“Año de la Promoción de la Industria Responsable y Compromiso Climático” UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS ESCUELA DE POSGRADO UNIDAD DE POSGRADO DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA MAESTRIA EN BROMATOLOGIA CARACTERIZACIÓN DE HARINA EXTRUIDA DE LINAZA (Linum usitatissimum L.) Y LA EVALUACIÓN DE COMPUESTOS FENÓLICOS Y CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Tesis para optar al grado académico de Magíster en Bromatología LUIS ARTICA MALLQUI Asesor: Dr. Pablo Enrique Bonilla Rivera 2014 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA OBJETIVO GENERAL OBJETIVOS ESPECIFICOS ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACION BASES TEORICAS JUSTIFICACION PRESENTACION PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA La semilla de linaza se emplea como portadora de carbohidratos no asimilables o¿Cuáles fibra dietética, compuestos bioactivos, serán las características ácidos grasos poliinsaturados y químicas, contenido de fenoles antioxidantes. Sin embargo las diferentes totales y capacidad antioxidante de condiciones de proceso, pueden afectar la la harina extruida linaza? de sus concentración y de efectividad componentes. CONTENIDOS CONTENIDOS Evaluar las características químico proximal de la harina entera, desgrasada y extruida de linaza. Evaluar el contenido de fenoles totales de la harina entera, desgrasada y extruida de linaza. Evaluar la capacidad antioxidante de la harina, desgrasada y extruida de linaza mediante el método Ácido 2,2’–azinobis–(3–etilbenzotiazolín–6– sulfónico) ABTS. CONTENIDOS Daun et al., (2003) Tarpila et al., (2005) Wu, et al., (2007) • Evaluaron la estructura, composición y el desarrollo de variedades de semillas de lino • Estudiaron las propiedades funcionales de la semilla de linaza • Evaluaron los efectos de la extrusión en una mezcla de harina de maíz/linaza (0, 5, 10 y 15%) en función a variables de contenido de humedad (16, 18 y 20%), y la velocidad del tornillo (200, 300 y 400 rpm) KORUS et al., (2007) Frias et al., 2011 Ostojich y Sangronis( 2012) • Efecto de la extrusión en la composición fenólica y actividad antioxidante de frijoles secos de Phaseolus vulgaris L. • Evaluaron la calidad nutricional de crudo y extruido Pisum sativum L. semilla oleaginosa. • Caracterización de semillas de linaza (Linum usitatissimum L.) cultivadas en Venezuela CONTENIDOS QUIMICO PROXIMAL FENOLES HETERÓSIDOS CAPACIDAD CIANOGENÉTICOANTIOXIDANTE PROPIEDADES FUNCIONALES PROCESOS TECNOLOGICOS EXTRUSIÓN (Cocción/extrusión) ¿…..? PERFIL ACIDOS GRASOS RADICALES LIBRES • Alteran el buen funcionamiento de las células de nuestro organismo, atacando a componentes estructurales claves de las mismas FENOLES • Son metabolitos secundarios ampliamente distribuidos en el reino vegetal. Los fenoles están asociados al color, las características sensoriales(sabor, astringencia, dureza), las características nutritivas y las propiedades antioxidantes de los alimentos de origen vegetal. LINAZA • Es una semilla con potencial nutritivo y farmacológico debido a su contenido en metabolitos secundarios alguno de los cuales presentan propiedades antioxidantes (ayudan a prevenir enfermedades degenerativas, y reducen el riesgo de enfermedades cardiacas). CONTENIDOS Social PROYECTOS DEL PROGRAMA ALIADOS Tecnológica FORTALECIMIENTO DEL PROCESAMIENTO Y COMERCIALIZACIÓN DE LOS PRODUCTORES DE QUINUA, LINAZA Y KIWICHA, DE LA ASOCIACIÓN DE AGROPECUARIOS, PRODUCTORES AGROINDUSTRIALES HATUN AYLLU DEL VALLE DEL MANTARO, DISTRITO DE SINCOS, PROVINCIA JAUJA Y DEPARTAMENTO Junin Institucional LCC-FAIIA UNCP CONTENIDOS Teórico-Práctico METODOLOGIA Harina sin desgrasar y sin extruir (HLE) Harina desgrasada y sin extruir (HLD) SEMILLA DE LINAZA (Linum usitatissimum L.) Harina sin desgrasar extruida (HLEEx) Harina desgrasada y extruida (HLDEx) Harina sin desgrasar y sin extruir (HLE) CRUDO Harina desgrasada y sin extruir (HLD) PROCESADO POR EXTRUSION Harina sin desgrasar extruida (HLEEx) Extrusor de tornillo simple: Temperatura:90-130 Harina desgrasada y extruida (HLDEx) Velocidad de tornillo 250 rpm. Capacidad máxima de 40 kg/h. Diámetro del orificio del dado: 2 mm. Motor de transmisión trifásico 24 HP. Longitud total del tornillo: 400 mm. Análisis Químico Proximal Análisis de Heterósidos Cianogenéticos Evaluación de Fenoles totales Evaluación de Perfil de ácidos grasos Método AOAC(2008) Método Onwuka (2005) Método Reyes-Caudillo(2007) y Singlenton and Rossi(1965) Método AOAC (2008) Evaluación de Capacidad Antioxidante Método Pastrana-Bonilla et al., (2003) Re et al., (2009) Evaluación de Propiedades Funcionales Método Wicklund T, Magnus E. M. (1997) SEMILLA DE LINAZA LIMPIEZA SELECCIÓN CLASIFICACIÓN MOLIENDA GRUESA: Muestras de Gritz de linaza 2 mm de diámetro(Tamiz Nº 80) ACONDICIONAMIENTO DEL GRITZ DE LINAZA a UNA HUMEDAD DE 14%, refrigeración a 5°C x 24 horas. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Reino Plantae División Magnoliophyta Clase Magnoliopsida Sub clase Rosidae Orden Malpighiales Familia Linace Género Linum Especie Linum usitatissimum L. Componentes harina de linaza sin desgrasar y sin extruir(HLE)* harina de linaza desgrasada y sin extruir(HLD)* 65,48% 56,01% X ± desvstan harina de linaza sin desgrasar y extruida(HLEEx)* X ± desvstan X ± desvstan harina de linaza desgrasada y extruida(HLDEx)* X ± desvstan Humedad 7,33 a ± 0,54 7,82 a ± 0,17 2,53 c ± 0,06 3,44 b ± 0,08 Grasa 39,45 b ± 0,05 15,23 d ± 0,51 44,27 a ± 0,83 25,35 c ± 0,41 Proteína 19,52 b ± 0,02 28,33 a ± 0,79 20,38 b ± 0,68 26,81 a ± 0,70 Fibra 20,47 b ± 0,55 32,58 a ± 1,17 12,61 c ± 0,10 22,11 b ± 0,51 Ceniza 3,84 b ± 0,01 5,51 a ± 0,19 4,07 b ± 0,03 5,28 a ± 0,16 Carbohidratos 9,39 b ± 0,10 10,53 b ± 1,28 16,15 a ± 0,07 17,01 a ± 0,36 totales *Resultados de 3 repeticiones Tukey: Letras iguales en los resultados indican que son similares. X = promedio desvstan= desviación estándar Valls (1985) Daun et al.,(2003)(28%) Bautista y Barrón(2000)(6,21%) Epaminodas et al.,(2011)(22,6%) Composición químico proximal 50.00 44.27 g/100 g de muestra seca (%) 45.00 39.45 40.00 35.00 32.58 28.33 30.00 26.81 25.35 25.00 22.11 20.38 19.52 20.00 20.47 16.15 15.23 15.00 10.00 12.61 9.39 7.82 7.33 2.53 10.53 5.51 4.07 5.00 17.01 5.28 3.84 3.44 0.00 Humedad Grasa Entera Proteina Entera extruida 12,21% Fibra Cruda Desgrasada Ceniza Carbohidratos Desgrasad Extruida 66,44% Muestras HCN* CV % X ± desvstan harina sin desgrasar y sin extruir (HLE) 36,36 a ± 0,23 0,64 harina de linaza sin desgrasar y extruida(HLEEx) 1,21 b ± 0,13 10,58 (tasa= 96,67% ) *Resultados de 3 repeticiones X ± desvstan = promedio ± desviación estándar Yamashita et al., 2007 reportan 37,62 y 39,38 mg/100g en linaza venezolana y canadiense; Aubourg et al., 2006, reporta en variedades de semilla de linaza canadiense de 40 mg/100 Wu et al., 2007; tasa de eliminación de cianógenos de 93,23% mezcla maíz/linaza a un contenido de humedad de 12,5%) mg Acido Cianhidrico equivalente(HCN)/100 g m.s. Contenido ácido cianhidrico equivalente(HCN) 36,36 40.00 35.00 30.00 25.00 96,67% 20.00 15.00 10.00 1,21 5.00 0.00 Entera Extruida Muestras de harina harina X ± desvstan de linaza sin desgrasar y sin CV % 1258,32 a ± 34,04 2,71 1135,66 d ± 19,76 1,40 extruir (HLE) harina de linaza desgrasada y sin extruir(HLD) harina de linaza sin desgrasar y 963,93 b ± 14,13 1,51 y 1038,87 c ± 18,86 1,82 extruida(HLEEx) harina de linaza desgrasada extruida(HLDEx) Muñoz et al.,2010 reportan valores de 1172,06 y 1113,36 mgEAG/100g HLD semilla canadiense y en semilla venezolana valores de 1332,21 mgEAG/100g y Matuschek et al., 2006 reporta en semilla de linaza de 360 hasta 503 ppm en función a la Metodología de extracción por microondas. Brennan et al(2011) menciona que efecto se debe al tratamiento térmico que influye en la estabilidad en los componentes activos, debido a las fuerzas cizalla, a la exposición de los sitios activos producidos por la degradación térmica y a cambios en la reactividad química o formación de complejos insolubles con componentes de los alimentos. 24 – 26%( Fares et al., 2010; en copos de avena) 23,40% 8,52% Muestras de harina X ± desvstan CV % harina de linaza sin desgrasar y sin extruir(HLE) 343,25 a ± 12,99 3,78 harina de linaza desgrasada y sin extruir(HLD) 328,51 c ± 27,66 8,42 harina de linaza sin desgrasar y extruida(HLEEx) 262,47 ba ± 8,52 3,25 harina de linaza desgrasada y extruida(HLDEx) 286,28 bc ± 5,47 1,91 Heiras et al., 2013; indica que la capacidad antioxidante depende del tipo de cultivar Y no debido al proceso de extrusión. Llo et al., 2000, encontró un incremento de garbanzos extruidos de 9,9 12,2% en la capacidad antioxidante. Singleton , 1999, menciona que los cambios en las sustancias antioxidantes ocurren durante la Cocción-extrusión por que la temperatura favorece la degradación de los antioxidantes presentes; mientras otros antioxidantes son formados durante la cocción-extrusión debido a la reacción de Maillard en presencia de azucares reductores por lo que debe seleccionarse una T°C adecuada.. 23,53% 12,85% Ácidos Grasos antes de la extrusión promedio desvs después de la extrusión %b desvst promedio desvst %b desvst t Ácido 43,68 a ±2,49 8,10 ±0,42 28,71 b ±2,31 6,50 ±0,52 20,79 a ±1,67 4,04 ±0,34 16,69 a ±2,53 3,87 ±0,60 130,05 a ±3,49 23,88 ±0,90 109,16 a ±3,87 25,46 ±0,90 102,05 a ±4,42 18,03 ±1,07 73,49 a ±3,03 17,05 ±0,70 253,25 a ±6,89 45,95 ±1,25 206,25 a ±0,84 47,12 ±0,19 esteárico Ácido palmítico Ácido oleico Ácido linoleico Ácido linolénico *Resultados de 3 repeticiones a mg de acido graso por gramo de muestra (base seca b % del perfil de ácidos grasos totales desvst= desviación estándar Contenido de ácidos grasos 50.00 47.12 45.95 Porcentaje de Ácidos Grasos 45.00 40.00 35.00 30.00 25.46 23.88 25.00 18.03 20.00 17.05 15.00 10.00 5.00 8.10 6.50 4.04 3.87 0.00 Ac. Estearico Ac. Palmitico Entera Ac. Oleico Extruida Ac. Linoleico Ac. Linolenico Propiedades funcionales harinas extruidas harina sin desgrasar y sin harina sin desgrasar y extruir (HLE) extruida(HLEEx) promedio desvst promedio desvst Índice de solubilidad (%) 3,487 b ± 0,182 5,440 a ± 0,243 Índice de absorción(g/g) 2,760 b ± 0,080 4,363 a ± 0,087 Índice de expansión 0,185 b ± 0,007 0,297 a ± 0,021 Densidad aparente (g/mL) 2,367 b ± 0,047 3,460 a ± 0,070 *Resultados de 3 repeticiones X ± desvstan = promedio ± desviación estándar Propiedades funcionales de la harina extruida 6 5.44 5 4.36 4 3.48 3 3.46 Harina Entera 2.76 2.36 2 1 0.297 0.185 0 Indice de solubilidad de agua (%) Indice de Absorción de agua(g/g) Densidad Aparente (g/mL) Indice de Expansión Harina entera extruida Las harinas de linaza sin desgrasar y sin extruir(HLE), y harina de linaza sin desgrasar y extruida (HLEEx) reduce la humedad en 65,48% y harina de linaza desgrasada y sin extruir(HLD) y harina de linaza desgrasada y extruida (HLDEX), reducen la humedad en 56,01%; la harina HLE incrementa en 4,40% y la HLD reduce en 5,36% en proteínas después de la extrusión; la grasa se incrementó en HLE en 12,21% y en HLD incremento en 66,44% ; mientras la fibra y cenizas no son afectados significativamente y existe un aumento en HLE de 71,99% y en HLD en 61,53% en carbohidratos totales después de la extrusión y la destrucción de heterósidos cianogenéticos fue de 96,67% en HLE. El proceso de extrusión produce la pérdida de estabilidad en el contenido de fenoles totales en las muestras HLE y HLEEx de 23,40% y en HLD y HLDEx de 8,52%. La actividad antioxidante de la harina de linaza sin desgrasar y sin extruir (HLE) es afectada por el proceso de extrusión en 23,53%, y en harina de linaza desgrasada y sin extruir (HLD) en 12,85%. En el perfil de ácidos grasos, el ácido esteárico, palmítico, linoleico se reducen después de la extrusión en 19,75%; 4,21%; y 5,43% respectivamente; mientras que el ácido oleico y linolénico ligeramente aumentan después de la extrusión en 6,61% y 2,54%; de igual forma el índice de solubilidad, índice de absorción, índice de expansión y densidad aparente experimentan un incremento después de la extrusión en 56,00%; 58,07%; 60,54% y 46,17% del valor original respectivamente. Muchas Gracias FOTOS Extracción etapa 1 Extracción etapa 2
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