cin agar base yersinia selective supplement

Biolife
Scheda Tecnica
Italiana Srl
N°401302 B I-3 02/2006 Pagina 1 di 3
CIN AGAR BASE
YERSINIA SELECTIVE SUPPLEMENT
Terreno di base in polvere e pronto all’uso in flacone e
supplemento selettivo per l’isolamento di Yersinia enterocolitica.
FORMULE TIPICHE
CIN Agar Base (g/l)
Peptone
Estratto di lievito
Mannitolo
Sodio piruvato
Sodio cloruro
Magnesio solfato
Sodio desossicolato
Irgasan
Rosso neutro
Violetto cristallo
Agar
20.000
2.000
20.000
2.000
1.000
0.010
0.500
0.004
0.030
0.001
12.000
Yersinia Selective Supplement (mg/fiala)
Cefsulodina
7.50
Novobiocina
1.25
Attenzione: il composto Irgasan, termostabile, è incluso nel terreno di base.
ASPETTO
Il terreno in polvere si presenta con una fine granulometria violacea.
Il terreno pronto in falcone si presenta di colore viola.
Il supplemento liofilo è una pastiglia soffice incolore
TERRENO IN POLVERE E SUPPLEMENTO: METODO DI PREPARAZIONE
Sospendere 28.75 g di polvere in 500 ml di acqua distillata fredda; portare ad ebollizione sotto
agitazione, ed autoclavare a 121°C per 15 minuti. Raffreddare a circa 50°C. Ricostituire, con le
precauzioni dell’asepsi, una fiala di Yersinia Selective Supplement (cat. n. 4240011) con 5 ml di acqua
distillata sterile ed addizionare a 500 ml di CIN Agar Base. Mescolare e distribuire in piastra. Il terreno
in piastra si presenta di colore viola, limpido.
pH finale 7.4 ± 0.2.
TERRENO IN FLACONE: METODO DI PREPARAZIONE
Il terreno pronto all’uso in flacone, dopo bollitura in bagnomaria, deve essere raffreddato a circa 50°C.
Addizionare 1 ml di supplemento Yersinia Selective Supplement (cat. n. 4240011) ricostituito con 5 ml
di acqua distillata sterile. Mescolare e distribuire in piastra. Il terreno in piastra si presenta di colore
viola, limpido.
pH finale 7.4 ± 0.2
DESCRIZIONE
Il terreno Cefsulodin-Irgasan-Novobiocin (C.I.N.) Agar è preparato addizionando al CIN Agar Base il
supplemento selettivo con cefsulodina e novobiocina; è un terreno altamente selettivo per
l’isolamento di Yersinia enterocolitica da campioni clinici e da alimenti. Il terreno è preparato
Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428,
E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it
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secondo la formulazione messa a punto da Schiemann (1979) e raccomandata dalla norma ISO
10273.
I batteri Gram positivi e parte di quelli Gram negativi sono inibiti dagli agenti selettivi presenti nel
terreno di base: sodio desossicolato, cristallo violetto, Irgasan; gli antibiotici inibiscono la crescita
degli enterobatteri. Il mannitolo è presente quale carboidrato fermentabile: i batteri in grado di
fermentarlo inducono un’acidificazione del terreno con precipitazione del sodio desossicolato e
assorbimento del rosso neutro; Y. enterocolitica coltiva quindi con il caratteristico aspetto delle
colonie ad “occhio di bue”. Il terreno è altamente selettivo, Schiemann (1982) e Devenish (1981)
riportano che solo alcuni ceppi di Citrobacter freundii, Serratia liquefaciens ed Enterobacter
agglomerans coltivano su CIN Agar: le colonie di questi microrganismi hanno un aspetto simile a
quello di Y. enterocolitica.
IMPIEGO
Per l’isolamento di Y. enterocolitica si può procedere con la semina diretta del campione o con la
semina del campione arricchito in Yersinia ITC Broth. Per i dettagli operativi relativi
all’arricchimento, fare riferimento alla scheda tecnica di Yersinia ITC Broth Base (402275).
Dopo incubazione a 30°C per 24-48 ore Yersinia enterocolitica coltiva con colonie rosso-porpora,
circondate da un bordo trasparente. Il diametro delle colonie varia da ceppo a ceppo ma rimane
costante per ceppi del medesimo sierotipo.
CONTROLLO QUALITÀ SUGGERITO
Controllo produttività
Y.enterocolitica ATCC 9610*: crescita, colonie con centro rosso porpora e bordo chiaro
Controllo selettività
P.aeruginosa ATCC 27853*: inibito
E.faecalis ATCC 29212*:inibito
Incubazione a 30°C per 24 ore
*ceppi raccomandati da NCCLS M22-A2
CONSERVAZIONE
Terreno in polvere: conservare a 15-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni il prodotto
rimane valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi
sono segni evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della polvere ecc.). La
data di scadenza si applica al prodotto nella sua confezione originale e conservato come indicato.
Terreno pronto in flacone: conservare a 2-8°C al riparo della luce. In queste condizioni il prodotto rimane valido
fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni
evidenti di deterioramento. La data di scadenza si applica al prodotto nella sua confezione originale e conservato
come indicato.
Supplemento selettivo: conservare fino alla data di scadenza indicata sull’etichetta, a 2 - 8°C. La data di
scadenza si applica al prodotto nella sua confezione originale e conservato come indicato. Una volta ricostituito
usare in giornata o conservare congelato in aliquote per non più di 1 mese. Non congelare e scongelare più di
una volta.
Conservare il terreno di base preparato in laboratorio, senza aggiunti di supplementi, per un massimo di 1 mese
a 2-8°C
Conservare le piastre, complete di supplemento, preparate in laboratorio per un massimo di 7 giorni a 2-8°C
PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI
Terreno in polvere e pronto per l’uso in flacone: solo per uso diagnostico in vitro. I prodotti qui descritti
devono essere usato solo in laboratorio, da operatori adeguatamente addestrati. Operare con metodi approvati
di asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni. Sterilizzare le piastre dopo il loro uso e prima
dell’eliminazione come rifiuto. I prodotti non sono classificabili come pericolosi ai sensi della legislazione
vigente e quindi non richiedono la scheda di sicurezza. Come per tutti i terreni in polvere la manipolazione deve
essere effettuata con una adeguata protezione delle vie aeree
Supplemento selettivo: solo per uso diagnostico in vitro. Il prodotto qui descritto deve essere usato solo in
laboratorio, da operatori adeguatamente addestrati. Il prodotto è classificato come Xn ai sensi della
legislazione vigente e quindi richiede la scheda di sicurezza.
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AVVERTENZA
Il terreno di base prodotto da Biolife Italiana Srl contiene Irgasan che, in altre formulazioni di origine diversa,
può trovarsi inserito nel supplemento liofilo. Per questa ragione il terreno di base Biolife deve essere usato solo
con il supplemento selettivo prodotto da Biolife Italiana Srl e viceversa. Non miscelare prodotti di origine
diversa se non dopo averne confrontato attentamente le formulazioni.
BIBLIOGRAFIA
• Devenish J.A. and Schiemann D.A. (1981), Can. J. Microbiol., 27, 937-941.
• Highsmith, A.K., Feeley J.C. and Morris, G.K. (1977), Hlth. Lab. Sci., 14, 253-260.
• ISO 10273:1994-Microbiology - General guidance for the detection of presumptive pathogenic Y.enterocolitica
pathogens.
• NCCLS document M22-A2, 1996. Quality Assurance for Commercially prepared Microbiological Culture
Media-Second Ed.; Approved Standard.
• Schiemann, D.A. (1979), Can. J. Microbiol., 25, 1298-1304
• Schiemann, D.A. (1982),Appl. Environ.Microbiol., 43,14-27
CONFEZIONI
Terreno in polvere
4013022
CIN Agar Base
500 g ( 8.71)
Supplemento selettivo
4240011
Yersinia Selective Supplement,
10 fiale liofile, ciascuna per 500 ml
Terreno di base in flaconi
5113022
CIN Agar Base,
6 flaconi da 100 ml
Il terreno è disponibile anche in piastre pronte per l’uso:
549997
Yersinia Selective Medium,
20 piastre, diametro 90 mm
CODICE CND W0104010101
CODICE CND W0104010104
CODICE CND W0104010306
CODICE CND W0104010405
IVD
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