GEヘルスケア Ni Sepharose excel プレゼントキャンペーン150526

His-tagタンパク質精製
2015年度
マンスリーピックアップ
におすすめ
細胞外へ分泌発現させているHis-tagタンパク質精製用
クロマトグラフィー担体およびプレパックカラム
Ni Sepharose excel
プレゼント
キャンペーン
● 培地に含まれるキレート剤の影響はほとんどなし
● 細胞培養後の清澄化した培養上清を、バッファー交換なしで
そのまま添加可能
開催中！
Ni Sepharose excel は、従来品に比べてニッケルイオン（Ni2+）が強固に
結合している担体です。10 mM EDTA を含むバッファーで 24 時間インキュ
ベーションした後も、His-tag タンパク質の結合能は変わりません。His-tag
詳しくは裏面へ
タンパク質を細胞外へ分泌発現させた後、清澄化した培養上清を、キレート
剤の有無にかかわらず、
バッファー交換なしでそのまま添加できます。
ここがオススメ！ Ni Sepharose excel
培養上清を直接添加しても、
Ni2+ がはずれにくい！
バッファー交換の手間いらず！
■仕様
HisTrap excel カラム
Ni Sepharose excel
ゲルマトリックス
平均粒子径
結合容量＊ 1
推奨線流速＊ 2
pH 安定性
保存状態
6% 高度架橋アガロース
90 µm
約 10 mg His-tag タンパク質 /ml ゲル
150 cm/h
2 ∼ 12（長期）、2 ∼ 14（短期）
20% エタノール、4 ∼ 30 ℃
担体容量
カラムサイズ
推奨線流速＊ 2
限界圧
1 ml、5 ml
0.7×2.5 cm（1 ml）、1.6×2.5 cm（5 ml）
1 ml/min（1 ml）、5 ml/min（5 ml）
0.5 MPa（5 bar, Column top/hardware pressure）
＊1 サンプルにより異なります
＊2 常温、H2Oの場合
■ご注文情報
製品名
Ni Sepharose excel
Ni Sepharose excel
Ni Sepharose excel
HisTrap excel
HisTrap excel
HisTrap excel
包装
コード番号
価格（円）
25 ml
100 ml
500 ml
1 × 1 ml
5 × 1 ml
5 × 5 ml
17371201
17371202
17371203
29048586
17371205
17371206
44,000
162,000
614,000
7,300
28,000
97,000
小スケール精製をされている方には磁気ビーズタイプもオススメ！
His Mag Sepharose excel
取扱店
imagination at work
www.gelifesciences.co.jp
今月のオススメ試薬
Ni Sepharose excel 25 ml を
抽選で 5 名様にプレゼント
！
Purification of protein secreted into CHO cell
culture medium
To investigate the difference in performance between
Ni Sepharose excel and Ni Sepharose 6 FF, a comparative
analysis was performed by purification of histidine-tagged
年月
（火）
∼ 月 8)
murine plasminogen
activator 日
inhibitor
(mPAI-1-(his)
expressed in 7CHO
andを予定しています
secreted into CHO cell
当選発表は
月 7cells
日（火）
culture medium.
2015 5 26
期間
コレ
Medium:
Ni Sepharose excel, 1 ml
Ni Sepharose 6 FF, 1 ml
Column:
Tricorn 5/50
Tricorn 5/50
Sample:
mPAI-1-(his)8 secreted into GIBCO CD CHO medium, pH 7.0
Sample volume:
250 ml
6 26 日（金）
250 ml
20 mM sodium
phosphate
500 mM NaCl
20 mM imidazole
pH 7.4
20 mM sodium
phosphate
Equilibration buffer:
500 mM NaCl
pH 7.4
20 mM sodium
20 mM sodium
successfully
Figure 5 shows培養細胞上清のままで
that mPAI-1-(his)8 could be
バッファー交換せずに、
タンパク質が精製できる Niphosphate
を抽選で 5 名様
His-tag
Sepharose
excel phosphate
25mMml
5001 ml
NaCl
500
mM1 NaCl
Medium: Wash buffer:
Ni Sepharose
excel,
ml
Ni Sepharose 6 FF,
Purification
of Sepharose
protein secreted
into
CHO cell
purified
using
Ni
excel,
with
a
purity
of
>98%.
10
mM
imidazole
20
mM
imidazole
にプレゼント
します。ぜひ、
Tricorn 5/50
Tricorn 5/50
culture
mediumご自身のサンプルでお試しください！Column:
pH 7.4
pH 7.4
In comparison, Ni Sepharose 6 FF showed no recovery of
Sample:
mPAI-1-(his) secreted into GIBCO CD CHO medium, pH 7.0
To investigate
difference
performance
between
20 mM sodium phosphate, 500 mM NaCl,
target
protein.the
Moreover,
NiinSepharose
excel
kept its blue
Elution buffer:
pH ml
7.4
Ni Sepharose
excel
and Ni Sepharose
FF, a ▲
comparative
▲6▲FF did not, Sample volume: 250 ml 500 mM imidazole,250
color
after theお申込はこちらから
experiment
while Ni 6Sepharose
20 mM sodium
analysis was performed by purification of histidine-tagged
Flow rate: 20 mM sodium
1 ml/min
giving additional evidence that Ni Sepharose excel resists
phosphate
phosphate
murine plasminogen activator inhibitor (mPAI-1-(his)8)
Equilibration
buffer:
Temperature:
Room temperature500 mM NaCl
nickel
stripping.
500 mM NaCl
20 mM imidazole
expressed
in CHO cells and secreted into CHO cell
www.gelifesciences.co.jp/excel
8
System:
ÄKTA avant 25
CHO細胞より分泌された
His-tagタンパク質を含む培養上清からの精製
culture medium.
pH 7.4
pH 7.4
20 mM sodium
phosphate
500 mM NaCl
10 mM imidazole
pH 7.4
20 mM sodium
phosphate
could 6
beFast
successfully
Figure
5 shows
that
（青）
とmPAI-1-(his)
とを比較したところ、
Ni Sepharose
excel
Ni Sepharose
Flow
Ni Sepharose500excel
Medium:
Ni Sepharose
excel, 1 ml8
Ni Sepharose
6 FF, （緑）
1 ml
o CHO cell
Wash buffer:
mM NaClでは培養上清から目的の
purified using Ni Sepharose excel, with a purity of >98%.
20 mM imidazole
Column:
Tricorn
5/50
Tricorn
5/50
A)
B)
タンパク質を精製できました。
pH 7.4
In comparison, Ni Sepharose 6 FF showed no recovery of
Sample:
mPAI-1-(his)8 secreted into GIBCO CD CHO medium, pH 7.0
target protein. Moreover,
Ni Sepharose excel kept its blue
e between
a comparative
stidine-tagged
AI-1-(his)8)
HO cell
1 ml/min
97.0
Tricorn 5/50
20 mM sodium
20.1
20 mM sodium
mPAI-1-(his)
secreted into GIBCO CD CHO medium, pH 7.0
8
Room temperature
66.0
250 ml
250 ml
ÄKTA avant 25
20 mM sodium
60 45.0
20 mM sodium
45.0
phosphate
phosphate
Equilibration buffer:
500 mM NaCl
500 mM NaCl
30.0
20 mM imidazole
30.0
40
pH 7.4
B)
pH 7.4
%B
Temperature:
Sample
66.0volume:
System:
20.1
100
3
%B
%B
A280 nm mAU
A280 nm mAU
3. Ni Sepharose
excel,
20.1 System: 20.1
ÄKTA avant
25 flowthrough
20
20 14.4
500
7. Ni Sepharose 6 FF, wash
8. Ni Sepharose 6 FF, eluate
4. Ni Sepharose excel, wash
14.4
Ni Sepharose
BFigA)5. (A) 0Comparative
excel 270
of
030
10 purification
250
260mPAI-1-(his)
Ni Sepharose
0
1
2 解析
3 （本データは
4
5
6
7 FLA
8 9000 でスキャンし、
SDS-PAGE
Typhoon
0 cell culture
1
2
3 Sepharose
4
5 excel6 (blue)7and Ni
8 Sepharose 6 FF (green);
(Mr280
46 300)
supernatant
using
Ni
ml6 FF in CHO
B)
8
解析ソフ
ト
ウェアを使用しました）
ImageQuant
TL
M
×
10
r
0
10
250
260
270
280
ml
with Deep Purple™ Total Protein Stain, scanned in Typhoon™ FLA 9000 Imager, and
Mr × 103(B) SDS-PAGE analysis. The SDS-PAGE gel (reducing conditions) was stained
100
1. LMW-SDS
5. Ni Sepharose excel, eluate
analyzed
with ImageQuant™ TL software.
100
Mr × 103Marker Kit
97.0
80 97.0
Mr × 1032. Start material
3000
6. Ni Sepharose 6 FF, flowthrough
3000
97.0
66.0
80 97.0 3. Ni Sepharose excel, flowthrough
66.0
7. Ni Sepharose 6 FF, wash
100
0
280 ml
45.0
2000
2000
%B
5
プレゼント！
0
お申込み時の注意点
60
%B
%B
%B
80
2500
2500
66.0
66.0 4. Ni Sepharose
excel, wash
8. Ni Sepharose 6 FF, eluate
60 45.0
45.0
30.0 Fig 5. (A)
Comparative purification of mPAI-1-(his)8 (Mr 46 300) in CHO cell culture supernatant using Ni Sepharose excel (blue) and Ni Sepharose 6 FF (green);
30.0
40
1500
1500
30.0
(B) SDS-PAGE
analysis. The SDS-PAGE gel (reducing conditions) was
with
Deep Purple™
30.0 Total Protein Stain, scanned in Typhoon™ FLA 9000 Imager, and
40 stained40
抽選で名様に
20.1 analyzed
with
ImageQuant™ TL software.
20.1
1000
20.1
1000
20.1
20 14.4
20
私を
14.4
20 14.4
500
14.4
500
1
2
3
4
5
6
7
8
60 45.0
60
A280 nm mAU
80
A280 nm mAU
100
270
20 mM imidazole
1000
B)
0
280 ml
10 mM imidazole
Tricorn 5/50
Flow rate:
80
97.0
Sample:
%B
A280 nm mAU
A280 nm mAU
1000
20 mM sodium phosphate, 500 mM NaCl,
Ni Sepharose 6 FF, 1 ml
3
excel, pH
1 ml7.4
Mr × Ni
10Sepharose
500
mM imidazole,
100 20
Mr × 10
pHthat
7.4 mPAI-1-(his) couldpH
phosphate
phosphate
3
be7.4successfully
Figure
5 shows
14.4
Mr × 1020
8
5003000
Wash buffer:
500 mM NaCl
500 mM NaCl
14.4
3000 500
20 mM sodium phosphate, 500 mM NaCl,
purified
97.0
20 mM imidazole
10 mM imidazole
Elution
buffer: using Ni Sepharose excel, with a purity of >98%. 80 97.0
80
500 mM imidazole, pH 7.4
0
1
2
3
4
5
6
7
8
pH
7.4
pH 7.4
02500
In 2500
comparison,
Ni Sepharose 6 FF showed no recovery
of
66.0
66.0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
00
10
260
270 kept its
280blue
ml
Flow
rate: protein.
1 Moreover,
ml/min 250Ni Sepharose
20 mM sodium phosphate, 500 mM NaCl,
target
excel
Elution
buffer:
60
60
10
250
260
270
280
ml
2000 0
2000
500
mM
imidazole,
pH
7.4
45.0
45.0
Temperature:
temperature
color after theRoom
experiment
while Ni Sepharose 6 FF did not,
Marker Kit
5. Ni Sepharose excel, eluate
Flow rate:1. LMW-SDS
1 ml/min
1500
giving
additional
System:
ÄKTAevidence
avant 25 that Ni Sepharose excel resists
1500
30.0
30.0
40
40
2. Start material
6. Ni Sepharose 6 FF, flowthrough
Temperature:
Room temperature
nickel
stripping.
1000
500
20
Medium:
3
M
r × 10
Column:
3000
20 mM sodium
giving additional
20 evidence
mM sodium that Ni Sepharose excel resists
phosphate
To investigate
the difference in performance
between 80
2500
phosphate
nickel
stripping.
2500
Equilibration
buffer: excel and Ni Sepharose 6500
NaCl
Ni Sepharose
FF,mM
a comparative
500 mM NaCl
20 mM imidazole
pH 7.4
60
analysis
by purificationpH
of7.4
histidine-tagged
2000was performed
2000
murine plasminogen
activator inhibitor20(mPAI-1-(his)
mM sodium 8)
20 mM sodium
1500
1500 in CHO
expressed
cells and secreted into
CHO cell
phosphate
phosphate
40
A)
500 mM NaCl
500 mM NaCl
Wash
buffer:
culture
1000 medium.
uccessfully
rity of >98%.
o recovery of
l kept its blue
se 6 FF did not,
e excel resists
40
100
Elution buffer:
Purification250ofmlprotein secreted250
into
CHO cell100
ml 6 FF did not,
ASample
colorvolume:
after
experiment while Ni Sepharose
3000the
culture
medium
00
1
0
2
10
3
10
250
4
250
260
5
6
270
260
08
280 ml
7
270
0
280 ml
1
2
3
1
4
2
5
3
6
4
7
5
8
6
7
8
1. LMW-SDS Marker Kit
5. Ni Sepharose excel, eluate
1. LMW-SDS Marker Kit
5. Ni Sepharose excel, eluate
医療機器業公正競争規約により、
治療、
診断などの行為に少しでも携わっている方）
への景品類の提供は、原則禁止されております。大変申し訳ありませんが、
2. Start material 医療従事者（診療、
6.
Ni Sepharose
6 FF, flowthrough
2. Start material
6. Ni Sepharose 6 FF, flowthrough
医療従事者の方はお申込みいただけません。国家公務員、
みなし公務員および企業団体にご所属のお客さまにつきましては、
景品類受領の可否に関してご所属機関により規定が
3. Ni Sepharose excel, flowthrough
7. Ni Sepharose
6 FF, wash
3. Ni Sepharose excel, flowthrough
7. Ni Sepharose 6 FF, wash
異なる可能性があるため、
必ず所属機関の規定、
倫理監督官等にご確認ください。プレゼン
トの発送は日本国内の所在地のみとさせていただきます。
4. Ni Sepharose excel, wash
8. Ni Sepharose 6 FF, eluate
4. Ni Sepharose excel, wash
8. Ni Sepharose 6 FF, eluate
プレゼントは Ni Sepharose excel（25 ml, コード番号：17371201）となります。製品添付マニュアルに従ってご使用ください。
Fig 5. (A) Comparative
purification
of mPAI-1-(his)
(Mr 46 300) in 6CHO
cell culture supernatant using Ni Sepharose excel (blue) and Ni Sepharose 6 FF (green);
6 300) in CHO cell culture supernatant
using Ni Sepharose
excel
(blue) and Ni
FF (green);
8 Sepharose
SDS-PAGE
analysis.
The
SDS-PAGE
gel (reducing
conditions)
was Imager,
stained with
ditions) was stained with Deep(B)
Purple™
Total
Protein
Stain,
scanned
in Typhoon™
FLA 9000
and Deep Purple™ Total Protein Stain, scanned in Typhoon™ FLA 9000 Imager, and
analyzed with ImageQuant™ TL software.
www.gelifesciences.co.jp
e-mail で最新情報をお届けしています。お申込みは上記 Web サイト左下の「メールマガジン購読」から
8
掲載されている価格は 2015 年 5 月現在の希望小売価格です（消費税は含まれておりません）。
希望小売価格は単なる参考価格であり、弊社販売代理店が自主的に設定する販売価格を何ら拘
束するものではありません。掲載されている製品は試験研究用以外には使用しないでください。
掲載されている内容は予告なく変更される場合がありますのであらかじめご了承ください。
29-0168-49 AC
5
掲載されている社名や製品名は、各社の商標または登録商標です。お問合せに際してお客さま
よりいただいた情報は、お客さまへの回答、弊社サービスの向上、弊社からのご連絡のために利用
させていただく場合があります。
29-0168-49 AC
5
71-3764-21

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