCR システムは、パフォー ブで供給されます。各アッセイは20× マンス、品質、信頼性を兼ね備えた、 濃度に調整されており、5-µLの反応系 アプライドバイオシステムズの実績に で750反応が可能です(表 3) 。 支えられた製品です。 ® 遺伝子リスト(サンプル) Official Gene Symbol Alias Entrez Gene ID Gene Description ABCB1 ABC20; CD243; CLCS; GP170; MDR1; P-gp; PGY1 5243 ATP-binding cassette, subfamily B (MDR/TAP), member 1 ABCC1 ABC29; ABCC; GS-X; MRP; MRP1 4363 ATP-binding cassette, subfamily C (CFTR/MRP), member 1 ABCC2 ABC30; CMOAT; DJS; MRP2; cMRP 1244 ATP-binding cassette, subfamily C (CFTR/MRP), member 2 ADH1A ADH1 124 alcohol dehydrogenase 1A (class I), alpha polypeptide ADH5 ADH-3; ADHX; FDH 128 alcohol dehydrogenase 5 (class III), chi polypeptide 1312 catechol-O-methyltransferase COMT CYP1A1 AHH; AHRR; CP11; CYP1; P1-450; P450-C; P450DX 1543 cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1 CYP1A2 CP12; P3-450; P450(PA) 1544 cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 2 全てのアッセイでも、研究に合わせて CYP1B1 CP1B; GLC3A 1545 cytochrome P450, family 1, subfamily B, polypeptide 1 選択することができます。各アッセイ CYP2A6 CPA6; CYP2A; CYP2A3; P450C2A; P450PB 1548 cytochrome P450, family 2, subfamily A, polypeptide 6 はアプライドバイオシステムズのウェ CYP2B6 CPB6; CYP2B; CYPIIB6; IIB1; P450 1555 cytochrome P450, family 2, subfamily B, polypeptide 6 ブサイト、dme.appliedbiosys- CYP2C19 CPCJ; CYP 2C; CYP2C; P450C2C; P450IIC19 1557 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 19 tems.com のページからmyScienceSM CYP2C9 CPC9; CYP2C; CYP2C10; P450 MP-4; P450 PB-1; P450IIC9 1559 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 9 CYP2D6 CPD6; CYP2D; CYP2D@; CYP2DL1; P450-DB1; P450C2D 1565 cytochrome P450, family 2, subfamily D, polypeptide 6 DPYD DHP; DPD 1806 dihydropyrimidine dehydrogenase FMO3 FMOII; MGC34400; dJ127D3.1 2328 flavin containing monooxygenase 3 2952 glutathione S-transferase theta 1 トで注文することができます。1遺伝 子上の1アッセイでも、複数遺伝子の を通じて注文できます。 DME Assay Indexファイル 配列を持つようにデザインされてお り、TaqMan り使いやすいものにしています。さら MGB Homo sapiens 0 mono- のTaqMan SNP Genotyping Asays同 様、2種類のアレル特異的なTaqMan ® 0 flavin containing oxygenase 3 ションであり、リアルタイムPCRをよ 0 7 Mis-sense Mutation なニーズに対応できる強力なソリュー います。アプライドバイオシステムズ 2 7q22,7q2,7q hCV2220257 注後速やかに発送できる体制を整えて Species ウンロードでき、製品に添付されるCDの 35 cytochrome P450, family 3, subfamily A, polypeptide 4 タイムPCRシステムは、研究者の多様 Chromosome 94109937 Mis-sense Mutation アプライドバイオシステムズのリアル アッセイは、製造後ストックされ、受 Minor Allele Frequency Chinese ACATTCCATGTCAAACATACAAAAG[C/T] CCTGGGAGGAGAAACAAAATAATAT hCV30634213 製品を迅速に供給するためにすべての dme.appliedbiosystems.comからダ Minor Allele Frequency Japanese NM_017460 NM_000771 強力なリアルタイムPCR システム Minor Allele Frequency African American 90442165 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 9 迅速なデリバリーと使いやすいフォーマット バ イオ シ ステム ズ の ウェブ サイト の Minor Allele Frequency Caucasian GATGGGGAAGAGGAGCATTGAGGAC[C/T] GTGTTCAAGAGGAAGCCCGCTGCCT Mis-sense Mutation hCV25625805 Location on NCBI Assembly NCBI Assembly Build DME Assay Index ファイルはアプライド 全てのアッセイの詳細情報は、DME GSTT1 Assay Index ファイルに入っています。 NAT1 AAC1 9 N-acetyltransferase 1 (arylamine N-acetyltransferase) クスト配 列( 多 型 および 前 後 2 5 b p )、 NAT2 AAC2 10 N-acetyltransferase 2 (arylamine N-acetyltransferase) NCBIアセンブリ上の位置、dbSNP rs SLC15A2 PEPT2 6565 solute carrier family 15 (H+/peptide transporter), member 2 #や、また存在する一般的なアレル名が UGT1A1 GNT1; HUG-BR1; UDPGT; UGT1; UGT1*1; UGT1A 54658 UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 リストアップされています。さらに、遺 UGT1A6 GNT1; HLUGP; HLUGP1; MGC29860; UDPGT; UGT1; UGT1*6; UGT1F 54578 UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A6 このファイルには、各アッセイのコンテ 伝子名(およびaliases)、SNPタイプ、ア ミノ酸置換、ウェットバリデーションより こちらには220種の薬物代謝酵素および薬物輸送タンパク質遺伝子のうちの一部を示しています。完全なリストは dme.appliedbiosystems.comにアクセスし てご覧ください。 得られた4人種各45人でのマイナーアレ ル 頻 度 の 情 報 も記 載 されて います。 www.appliedbiosystems.co.jp ABS-2746_Mailer_v4.qxd 05.9.26 3:33 PM ページ2 表1 DME Assay Index Assay ID Gene Symbol C____559715_20 UGT1A4 C___2307598_20 C__30634116_20 C__27861809_10 C__25625805_10 UGT1A1 Gene Symbol Alias Allele Nomenclature Polymorphism UDPGT|UGT1D|UGT1* 4|HUG-BR2 UGT1A1*6,c.211G>A A/G GNT1|UGT1|UDPGT|UGT1 A|UGT1*1|HUG-BR1 UGT1A1*27,c.686C>A CYP2C19 CYP2C9 MIM:191740 T154A A/G CYP2C19*3,c.636G>A Phenotype Q229P T/C CPCJ|CYP2C|CYP 2C|P450C2C|P450IIC19 NCBI SNP Reference MIM:606429 A/C TPMT Amino Acid Change *212W rs1800460 PharmGKB:PA124 |MIM:124020 R144C CPC9|CYP2C|CYP2C10|P450I IC9|P450 MP-4|P450 PB-1 CYP2C9*2A,c.430C>T|CYP2C9*2A,g. 3608C>T|CYP2C9*2B,c.430C>T|CYP 2C9*2B,g.3608C>T|CYP2C9*2C,c.43 0C>T|CYP2C9*2C,g.3608C>T C/T CYP3A4*7,c.167 g.6004G>A C/T D56G PharmGKB:PA130 |MIM:124010 A/G E308G|E308G MIM:136132 C__30634213_10 CYP3A4 HLP|CP34|CYP3A|NF25|CYP3 A3|P450C3|P450PCN1|CP33 C___2220257_30 FMO3 FMOII|MGC34400|dJ127D3.1 C__27529541_20 N A T 1 A C__25599886_40 NR1I2 ARq|PAR2|BXR|PAR|PRR|PXR| SAR|SXR|ONR1|PAR1 A C 1 G>A|CYP3A4*7, NAT1*17,g.190C>T C / C/T T hCV SNP Type Gene Name hCV559715 Intron UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A4 NM_007120 Mis-sense Mutation UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 NM_000463 Mis-sense Mutation thiopurine transferase NM_000367 Nonsense Mutation cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 19 hCV2307598 MIM:187680 rs4986893 MIM:601130|Phar mGKB:PA126 rs1799853 rs16947 R 6 4 W MIM:108345 P66S|P27S|P2 7S PharmGKB:PA378 |MIM:603065 NCBI Gene Reference hCV30634116 hCV27861809 S-methyl- Cytogenetic Band TGACGCCTCGTTGTACATCAGAGAC[A/G] GAGCATTTTACACCTTGAAGACGTA 228389777 35 2q,2q37,2q3 TTTCTGTGCGACGTGGTTTATTCCC[A/C] GTATGCAACCCTTGCCTCAGAATTC 228390252 TCACCTGGATTAATGGCAACTAATG[T/C] TCCTCTATCCCAAATCATGTCAAAT 19377237 ACATCAGGATTGTAAGCACCCCCTG[A/G] ATCCAGGTAAGGCCAAGTTTTTTGC 90280519 Context Sequence NM_000769 0 0.2 0.11 Homo sapiens 中にも含まれています。 35 2q,2q37,2q3 35 6p22,6p2,6p 35 10q24,10q,10q2 2 6 10 0 0.03 0 0 0 0.01 0 0.14 0 0.03 0 0.03 Homo sapiens Homo sapiens 0 0 Homo sapiens NM_006894| NM_001002294 AAGCCTAACGTGAAGGAATTCACAG[A/G] GACCTCGGCCATTTTGAGGATGGG 144193147 35 1q,1q23,1q2 1 0.15 0.01 0.23 0.19 Homo sapiens N-acetyltransferase 1 (arylamine N-acetyltransferase) NM_000662 TTTTGATCAAGTTGTGAGAAGAAAT[C/T] GGGGTGGATGGTGTCTCCAGGTCAA 17045677 3 nuclear receptor subfamily 1, group I, member 2 NM_022002|NM_0 03889|NM_033013 GGACACAGAGTCTGTTCCTGGAAAG[C/T] CCAGTGTCAACGCAGATGAGGAAGT 117935283 35 hCV27529541 Mis-sense Mutation hCV25599886 Mis-sense Mutation 35 10q24,10q,10q2 10 0.17 0.02 0 0 Homo sapiens 表2 5 8p22,8p2,8p 8 0 0 0 0 Homo sapiens 3q13.1,3q13,3q 1,3q 3 0 0.08 0 0 Homo sapiens DMEコレクションに含まれるアッセイとそれに付随する情報の例。アレル名とrs#については存在するもののみ記載。dme.appliedbiosystems.comより、ファイルをダウンロードすることが可能です。 • NAT1とNAT2(N-アセチルトラ 1. アッセイコンポーネントとDNAテンプレート ンスフェラーゼ): この遺伝子から Forward primer できる酵素は、最も重要な結核の薬 F Q 5' ガン性物質を代謝します。 MGB Probe Q Reverse primer A G であるイソニアジドやさまざまな発 • MDR1(ABCB1, P-糖タンパク質 V MGB Probe [C/T] 3' 5' LEGEND Reverse primer V 薬物輸送に関わる遺伝子の代表で MGB Probe F Q MGB Probe Q A G Forward primer す。これらの遺伝子は細胞膜を介し た代謝産物の輸送に関わっています。 [C/T] 3' ここに挙げたもの以外の遺伝子の例に 全なリストは dme.appliedbiosys- F Forward primer 実験が可能であり、アッセイのパフォー す。 マンスを各々に最適化する必要はありま Q G MGB Q C Match のを一部改良し、90秒のエクステンショ ンタイム、50サイクルで反応します。その 他すべての装置条件は、アプライドバイ FAM™ dye 高い再現性と容易な操作性を兼ね備え オシステムズのTaqMan® Genotyping Quencher たTaqMan ® によるアレル識別技術を Minor Groove Binder 採用しています。それぞれのアッセイ す。反応手順の統一と簡便化するため AmpliTaq Gold® DNA Polymerase には、多型を検出するための2種類の に、全てのTaqMan® Genotyping Assays アレル特異的なプローブと一対のプラ にDrug Metabolism Assayと共通のサー Probe Primer イマーが含まれています。プローブと マルサイクリング条件を用いることも可能 Template プライマーはともにゲノム中で特有の です。 VIC® dye F Q MGB Probe TaqMan® Genotyping Assay Technologyの採用 A V Extended Primer tems.comで入手可能です。 多型の同定とマッピング ル名やdbSNPのrs#が記載されていま TaqMan® Genotyping Assaysでは、 V MGB 5' 3. シグナルの発生 ついては表 2に示しています。また完 全アッセイは、すべて同じ反応条件での せん。アッセイの反応条件は、従来のも 2. 熱変性したDNAテンプレートとアニールするアッセイコンポーネント 1): 多剤耐性遺伝子の一つであり、 DME Assay Index ファイルには、アレ 3' [G/A] DNA template 図 1 1. TaqMan® Genotyping Assay の4つのコンポーネントとターゲットDNAテンプレート(SNP を括弧内に示しています)。2. 熱変性したDNAテンプレートとアニールする各コンポーネント。3. シグナ ルの発生によるアレルの検出。 これらのDMEコレクションの多型には 一 塩 基 多 型( S N P s )、挿 入 や 欠 失 Assaysで採用されているものと同じで ® ケミストリーを用いた 検証済みの優れたパフォーマンス ジェノタイピング技術の高い特異性を 各々のアッセイについて、まずAfrican 実現します。そしてその特異性の高さ American が、偽遺伝子を含む非常に相同性の高 DNAサンプル(3 ng) を使用し、2反復 45人 、Caucasian45人 の ( i n / d e l s )、複 数 塩 基 に わ た る 多 型 報、更にはアプライドバイオシステムズ 連部位に存在する多型のみをセットとし い遺伝子ファミリー中に存在するター のテストを行います。ここで良好な結果 (MNPs)があります。そのデータソース 独自のSNPデータベースが含まれます。 て選出しました。allele nomenclature ゲットにおいても特異的に検出できま が得られたアッセイは、さらに各45人ず は3種類で、dbSNP、HGMD、allele まず初めに220遺伝子の全ての多型を サイトは、DMEにある多型と、一般的 す。すべてのアッセイデザインにおい つのChineseおよびJapaneseのDNAサ nomenclatureサイト等のデータベース、 抽 出し 、そ の 中 から 調 節 因 子 やコー なアレル名と整合性をとるために利用 て、BLASTプログラムによるゲノム ンプルを用いたテストを行っています。 しました。無料でダウンロード可能な 全体との相同性チェックが行われ、ゲ すべてのテストにおいて再現性、シグナ ノム中で特有のデザインであることを ル強度、確実なジェノタイプの判定がで 医薬品業界における共同研究による情 ディング領域、もしくはスプライシング関 確認しています。 www.appliedbiosystems.co.jp www.appliedbiosystems.co.jp きるかどうか評価しています。 製品としての柔軟性 各アッセイは1本単位、もしくはセッ にこのシステムは次世代のソフトウェ プ ロ ー ブ ( VIC も し く は 6- ア技術を採用することにより、高い利 FAMTMでラベル)、2種類の遺伝子特異 便性を実現します。もちろん、このリ 的なプライマーを含むシングルチュー アルタイム PCR システムは、パフォー ブで供給されます。各アッセイは20× マンス、品質、信頼性を兼ね備えた、 濃度に調整されており、5-µLの反応系 アプライドバイオシステムズの実績に で750反応が可能です(表 3) 。 支えられた製品です。 ® 遺伝子リスト(サンプル) Official Gene Symbol Alias Entrez Gene ID Gene Description ABCB1 ABC20; CD243; CLCS; GP170; MDR1; P-gp; PGY1 5243 ATP-binding cassette, subfamily B (MDR/TAP), member 1 ABCC1 ABC29; ABCC; GS-X; MRP; MRP1 4363 ATP-binding cassette, subfamily C (CFTR/MRP), member 1 ABCC2 ABC30; CMOAT; DJS; MRP2; cMRP 1244 ATP-binding cassette, subfamily C (CFTR/MRP), member 2 ADH1A ADH1 124 alcohol dehydrogenase 1A (class I), alpha polypeptide ADH5 ADH-3; ADHX; FDH 128 alcohol dehydrogenase 5 (class III), chi polypeptide 1312 catechol-O-methyltransferase COMT CYP1A1 AHH; AHRR; CP11; CYP1; P1-450; P450-C; P450DX 1543 cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1 CYP1A2 CP12; P3-450; P450(PA) 1544 cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 2 全てのアッセイでも、研究に合わせて CYP1B1 CP1B; GLC3A 1545 cytochrome P450, family 1, subfamily B, polypeptide 1 選択することができます。各アッセイ CYP2A6 CPA6; CYP2A; CYP2A3; P450C2A; P450PB 1548 cytochrome P450, family 2, subfamily A, polypeptide 6 はアプライドバイオシステムズのウェ CYP2B6 CPB6; CYP2B; CYPIIB6; IIB1; P450 1555 cytochrome P450, family 2, subfamily B, polypeptide 6 ブサイト、dme.appliedbiosys- CYP2C19 CPCJ; CYP 2C; CYP2C; P450C2C; P450IIC19 1557 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 19 tems.com のページからmyScienceSM CYP2C9 CPC9; CYP2C; CYP2C10; P450 MP-4; P450 PB-1; P450IIC9 1559 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 9 CYP2D6 CPD6; CYP2D; CYP2D@; CYP2DL1; P450-DB1; P450C2D 1565 cytochrome P450, family 2, subfamily D, polypeptide 6 DPYD DHP; DPD 1806 dihydropyrimidine dehydrogenase FMO3 FMOII; MGC34400; dJ127D3.1 2328 flavin containing monooxygenase 3 2952 glutathione S-transferase theta 1 トで注文することができます。1遺伝 子上の1アッセイでも、複数遺伝子の を通じて注文できます。 DME Assay Indexファイル 配列を持つようにデザインされてお り、TaqMan り使いやすいものにしています。さら MGB Homo sapiens 0 mono- のTaqMan SNP Genotyping Asays同 様、2種類のアレル特異的なTaqMan ® 0 flavin containing oxygenase 3 ションであり、リアルタイムPCRをよ 0 7 Mis-sense Mutation なニーズに対応できる強力なソリュー います。アプライドバイオシステムズ 2 7q22,7q2,7q hCV2220257 注後速やかに発送できる体制を整えて Species ウンロードでき、製品に添付されるCDの 35 cytochrome P450, family 3, subfamily A, polypeptide 4 タイムPCRシステムは、研究者の多様 Chromosome 94109937 Mis-sense Mutation アプライドバイオシステムズのリアル アッセイは、製造後ストックされ、受 Minor Allele Frequency Chinese ACATTCCATGTCAAACATACAAAAG[C/T] CCTGGGAGGAGAAACAAAATAATAT hCV30634213 製品を迅速に供給するためにすべての dme.appliedbiosystems.comからダ Minor Allele Frequency Japanese NM_017460 NM_000771 強力なリアルタイムPCR システム Minor Allele Frequency African American 90442165 cytochrome P450, family 2, subfamily C, polypeptide 9 迅速なデリバリーと使いやすいフォーマット バ イオ シ ステム ズ の ウェブ サイト の Minor Allele Frequency Caucasian GATGGGGAAGAGGAGCATTGAGGAC[C/T] GTGTTCAAGAGGAAGCCCGCTGCCT Mis-sense Mutation hCV25625805 Location on NCBI Assembly NCBI Assembly Build DME Assay Index ファイルはアプライド 全てのアッセイの詳細情報は、DME GSTT1 Assay Index ファイルに入っています。 NAT1 AAC1 9 N-acetyltransferase 1 (arylamine N-acetyltransferase) クスト配 列( 多 型 および 前 後 2 5 b p )、 NAT2 AAC2 10 N-acetyltransferase 2 (arylamine N-acetyltransferase) NCBIアセンブリ上の位置、dbSNP rs SLC15A2 PEPT2 6565 solute carrier family 15 (H+/peptide transporter), member 2 #や、また存在する一般的なアレル名が UGT1A1 GNT1; HUG-BR1; UDPGT; UGT1; UGT1*1; UGT1A 54658 UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 リストアップされています。さらに、遺 UGT1A6 GNT1; HLUGP; HLUGP1; MGC29860; UDPGT; UGT1; UGT1*6; UGT1F 54578 UDP glycosyltransferase 1 family, polypeptide A6 このファイルには、各アッセイのコンテ 伝子名(およびaliases)、SNPタイプ、ア ミノ酸置換、ウェットバリデーションより こちらには220種の薬物代謝酵素および薬物輸送タンパク質遺伝子のうちの一部を示しています。完全なリストは dme.appliedbiosystems.comにアクセスし てご覧ください。 得られた4人種各45人でのマイナーアレ ル 頻 度 の 情 報 も記 載 されて います。 www.appliedbiosystems.co.jp Product Bulletin TaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays 表3 製品規格 P/N Size Status Concentration Volume Delivered Reaction Size* Reactions 4362691 Small Inventoried 20X 187.5 µL 5 µL 25 µL 750 150 *反応ボリュームは、使用する反応ブロックにより異なります。384-ウェルブロックでは5 µl、96-ウェルブロックでは25 µlで反応を行います。 表4 他のTaqMan® Assay Type SNP Genotyping AssaysとTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assaysとの比較 Status Size Number of 5-µL Reactions* Performance Validated with 180 DNA Samples Number of Assays Drug Metabolism Inventoried Small 750 Yes >2,000 Validated Inventoried Small 750 Yes ~160,000 Coding Inventoried Small 750 No ~30,000 Made-to-order Small 750 No >2 million Pre-Designed Custom Made-to-order Small Medium Large Applied Biosystems 7900HT Fast Applied Biosystems 7500 リアルタイ Applied Biosystems 7300 リアルタイ リアルタイムPCRシステム − 究極の ムPCR システム − 拡張性必要とす ム PCR システム − 基礎分野の研究 パフォーマンスと柔軟性 るユーザーのための多機能モデル 者のための経済性に優れたスタンダー • ユーザーご自身で交換できるサンプ • 先進的な5色対応の光学検出系の採 ドモデル ルブロックには、384-ウェル、96-ウェ 用により、広範囲の色素に対応でき、 • 4色対応の検出系で、主要なすべて ル、TaqMan® Low Density Array、 また励起波長はフィルター毎に変更 のアプリケーションに対応します。 Fast 96-ウェルの4種があります(オプ されており、長波長(赤色)色素に ション) 。 対する感度を改善しています。 • 寿命の長い488 nmアルゴンイオン • Relative Quantitation Softwareの機 レーザーと、500 - 660nm波長域の全 能により、最大10枚のプレートの遺 波長での検出を組み合わせることで、 伝子発現データを、1度に解析する 優れた色素識別能を発揮します。 ことが可能です。 No がシンプルでわかりやすく、多機能 ソフトウェアを採用しています。 • 精密な光学系とCCDカメラにより、 精度、再現性、信頼性ともに高い結 極めて簡単な設定で自動化を実現し コードしています。 ロールシステムにより、優れた再現 性と一貫した高品質のデータを提供 エンタープライズ版ソフトウェアにより数 • SNPs、insertion/deletion、複数塩 基におよぶ多型(MNPs)など幅広 します。 い変異が検出可能です。 百から数千のプレートを同時に解析す ることが可能です。 (21 CFR part 11に • 常時在庫しているinventoried assay 準拠。オプション。 ) 特長と優位性 • ターゲットとなる多型が存在する 遺伝子は220種以上におよび、薬物 果を提供します。 • 特許取得済みのサンプル温度コント N/A *384-ウェルサンプルブロック使用 • 実験のセットアップ、データの処理 代謝酵素や薬物輸送タンパク質を • オートメーションアクセサリーにより、 ます。 1,000 3,000 12,000 基礎研究および臨床研究のためのTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays で、パフォーマンスは検証済みで す。 特長 優位性 Ordering Information 220種以上の薬物代謝遺伝子の調節因子やコーディング領域の 内部に存在する有用な多型2,000以上がターゲットです。※注1 特定薬物の代謝速度に関係する多型や、これまでタイピングが困 難とされていた多型の研究が可能。 商品名 各アッセイは任意に選択して、注文することができます。 研究の目的に応じて自由にアッセイを選択することができ、 アッセイを制限されることはありません。 TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays ® TaqMan®ケミストリにより、1つのプラットフォームで、 SNPs、in/dels、MNPsなど各種多型に対応可能です。 各アッセイは、dme.appliedbiosystems.comから注文できます。 アッセイコレクションは既存のリアルタイムPCRプラットフォーム を用いて検出できるよう開発が行われています。 新規のアッセイもこれまでと全く同じ実験条件で(90秒のエク ステンションタイムと50回のサイクル数が必要となりますが、 他の条件は全て同じです。)シームレスな統合が可能です。 For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 必要なアッセイを選択するための時間とエネルギーは必要ありま せん。 配列相同性による問題の克服および特異的な多型検出のために、 高度なバイオインフォマティクス技術が用いられています。 厳密なWet Validationにより、信頼性の高いターゲットSNPs のデータを提供します。 Applera シーケンシングプロジェクトで得られた新規の SNPターゲット変異が含まれています。 他の手法では入手が困難な情報が簡単にアクセスでき、研究に重 要なSNPsをいち早く調査することが可能です。 ※注1 2005年8月末現在、1,560Assays。順次追加する予定です 商品番号 small scale 4362691 本製品には、プロトコル、Assey Information File (AIF)、DME Assay Index、トラブルシューティングガイドの入ったCDが付属されています。 各種多型が検出可能です。 個々の多型と一般的なアレル名との関連づけ、またゲノム上の 物理的な位置を得るため、高度なバイオインフォマティクス技術が 用いられています。 サイズ • 4人種で合計180人のDNAサンプル についてデータを検証済みです。 • 公開されているallele nomenclatureサイトを参照しています。 イントロダクション NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE: The purchase price of TaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays, P/N 4362691 includes a limited, non-transferable license under U.S. Patents Nos. 5,538,848, 5,876,930, 6,030,787 and 6,258,569, and corresponding claims in patents outside the U.S., owned by the Applera Corporation (“Applera”), and U.S. Patent No. 5,804,375 (claims 1-12 only), owned by Roche Molecular Systems, Inc. and corresponding claims outside the U.S. owned by F. Hoffmann-La Roche Ltd. (collectively, “Roche”), to use only this portion of probe solely to perform the purchaser’s own internal research and development activities. This product may also be used to perform 5' nuclease assays under service licenses from Applera. No rights are granted under any other patent or patent claim, expressly, by implication, or by estoppel, including U.S. Patents Nos. 5,210,015 or 5,487,972, covering the 5' nuclease process, owned by Roche, or corresponding claims in patents outside the United States. Further information on purchasing licenses for these patented processes may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA. Notice to Purchaser: TaqMan® probes are covered by U.S. Patent 5,723,591, and foreign counterparts and patents pending owned by Applera Corporation, and are covered by U.S. Patents 5,801,155 and 6,084,102 and foreign counterparts licensed to Applied Biosystems. 2 2 0 種を超 す 薬 物 代 謝 酵 素 遺 伝 子 (DMEs)および薬物輸送タンパク質遺 伝子上に存在する、2000種以上 (※注1) のユニークな多型を検出するTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays が発売になりました。これらの遺伝子 多型は、患者体内の薬物代謝速度に 関係することがあり、薬効や副作用 研究用にのみ使用できます。診断目的およびその手続き上での使用は出来ません。 Applied Biosystems is a registered trademark and AB (Design), Applera and myScience are trademarks of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries. の発生に影響を与える可能性があり ます。これまで、こうした遺伝子多 TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc. 記載の社名および製品名は、弊社または各社の商標または登録商標です。 型を効果的に同定するための技術や © 2005 Applied Biosystems Japan Ltd,. All Rights reserved. 製品が少なかったため、遺伝子の複 Printed in JAPAN, GTA001-A0509OB 雑な性質についての研究には制限が お問い合せ先 本 社: アプライドバイオシステムズジャパン株式会社 〒104-0032 東京都中央区八丁堀4-5-4 セイは、全て表現型に現れる可能性 がある多型、すなわち調節領域や FAX. 03(5566)6501 コーディング領域、スプライシング 大 阪: に関連した部位の多型のみをター TEL. 06(6389)1201 FAX. 06(6389)1206 www.appliedbiosystems.co.jp ありました。本製品に含まれるアッ TEL. 03(5566)6100 〒564-0052 大阪府吹田市広芝町10-28 www.appliedbiosystems.co.jp 取扱店: TaqMan® Drug Metabolism Genotyping 薬物代謝に関わる遺伝子 Assaysの開発には、高度なバイオイ 薬物代謝酵素をコードする遺伝子は、 ンフォマティクス技術、厳密な 医薬品(もしくは化学物質)に対す ウェットバリデーションの手法が用 る反応性に影響を与えるため、医薬 いられています。アッセイはallele 品開発や臨床研究において重要な nomenclatureサイトを含む、幾つか ターゲットとなります。主要な遺伝 のパブリックSNPデータベースをも 子は以下の通りです。 とに設計されており、4人種から得ら れた180人のDNAサンプルからパ フォーマンスを確認してます。またこ れらのTaqMan® DME (drug metabolism enzyme) assaysは、アプライドバイオ システムズのTaqMan® SNP Genotyping Assaysやリアルタイム PCR システムと共 • CYP2D6: 57種あるチトクローム P450ファミリーの遺伝子の1つであ り、抗不整脈剤、抗うつ剤、抗精 神病薬、ßブロッカーや鎮痛剤など の20-25%がこの酵素により代謝さ れるとされています。 に使用することが可能です。 ゲットにしています。 ※注1 9月12日現在、1560アッセイ。順次追加予定です。 www.appliedbiosystems.co.jp ABS-2746_Mailer_v4.qxd 05.9.26 3:33 PM ページ1 Product Bulletin TaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays 表3 製品規格 P/N Size Status Concentration Volume Delivered Reaction Size* Reactions 4362691 Small Inventoried 20X 187.5 µL 5 µL 25 µL 750 150 *反応ボリュームは、使用する反応ブロックにより異なります。384-ウェルブロックでは5 µl、96-ウェルブロックでは25 µlで反応を行います。 表4 他のTaqMan® Assay Type SNP Genotyping AssaysとTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assaysとの比較 Status Size Number of 5-µL Reactions* Performance Validated with 180 DNA Samples Number of Assays Drug Metabolism Inventoried Small 750 Yes >2,000 Validated Inventoried Small 750 Yes ~160,000 Coding Inventoried Small 750 No ~30,000 Made-to-order Small 750 No >2 million Pre-Designed Custom Made-to-order Small Medium Large Applied Biosystems 7900HT Fast Applied Biosystems 7500 リアルタイ Applied Biosystems 7300 リアルタイ リアルタイムPCRシステム − 究極の ムPCR システム − 拡張性必要とす ム PCR システム − 基礎分野の研究 パフォーマンスと柔軟性 るユーザーのための多機能モデル 者のための経済性に優れたスタンダー • ユーザーご自身で交換できるサンプ • 先進的な5色対応の光学検出系の採 ドモデル ルブロックには、384-ウェル、96-ウェ 用により、広範囲の色素に対応でき、 • 4色対応の検出系で、主要なすべて ル、TaqMan® Low Density Array、 また励起波長はフィルター毎に変更 のアプリケーションに対応します。 Fast 96-ウェルの4種があります(オプ されており、長波長(赤色)色素に ション) 。 対する感度を改善しています。 • 寿命の長い488 nmアルゴンイオン • Relative Quantitation Softwareの機 レーザーと、500 - 660nm波長域の全 能により、最大10枚のプレートの遺 波長での検出を組み合わせることで、 伝子発現データを、1度に解析する 優れた色素識別能を発揮します。 ことが可能です。 No がシンプルでわかりやすく、多機能 ソフトウェアを採用しています。 • 精密な光学系とCCDカメラにより、 精度、再現性、信頼性ともに高い結 極めて簡単な設定で自動化を実現し コードしています。 ロールシステムにより、優れた再現 性と一貫した高品質のデータを提供 エンタープライズ版ソフトウェアにより数 • SNPs、insertion/deletion、複数塩 基におよぶ多型(MNPs)など幅広 します。 い変異が検出可能です。 百から数千のプレートを同時に解析す ることが可能です。 (21 CFR part 11に • 常時在庫しているinventoried assay 準拠。オプション。 ) 特長と優位性 • ターゲットとなる多型が存在する 遺伝子は220種以上におよび、薬物 果を提供します。 • 特許取得済みのサンプル温度コント N/A *384-ウェルサンプルブロック使用 • 実験のセットアップ、データの処理 代謝酵素や薬物輸送タンパク質を • オートメーションアクセサリーにより、 ます。 1,000 3,000 12,000 基礎研究および臨床研究のためのTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays で、パフォーマンスは検証済みで す。 特長 優位性 Ordering Information 220種以上の薬物代謝遺伝子の調節因子やコーディング領域の 内部に存在する有用な多型2,000以上がターゲットです。※注1 特定薬物の代謝速度に関係する多型や、これまでタイピングが困 難とされていた多型の研究が可能。 商品名 各アッセイは任意に選択して、注文することができます。 研究の目的に応じて自由にアッセイを選択することができ、 アッセイを制限されることはありません。 TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays ® TaqMan®ケミストリにより、1つのプラットフォームで、 SNPs、in/dels、MNPsなど各種多型に対応可能です。 各アッセイは、dme.appliedbiosystems.comから注文できます。 アッセイコレクションは既存のリアルタイムPCRプラットフォーム を用いて検出できるよう開発が行われています。 新規のアッセイもこれまでと全く同じ実験条件で(90秒のエク ステンションタイムと50回のサイクル数が必要となりますが、 他の条件は全て同じです。)シームレスな統合が可能です。 For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 必要なアッセイを選択するための時間とエネルギーは必要ありま せん。 配列相同性による問題の克服および特異的な多型検出のために、 高度なバイオインフォマティクス技術が用いられています。 厳密なWet Validationにより、信頼性の高いターゲットSNPs のデータを提供します。 Applera シーケンシングプロジェクトで得られた新規の SNPターゲット変異が含まれています。 他の手法では入手が困難な情報が簡単にアクセスでき、研究に重 要なSNPsをいち早く調査することが可能です。 ※注1 2005年8月末現在、1,560Assays。順次追加する予定です 商品番号 small scale 4362691 本製品には、プロトコル、Assey Information File (AIF)、DME Assay Index、トラブルシューティングガイドの入ったCDが付属されています。 各種多型が検出可能です。 個々の多型と一般的なアレル名との関連づけ、またゲノム上の 物理的な位置を得るため、高度なバイオインフォマティクス技術が 用いられています。 サイズ • 4人種で合計180人のDNAサンプル についてデータを検証済みです。 • 公開されているallele nomenclatureサイトを参照しています。 イントロダクション NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE: The purchase price of TaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays, P/N 4362691 includes a limited, non-transferable license under U.S. Patents Nos. 5,538,848, 5,876,930, 6,030,787 and 6,258,569, and corresponding claims in patents outside the U.S., owned by the Applera Corporation (“Applera”), and U.S. Patent No. 5,804,375 (claims 1-12 only), owned by Roche Molecular Systems, Inc. and corresponding claims outside the U.S. owned by F. Hoffmann-La Roche Ltd. (collectively, “Roche”), to use only this portion of probe solely to perform the purchaser’s own internal research and development activities. This product may also be used to perform 5' nuclease assays under service licenses from Applera. No rights are granted under any other patent or patent claim, expressly, by implication, or by estoppel, including U.S. Patents Nos. 5,210,015 or 5,487,972, covering the 5' nuclease process, owned by Roche, or corresponding claims in patents outside the United States. Further information on purchasing licenses for these patented processes may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA. Notice to Purchaser: TaqMan® probes are covered by U.S. Patent 5,723,591, and foreign counterparts and patents pending owned by Applera Corporation, and are covered by U.S. Patents 5,801,155 and 6,084,102 and foreign counterparts licensed to Applied Biosystems. 2 2 0 種を超 す 薬 物 代 謝 酵 素 遺 伝 子 (DMEs)および薬物輸送タンパク質遺 伝子上に存在する、2000種以上 (※注1) のユニークな多型を検出するTaqMan® Drug Metabolism Genotyping Assays が発売になりました。これらの遺伝子 多型は、患者体内の薬物代謝速度に 関係することがあり、薬効や副作用 研究用にのみ使用できます。診断目的およびその手続き上での使用は出来ません。 Applied Biosystems is a registered trademark and AB (Design), Applera and myScience are trademarks of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries. の発生に影響を与える可能性があり ます。これまで、こうした遺伝子多 TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc. 記載の社名および製品名は、弊社または各社の商標または登録商標です。 型を効果的に同定するための技術や © 2005 Applied Biosystems Japan Ltd,. All Rights reserved. 製品が少なかったため、遺伝子の複 Printed in JAPAN, GTA001-A0509OB 雑な性質についての研究には制限が お問い合せ先 本 社: アプライドバイオシステムズジャパン株式会社 〒104-0032 東京都中央区八丁堀4-5-4 セイは、全て表現型に現れる可能性 がある多型、すなわち調節領域や FAX. 03(5566)6501 コーディング領域、スプライシング 大 阪: に関連した部位の多型のみをター TEL. 06(6389)1201 FAX. 06(6389)1206 www.appliedbiosystems.co.jp ありました。本製品に含まれるアッ TEL. 03(5566)6100 〒564-0052 大阪府吹田市広芝町10-28 www.appliedbiosystems.co.jp 取扱店: TaqMan® Drug Metabolism Genotyping 薬物代謝に関わる遺伝子 Assaysの開発には、高度なバイオイ 薬物代謝酵素をコードする遺伝子は、 ンフォマティクス技術、厳密な 医薬品(もしくは化学物質)に対す ウェットバリデーションの手法が用 る反応性に影響を与えるため、医薬 いられています。アッセイはallele 品開発や臨床研究において重要な nomenclatureサイトを含む、幾つか ターゲットとなります。主要な遺伝 のパブリックSNPデータベースをも 子は以下の通りです。 とに設計されており、4人種から得ら れた180人のDNAサンプルからパ フォーマンスを確認してます。またこ れらのTaqMan® DME (drug metabolism enzyme) assaysは、アプライドバイオ システムズのTaqMan® SNP Genotyping Assaysやリアルタイム PCR システムと共 • CYP2D6: 57種あるチトクローム P450ファミリーの遺伝子の1つであ り、抗不整脈剤、抗うつ剤、抗精 神病薬、ßブロッカーや鎮痛剤など の20-25%がこの酵素により代謝さ れるとされています。 に使用することが可能です。 ゲットにしています。 ※注1 9月12日現在、1560アッセイ。順次追加予定です。 www.appliedbiosystems.co.jp
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