Biolife Scheda Tecnica Italiana Srl N°401302 B I-3 02/2006 Pagina 1 di 3 CIN AGAR BASE YERSINIA SELECTIVE SUPPLEMENT Terreno di base in polvere e pronto all’uso in flacone e supplemento selettivo per l’isolamento di Yersinia enterocolitica. FORMULE TIPICHE CIN Agar Base (g/l) Peptone Estratto di lievito Mannitolo Sodio piruvato Sodio cloruro Magnesio solfato Sodio desossicolato Irgasan Rosso neutro Violetto cristallo Agar 20.000 2.000 20.000 2.000 1.000 0.010 0.500 0.004 0.030 0.001 12.000 Yersinia Selective Supplement (mg/fiala) Cefsulodina 7.50 Novobiocina 1.25 Attenzione: il composto Irgasan, termostabile, è incluso nel terreno di base. ASPETTO Il terreno in polvere si presenta con una fine granulometria violacea. Il terreno pronto in falcone si presenta di colore viola. Il supplemento liofilo è una pastiglia soffice incolore TERRENO IN POLVERE E SUPPLEMENTO: METODO DI PREPARAZIONE Sospendere 28.75 g di polvere in 500 ml di acqua distillata fredda; portare ad ebollizione sotto agitazione, ed autoclavare a 121°C per 15 minuti. Raffreddare a circa 50°C. Ricostituire, con le precauzioni dell’asepsi, una fiala di Yersinia Selective Supplement (cat. n. 4240011) con 5 ml di acqua distillata sterile ed addizionare a 500 ml di CIN Agar Base. Mescolare e distribuire in piastra. Il terreno in piastra si presenta di colore viola, limpido. pH finale 7.4 ± 0.2. TERRENO IN FLACONE: METODO DI PREPARAZIONE Il terreno pronto all’uso in flacone, dopo bollitura in bagnomaria, deve essere raffreddato a circa 50°C. Addizionare 1 ml di supplemento Yersinia Selective Supplement (cat. n. 4240011) ricostituito con 5 ml di acqua distillata sterile. Mescolare e distribuire in piastra. Il terreno in piastra si presenta di colore viola, limpido. pH finale 7.4 ± 0.2 DESCRIZIONE Il terreno Cefsulodin-Irgasan-Novobiocin (C.I.N.) Agar è preparato addizionando al CIN Agar Base il supplemento selettivo con cefsulodina e novobiocina; è un terreno altamente selettivo per l’isolamento di Yersinia enterocolitica da campioni clinici e da alimenti. Il terreno è preparato Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it Biolife Italiana Srl Scheda Tecnica N°401302 B I-3 02/2006 Pagina 2 di 3 secondo la formulazione messa a punto da Schiemann (1979) e raccomandata dalla norma ISO 10273. I batteri Gram positivi e parte di quelli Gram negativi sono inibiti dagli agenti selettivi presenti nel terreno di base: sodio desossicolato, cristallo violetto, Irgasan; gli antibiotici inibiscono la crescita degli enterobatteri. Il mannitolo è presente quale carboidrato fermentabile: i batteri in grado di fermentarlo inducono un’acidificazione del terreno con precipitazione del sodio desossicolato e assorbimento del rosso neutro; Y. enterocolitica coltiva quindi con il caratteristico aspetto delle colonie ad “occhio di bue”. Il terreno è altamente selettivo, Schiemann (1982) e Devenish (1981) riportano che solo alcuni ceppi di Citrobacter freundii, Serratia liquefaciens ed Enterobacter agglomerans coltivano su CIN Agar: le colonie di questi microrganismi hanno un aspetto simile a quello di Y. enterocolitica. IMPIEGO Per l’isolamento di Y. enterocolitica si può procedere con la semina diretta del campione o con la semina del campione arricchito in Yersinia ITC Broth. Per i dettagli operativi relativi all’arricchimento, fare riferimento alla scheda tecnica di Yersinia ITC Broth Base (402275). Dopo incubazione a 30°C per 24-48 ore Yersinia enterocolitica coltiva con colonie rosso-porpora, circondate da un bordo trasparente. Il diametro delle colonie varia da ceppo a ceppo ma rimane costante per ceppi del medesimo sierotipo. CONTROLLO QUALITÀ SUGGERITO Controllo produttività Y.enterocolitica ATCC 9610*: crescita, colonie con centro rosso porpora e bordo chiaro Controllo selettività P.aeruginosa ATCC 27853*: inibito E.faecalis ATCC 29212*:inibito Incubazione a 30°C per 24 ore *ceppi raccomandati da NCCLS M22-A2 CONSERVAZIONE Terreno in polvere: conservare a 15-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni il prodotto rimane valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della polvere ecc.). La data di scadenza si applica al prodotto nella sua confezione originale e conservato come indicato. Terreno pronto in flacone: conservare a 2-8°C al riparo della luce. In queste condizioni il prodotto rimane valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento. La data di scadenza si applica al prodotto nella sua confezione originale e conservato come indicato. Supplemento selettivo: conservare fino alla data di scadenza indicata sull’etichetta, a 2 - 8°C. La data di scadenza si applica al prodotto nella sua confezione originale e conservato come indicato. Una volta ricostituito usare in giornata o conservare congelato in aliquote per non più di 1 mese. Non congelare e scongelare più di una volta. Conservare il terreno di base preparato in laboratorio, senza aggiunti di supplementi, per un massimo di 1 mese a 2-8°C Conservare le piastre, complete di supplemento, preparate in laboratorio per un massimo di 7 giorni a 2-8°C PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI Terreno in polvere e pronto per l’uso in flacone: solo per uso diagnostico in vitro. I prodotti qui descritti devono essere usato solo in laboratorio, da operatori adeguatamente addestrati. Operare con metodi approvati di asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni. Sterilizzare le piastre dopo il loro uso e prima dell’eliminazione come rifiuto. I prodotti non sono classificabili come pericolosi ai sensi della legislazione vigente e quindi non richiedono la scheda di sicurezza. Come per tutti i terreni in polvere la manipolazione deve essere effettuata con una adeguata protezione delle vie aeree Supplemento selettivo: solo per uso diagnostico in vitro. Il prodotto qui descritto deve essere usato solo in laboratorio, da operatori adeguatamente addestrati. Il prodotto è classificato come Xn ai sensi della legislazione vigente e quindi richiede la scheda di sicurezza. Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it Biolife Italiana Srl Scheda Tecnica N°401302 B I-3 02/2006 Pagina 3 di 3 AVVERTENZA Il terreno di base prodotto da Biolife Italiana Srl contiene Irgasan che, in altre formulazioni di origine diversa, può trovarsi inserito nel supplemento liofilo. Per questa ragione il terreno di base Biolife deve essere usato solo con il supplemento selettivo prodotto da Biolife Italiana Srl e viceversa. Non miscelare prodotti di origine diversa se non dopo averne confrontato attentamente le formulazioni. BIBLIOGRAFIA • Devenish J.A. and Schiemann D.A. (1981), Can. J. Microbiol., 27, 937-941. • Highsmith, A.K., Feeley J.C. and Morris, G.K. (1977), Hlth. Lab. Sci., 14, 253-260. • ISO 10273:1994-Microbiology - General guidance for the detection of presumptive pathogenic Y.enterocolitica pathogens. • NCCLS document M22-A2, 1996. Quality Assurance for Commercially prepared Microbiological Culture Media-Second Ed.; Approved Standard. • Schiemann, D.A. (1979), Can. J. Microbiol., 25, 1298-1304 • Schiemann, D.A. (1982),Appl. Environ.Microbiol., 43,14-27 CONFEZIONI Terreno in polvere 4013022 CIN Agar Base 500 g ( 8.71) Supplemento selettivo 4240011 Yersinia Selective Supplement, 10 fiale liofile, ciascuna per 500 ml Terreno di base in flaconi 5113022 CIN Agar Base, 6 flaconi da 100 ml Il terreno è disponibile anche in piastre pronte per l’uso: 549997 Yersinia Selective Medium, 20 piastre, diametro 90 mm CODICE CND W0104010101 CODICE CND W0104010104 CODICE CND W0104010306 CODICE CND W0104010405 IVD Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it
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