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Boyer Florence _ GEICO (Group d’Etude sur l’Inflammation Chronique et l’Obésité) / CMRG (CardioMetabolic Research Group)
Directeur : Pr Emmanuel Bourdon ; Co-directeur: Pr M.Faadiel Essop
Introduction
Objectifs et Méthodes
Traitement
Hyperglycémique
Traitement
Hyperglycémique
+ Allbumine
Glyquée (=AGE)
Cellules adipocytaires
Cellules cardiaques
Impact sur l’équilibre redox dans
ces modèles mimant les conditions
d’hyperglycémie du diabète
Souris Db/Db
(diabétiques)
Souris Db/+
(hétérozygote/
non diabétiques)
Voies métaboliques cellulaires altérées
dans ces modèles mimant les conditions
d’hyperglycémie du diabètes
Mesure d’activité
catalytique du protéasome
Mesure de l’activité
Caspase 3 (mort cellulaire)
Expression de 4-HNE (marqueur
de peroxydation lipidique)
Expression de certain marqueurs
de l’apoptose (Bad, Bcl2, pBad)
Mesure du taux d’Espèces
Réactives de l’Oxygène
Mesure du taux de protéines
modifiées par la voie des hexosamines
Mesure du taux de
protéines oxydées
Résultats
6h
24h
Bad (N=3)
pBad (N=2)
Figure 1: Glycémie a jeun chez les souris Db/Db. Augmentation de la glycémie chez
les souris Db/Db comparé au souris sauvages. *** p< 0,001 vs WT (one way ANOVA)
Figure 2: Poids du tissus adipeux épididymal (TAE) chez les
souris Db/Db. *** p< 0,001 vs Db/+ (one way ANOVA)
Bcl2 (N=2)
Figure 5: Expression de marqueurs de l’apoptose au niveau de cellules
cardiaque (H9C2) soumises à un stress oxydant. Détection par Western Blot.
LG: Low glucose ; CTL: contrôle; BSA: Albumine Sérique Bovine; GO: Albumine
normal; MGO: Albumine Glycquée; HG: High Glucose.
Figure 3: Mesure d’activité protéolytique du protéasome chez les souris Db/Db. LLVY:
Activité de type Chymotrypsine; LSTR: Activité de type trypsine; LLE: Activité de type
Caspase. *** p< 0,001 vs Db/+ (one way ANOVA)
Figure 4: Expression du 4-HNE (marqueur de péroxidation lipidique) au
niveau du TAE chez les souris Db/Db. Détection par Immunofluorescence.
Conclusion
Ces résultats montrent une augmentation significative de la glycémie chez les souris Db/Db ainsi qu’une augmentation de leur poids et plus précisément du poids du tissus adipeux épidydimal
(TAE). La suite des analyses a donc été effectuée sur le TAE. Les résultats obtenus sur le TAE semblent montrer une dérégulation au niveau de la balance d’oxydo-réduction avec d’une part une
augmentation de la péroxydation lipidique; et d’autre part une dérégulation des activités du protéasome. Cependant d’autres analyses sont nécessaires, notamment la mesure de l’expression
du protéasome ou la mesure du taux de protéines oxydées, pour compléter ces observations.
Par ailleurs, les premiers résultats obtenus sur les cellules cardiaque semblent montrer un effet des traitements hyperglycémiques ± Albumine glyquée sur l’expression de marqueurs proapoptotique (=mort cellulaire). Cependant d’autres analyses par d’autres méthodes sont nécessaires pour conforter ces résultats.
Une meilleure compréhension des phénomènes de type oxydatif dans les pathologies à fortes incidence, tel que le diabète, pourra permettre, à long terme, le développement de stratégies
thérapeutiques.
Les compétences: techniques scientifiques (culture cellulaire, Immunofluorescence, Ischémie-Reperfusion, ELISA…) ; encadrement de stagiaires; travail sur différents projets + dans un laboratoire
étranger; … Ces compétences me permettrons de travailler aussi bien en tant qu’enseignante-chercheur mais aussi en tant que chercheur dans un organisme privé tel qu’un laboratoire
pharmaceutique en France ou à l’étranger.

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