Sciences, Technologies et Développement, Volume 15, pp60-65, Février 2014 Sciences, Technologies & Développement, ISSN 1029 - 2225 http://www.univ-douala.com/sdt/ E-mail : [email protected] ISSN 1029 - 2225 Evaluation de l’activite antidiabetique des extraits de feuilles de Gnetum africanum et Gnetum bulchozzianum (Gnétacées) 1* Mathieu Ndomou , Patricia Kammegne Djidjou1, Moise Ntah Ayong1, Inocent Gouado1, Clergé Tchiegang2 1Laboratoire de Biochimie, Faculté des sciences, Université de Douala. de Biochimie et Technologie Alimentaire, ENSAI - Université de Ngaoundéré Révisé : Septembre 2013 Accepté: Decembre 2013 Mise en ligne : Février 2014 2Laboratoire Reçu : Mai 2013 Résumé Selon les statistiques de l’OMS, le diabète est un problème grave de santé publique. La pharmacopée traditionnelle africaine offre une alternative aux antidiabétiques de synthèse. L’objectif de cette étude est d’évaluer sur des rats, l’activité antihyperglycémique des extraits au méthanol, à l’hexane et à l’acétate d’éthyle des feuilles de Gnetum africanum et Gnetum buchholzianum. Des feuilles de ces deux plantes ont été récoltées, séchées, broyées et soumises à des extractions successives dans du méthanol, l’hexane et l’acétate d’éthyle. Après le screening chimique, les extraits (180mg/Kg, per os) ont été administrés à des rats whistar albinos normoglycémiques ou rendus diabétiques par administration sous cutanée de la streptozotocine à la dose de 55 mg/kg de poids corporel. Les résultats ont montré que l’extrait au méthanol des feuilles G. buccholzianum renferme le plus grand nombre de composés: tanins, flavonoïdes, saponines, glycosides cardiaques et stéroïdes. Au bout de 2 heures, la glycémie de base passe significativement (P<0,05) de 0,98 ± 0,02 à 0,46 ± 0,17g/L pour les extraits au méthanol de G. buchholzianum et de 1,27 ± 0,14 à 0,32 ± 0,03 pour l’extrait à l’acétate d’éthyle de G. africanum soit des taux de réduction respectives de 53,06% et 74, 80%. Cette diminution n’est que de 18,75% pour le médicament de référence, la Glibenclamide. Ces résultats sont confirmés chez les rats soumis à une hyperglycémie constante par traitement à la streptozotocine qui présentent des diminutions significatives (P<0,05) de la glycémie après 7 jours de traitement à l’extrait au méthanol et à l’acétate d’éthyle des deux espèces respectives. Les extraits au méthanol des feuilles de Gnetum buchholzianum et à l’acétate d’éthyle des feuilles de Gnetum africanum ont des effets qui rappellent ceux de certains insulinosecréteurs. Ces deux espèces végétales pourraient être utilisées dans les traitements hypoglycémiants. ISSN 1029–2225©2014 Sciences, Technologies et Développement os Mots clés : Gnetum spp, diabète, glycémie. Abstract According to WHO statistics diabetes stands as a serious public health problem. African traditional pharmacopoeia offers alternative to synthetic antidiabetic. This study aimed to evaluate in rats antihyperglycemic activity of methanol, hexane and ethyl acetate extracts from leaves of Gnetum africanum and Gnetum buchholzianum. Leaves of the two plants were harvested, dried, ground and subjected to successive extractions with methanol, hexane and ethyl acetate. After chemical screening, extracts (180mg/Kg per os) were administered to normoglycemic albinos Whistar rats and in rats made diabetic by subcutaneous administration of streptozotocin at 55 mg / kg body weight. Results showed that methanol extract of leaves of G. buccholzianum contained the largest number of compounds namely tannins, flavonoids, saponins, cardiac glycosides and steroids. Two hours after treatment, basic blood glucose changed significantly (P < 0.05) from 0.98 ± 0.02 to 0.46 ± 0.17 g / L for methanol extracts of G. buchholzianum and from 1.27 ± 0.14 to 0.32 ± 0.03 for ethyl acetate extract of G. africanum. Reduction rates were respectively 53.06% and 74.80 %. This rate was only 18.75% for the reference medicinal drug glibenclamide. These results were confirmed in rats subjected to a constant hyperglycemia by streptozotocin treatment which exhibit significant (P < 0.05) decrease in blood glucose after 7 days treatment with methanol extract and acetate ethyl extract from the two species. Methanol extract of Gnetum buchholzianum leaves and ethyl acetate extract of Gnetum africanum leaves may have effects that are reminiscent of some insulin-secretors. The two species may be used in hypoglycemic therapies. ISSN 1029–2225©2014 Sciences, Technologies et Développement os Key words: Gnetum spp, diabetes, glycemia. 1. Introduction 7Le diabète est un trouble métabolique dû à une insuffisance ou une mauvaise utilisation de l’insuline caractérisée par une glycémie à jeun supérieure à 1,26g/L vérifiée à deux reprises (Afssaps, 2006). Cette affection touche de plus en plus de personnes dans le monde et est aujourd’hui un véritable problème de santé publique. En effet, l’OMS souligne une incidence mondiale progressive du diabète. De 30 millions de diabétiques répertoriés en 1985, les chiffres sont respectivement passés à 135 millions en 1995, 177millions en 2000 et 347 millions en 2011. On estime que d’ici 2030, Auteur correspondant : [email protected] 438 millions d’individus en seront atteints (Danaei et al. 2011). En fonction de son étiologie, on distingue le diabète sucré de type 1 résultant d’une destruction sélective et auto-immune des cellules β du pancréas, le diabète sucré de type 2 caractérisé par une résistance à l’insuline ou un défaut de sécrétion de cette hormone. Il existe d’autres types spécifiques de diabète comme le diabète gestationnel dont la fréquence d’apparition est faible (Spinas et Lehman, 2001). La prise en charge thérapeutique du diabète repose actuellement sur des régimes alimentaires stricts et la prise d’antidiabétique oraux. Cette solution est évidemment couteuse à l’échelle individuelle compte tenu du faible pouvoir d’achat dans la plupart des pays en voie de 60 Ndoumou et al., Sciences, Technologies et Développement (Février 2014), Volume 15, 60-65 Sciences, Technologies & Développement, ISSN 1029 - 2225 développement comme le Cameroun. La pharmacopée traditionnelle offre une solution à la portée de toutes les bourses. C’est ainsi que des extraits de certaines plantes ont été testés pour leur activité antidiabétique (Fézan et al. 2008 ; Kazemi et al. 2011 ; Soulimani, 2009). Certains tradipraticiens Congolais prescrivent aux diabétiques de la poudre à base de feuilles des plantes du genre Gnetum(Gnétacées). Aucune précision n’est disponible sur le type de diabète mais cette médication a montré une certaine efficacité dans la réduction des crises causées par une élévation du taux sanguin de sucre (Aloumba, 2007). La famille des Gnétacées est en effet représentée en Afrique par Gnetum africanum et Gnetum buchholzianum. Ce sont des espèces lianescentes qui poussent de manière spontanée dans le sous bois des forêts tropicales humides. Elles sont largement utilisées comme légumes et constituent une source très appréciable de protéines, d’acides aminés essentiels et de sels minéraux (Mialoundama, 2007). Bien que la médecine traditionnelle africaine ait fait état de quelques usages thérapeutiques de Gnetum africanum (Aloumba, 2007), il n’y a aucune évidence scientifique thérapeutique claire de cette plante encore moins des conditions d’extraction de ses substances bioactives. Il est nécessaire de préparer des extraits de ces plantes et de tester leurs effets biologiques respectifs à des fins pharmaceutiques. Dans cette étude, nous avons préparé des extraits au méthanol, à l’acétate d’éthyle et à l’hexane des feuilles de Gnetum africanum et de Gnetum buchholzianum et avons évalué l’effet de ces extraits sur la réduction de l’hyperglycémie provoquée sur des rats. 2. Matériels et méthodes 2.1. Matériel végétal Les feuilles fraîches de G. africanum et G. buchholzianum ont été cueillies au mois de janvier 2011 dans le jardin botanique de la ville de Limbé et dans des parcelles de domestication du CENDEP (Centre for Nursing Development and Eru Propagation) de la même ville. Après la cueillette, les feuilles ont été lavées à l’eau de robinet et séchées à l’ombre pendant un mois. Elles ont ensuite été broyées à l’aide d’un pulvérisateur de type Brabender puis soumises à une extraction dans des solvants appropriés. 2.2. Préparation des extraits 2.2.1. Extraction au méthanol 500 g de poudre de feuilles de chaque espèce ont été macérés séparément dans un ballon contenant 2 litres de méthanol pur durant 48 heures. Le mélange a été ensuite filtré et le résidu repris deux fois dans 1L du même solvant. Tous les filtrats ont été recueillis dans un même récipient et concentré dans un évaporateur rotatif. L’extrait obtenu a été séché pendant deux jours à l’étuve à 37°C. 2.2.2. Extraction à l’hexane Pour chaque espèce de plante, 100g d’extrait au méthanol sec ont été fixés dans 100g de silice contenus dans une colonne chromatographique (dimension 13,5x9.6cm). Après élution au moyen de 500 mL d’hexane pur, l’éluât récupéré a été concentré à l’évaporateur rotatif et séché dans une étuve à 37°C pendant deux jours. 2.2.3. Extraction à l’acétate d’éthyle L’extraction a été réalisée avec le même dispositif que dans le cas précédent. Toutefois, l’hexane est remplacé par 500 mL d’acétate d’éthyle pur. 2.3. Screening chimique des extraits de Gnetum spp. 2.3.1. Recherche des tanins 2 à 3 gouttes de FeCl3 2% ont été ajoutées à 2 mL d’extrait de feuilles à 27 mg/mL. Il apparaît au bout de quelques minutes une coloration bleue-noire et un précipité caractéristique des tanins (Karumi et al. 2004). 2.3.2. Recherche des saponosides On mélange 5 mL d’extrait avec 10 mL d’eau distillée pendant 2 min. L’apparition d’une mousse persistante après 15 minutes confirme la présence des saponosides (Karumi et al.2004). 2.3.3. Recherche des flavonoides 5mL d’extrait ont été traitées avec quelques gouttes de HCl concentré. On y introduit une petite quantité de tournures de magnésium et on laisse réagir. L’apparition d’une couleur rouge ou orange caractérise la présence des flavones aglycones (karumi et al. 2004). 2.3.4. Recherche des alcaloïdes Au résidu obtenu par évaporation de 25ml d’extrait on ajoute 5ml HCl 2N et l’ensemble est mis à chauffer dans un bain marie. Le mélange est filtré à l’aide d’un papier filtre et testé avec le réactif de Mayer. La présence des alcaloïdes est caractérisée par l’apparition d’une turbidité ou d’un précipité blanc (Brunetton, 1999). 2.3.5. Recherche d’anthraquinones On fait bouillir pendant 10 minutes 1g d’extrait en présence de 10mL de KOH 0,5N et 1mL de H2O2 5%. Après refroidissement, le mélange a été filtré et acidifié à l’aide de l’acide acétique. Après une extraction dans 10mL de benzène, l’extrait benzénique a été agité dans 5mL de NaOH 10%. La coloration rouge obtenu au niveau de la couche alcaline est caractéristique de la présence des anthraquinones (Brunetton, 1999). 2.3.6. Recherche des glycosides cardiaques Leur extraction s’est faite selon le test de Keller-killini : 0,4N d’acide acétique est mélangé à quelques gouttes de FeCl3 et 0,5 mL d’acide sulfurique concentré. En cas réaction positive, il apparaît une coloration bleue. 61 Ndoumou et al., Sciences, Technologies et Développement (Février 2014), Volume 15, 60-65 Sciences, Technologies & Développement, ISSN 1029 - 2225 2.3.7. Recherche des stérols et triterpènes On dissous 0,5g d’extrait dans 0,5mL de chloroforme. On ajoute 0,5mL d’anhydre acétique et quelques gouttes d’acide sulfurique fumant. Un changement de coloration de violet à bleue est caractéristique des stérols ou des triterpènes lorsque ce changement se fait du violet au vert est (Bruneton, 1999). 2.4. Expérimentation animale Des rats males albinos de souche wistar âgés de 90 jours et de poids compris entre 150 et 180g ont été choisis pour les tests animaux. Etaient exclus de l’étude les femelles gravides ou allaitantes. Ces rats ont été élevés dans même conditions dans l’animalerie du Centre Hospitalier et Universitaire (CHU) de Yaoundé, en aération suffisante et à température ambiante. Ils ont été répartis dans des cages tapissées de copeaux de bois où ils avaient libre accès à l’eau et à la nourriture dans un environnement d’élevage où ils sont alternativement soumis à 12h de lumière et 12h d’obscurité. Durant la période d’acclimatation qui a duré 20 jours, les rats ont été nourris d’un aliment dont la composition donnée dans le tableau 1 est une modification du modèle standard AIN93G (Lien et al. 2001) avec notamment un complément de 50 g/Kg de protéines du poisson Ethmalosa sp. Tableau 1. Composition de l’alimentation des rats (Lien et al. 2001). Ingrédients Quantité (g/kg) Caséine 150 Farine de maïs 397,5 L-Cystéine 3 Cellulose 50 Saccharose 100 Maltose 132 Mélange de sels minéraux 35 Mélange de vitamines 10 Choline bitartrate 2,5 Huile de soja 70 Farine de poisson (Ethmalosa sp) 50 Pour chacune des deux espèces de Gnetum spp, cinq lots de 4 rats chacun ont été constitués après une période d’acclimatation qui avait duré cinq jours. Ils ont été soumis à 12h de jeûne. Afin de déterminer la glycémie de base (G0) de chaque rat, du sang a été prélevé sous fluorure de sodium au niveau de la veine caudale à l’aide d’une seringue à insuline de 1mL. Après centrifugation, le plasma a été recueilli et soumis au dosage du glucose par la méthode enzymatique à la glucose oxydase (kit Biosystème; HB009, Laboratoire Cypress Diagnostics- Belgique). Les rats des lots 1, 2, 3, 4 et 5 ont respectivement été traités per os avec du tween 10% (10mL/kg), le médicament de référence : le glibenclamide (0,3mg/kg) en solution dans du tween 10%, l’extrait méthanoïque (180 mg/kg), l’extrait hexanique (180mg/kg) et l’extrait à l’acétate d’éthyle (180 mg/kg), tous en solution dans du tween 10%. Après administration des produits, un prélèvement sanguin a été fait après 2 h, puis 4h. Le sérum a été séparé par centrifugation à 3000 rpm pendant 5 minutes et le glucose dosé dans chaque échantillon. Une hyperglycémie permanente a été induite chez des rats après administration sous-cutanée d’une dose unique de streptozotocine (55mg/kg) en solution dans du tampon citrate 0,1 M pH 4,5. 72 heures après, les rats ont présenté une hyperglycémie franche et permanente entre 1,58 et 2,38 g/L. Ils ont ensuite été traités par une solution de tween 10% (10mL/kg/j), le glibenclamide (0,3mg/kg/j), l’extrait à l’acétate d’éthyle de G. africanum (180 mg/kg/r) et l’extrait méthanolique de G. buccholzianum (180 mg/kg/j) dans du tween à10% pendant 7 jours suivant les groupes précités. Ces deux extraits ont été choisis en raison de leur efficacité à réduire la glycémie. Des prélèvements sanguins ont été effectués au J0 ( jour de traitement) puis tous les deux jours jusqu’au 7ème. 2.5. Expression des résultats et analyse statistique Les valeurs de la glycémie sont exprimées sous la forme moyenne ± erreur standard à la moyenne. L’analyse de la variance (ANOVA) suivie du test de Dunn applicable aux comparaisons multiples des données ont été utilisés pour les analyses statistiques à l’aide du logiciel SPSS version 16.0. La variation de glycémie était considérée significative au seuil de P<0,05. 3. Résultats Dans le tableau 2 sont consignés les résultats du screening chimique des extraits de Gnetum spp. Les deux espèces de Gnetum possèdent en commun les tanins, les flavonoïdes, les saponines et les glycosides cardiaques tous retrouvés dans les extraits au méthanol. L’extrait à l’acétate d’éthyle de G. buchholzianum contient les glucosides cardiaques et celui de G.africanum, les flavonoïdes. Les deux espèces sont dépourvues d’alcaloïdes et d’anthraquinones mais contiennent des stéroïdes dans toutes les fractions étudiées. Les résultats du tableau 3 montrent, en ce qui concerne les feuilles de Gnetum buccholzianum, une baisse progressive de la glycémie de base au bout de quatre heures dans le groupe de rats traités au Glibenclamide, le groupe traité au méthanol, le groupe traité à hexane et le groupe traité à l’acétate d’éthyle. Seul l’extrait au méthanol a eu l’effet hypoglycémique le plus significatif (P=0,03) sur la glycémie de base de chaque rat ce qui a justifié le choix de cet extrait pour les tests de réduction de l’hyperglycémie provoquée. En effet suite à l’administration de l’extrait au méthanol, la glycémie de base de ce groupe de rats traités baisse de 53,06 % au bout des 2 premières heures puis de 17,34% entre la deuxième et la quatrième heure après administration de l’extrait. 62 Ndoumou et al., Sciences, Technologies et Développement (Février 2014), Volume 15, 60-65 Sciences, Technologies & Développement, ISSN 1029 - 2225 Tableau 2. Screening chimique des extraits de feuilles de G. africanum et G. buccolzianum. Extrait Tanins Flavonoïdes Alcaloïdes Anthraquinones Saponines Glycosides cardiaques Stéroïdes Méthanolique + + - - + + + - - - - - + + Héxanique - - - - - - + Méthanolique + + - - + + + Gnetum Acétate - + - - - - + Africanum d'éthyle - - - - - - + Gnetum Buchholzianum Acétate d'éthyle Héxanique + : Présence - : Absence Tableau 3. Evolution de la valeur moyenne de la glycémie des rats en fonction du traitement aux extraits de feuilles de G. buccholzianum. Témoin Gbc. (0,3mg/kg) Extrait au méthanol Extrait à l’hexane. Extrait à l’acétate d’éthyle Glycémie à jeun 0,94 ± 0,13a 0,96 ± 0,27 b 0,98 ± 0,02 a 0,68 ± 0,12 a 0,84 ± 0,20 a Glycémie 2 heures après 0,81 ± 0,08 a 0,78 ± 0,02 b 0,46±0,17 b 0,41 ± 0,06 b 0,47 ± 0,13 b % de réduction -13,82 -18,75 -53,06 -39,70 -44,04 Glycémie 4 heures après 0,73 ± 0,11 a 0,64 ± 0,11 b 0,81 ± 0,03 c 0,40 ± 0,09 b 0,43 ± 0,12 b % de réduction -22,34 -33,33 -17,34 -41,10 -48,80 Gbc : Glibenclamide. Les valeurs de la glycémie portées sur la même ligne et affectées de la même lettre en exposant ne sont pas statistiquement significatives au seuil de 5%. N= 2 répétitions. Tableau 4. Evolution de la valeur moyenne de la glycémie des rats en fonction du traitement aux extraits de feuilles de G. africanum. Témoin Gbc. (0,3mg/kg) Extrait au méthanol. Extrait à l’hexane. Extrait à l’acétate d’éthyle. Glycémie à jeun 0,94 ± 0,13 a 0,96 ± 0,27 a 0,79 ± 0,36 a 0,94 ± 0,12 a 1,27 ± 0,14 a Glycémie 2 heures après 0,81 ± 0,08 a 0,78 ± 0,02 b 0,27±0,02 b 0,52 ± 0,09 b 0,32 ± 0,03 b % de réduction -13,82% -18,75% -65,82% -44,68% -74,80% Glycémie 4 heures après 0,73 ± 0,11 a 0,64 ± 0,11 b 0,31 ± 0,03 b 0,42 ± 0,09c 0,25 ± 0,05c % de réduction -22,34% -33,33% -60,76% -55,31% -80,31% Gbc : Glibenclamide. Les valeurs de la glycémie portées sur la même ligne et affectées de la même lettre en exposant ne sont pas statistiquement significatives au seuil de 5%. N= 2 répétitions. Tableau 5. Variation en fonction du temps du taux moyen de sucre sanguin des rats rendus hyperglycémiés. Temps (jours) Temoin Glibenclamide (0,3mg/kg) Extrait au méthanol Extrait à l’acétate d’éthyle 0 1,58±0,09a 1,90±0,23 a 2,38±0,70 a 2,33±0,47 a 1 1,23±0,03 b 1,37±0,37 b 0,74±0,61 b 0,69±0,34 b 3 1,26±0,22 b 0,78±0,28 c 0,47±0,34 c 1,11±0,36 c 5 1,35±0,2 c 0,61±0,4 c 0,65±0,04 d 0,76±0,01 d 7 1,23±0,005 b 0,70±0,19 c 0,46±0,42 e 0,39±0,70 e -L’extrait au méthanol provient des feuilles de G. buccholzianum et celui à l’acétate d’éthyle de G. africanum -Les valeurs de la glycémie portées sur la même ligne et affectées de lettres différentes en exposant sont statistiquement significatives au seuil de 5%. N= 2 répétitions Dans le cas de G. africanum (tableau 4), les extraits à l’hexane (P=0,0204) et à l’acétate d’éthyle (P=0,0194) ont eu un effet hypoglycémique significatif. En effet l’administration de l’extrait à l’hexane entraine une baisse de 44,68% au terme des 2 premières heures suivant le traitement. Cette réduction s’élève à 74,80% pour l’extrait à l’acétate d’éthyle au bout des 2 premières heures et de 80,31% les 2 heures suivantes. L’effet hypoglycémiant de l’extrait à l’acétate d’éthyle étant plus significatif parmi les extraits de feuilles de G. africanum, cet extrait a été retenu dans les tests de réduction de l’hyperglycémie provoquée. 63 Ndoumou et al., Sciences, Technologies et Développement (Février 2014), Volume 15, 60-65 Sciences, Technologies & Développement, ISSN 1029 - 2225 Le tableau 5 donne les variations de la glycémie des rats soumis à une hyperglycémie permanente après administration sous-cutanée d’une dose unique de solution de streptozotocine (55mg/kg) et ayant reçu les extraits retenus pour cette expérience, Il ressort que la baisse de la glycémie aussi obtenue avec le glibenclamide (0,3mg/kg) est plus régulière et significative (P< 0,05) lorsque les rats hyperglycémiés sont traités avec les extraits au méthanol et à l’acétate d’éthyle respectivement de G. buccholzianum et de G. africanum. Au bout de 7 jours, la glycémie des rats traités par l’extrait au méthanol est passée de 2,38±0,70 g/L à 0,46±0,42g/L et celui de l’extrait à l’acétate d’éthyle, de 2,33±0,47 à 0,39±0,70g/L. Dans le même temps, les valeurs obtenues avec l’hypoglycémiant de référence sont passées de 1,90±0,23 à 0,70±0,19g/L. 4. Discussion Une activité antidiabétique plus significative a été obtenue pour l’extrait au méthanol des feuilles de G. buccholzianum et l’extrait à l’acétate d’éthyle de G. africanum administré à la dose 180mg/kg de poids corporel chez des rats mâles albinos. La réponse des rats aux extraits des plantes à potentiel antidiabétique est en effet significative dans l’intervalle 100 à 1500 mg/kg de poids corporel et la réponse au traitement hypoglycémiant est généralement observée entre 1 et 7 heures suivant le traitement (Samba et al. 2007). Ces différents extraits ont provoqué une baisse de la glycémie de base de manière drastique au bout des deux premières heures mais on observe un effet de ralentissement au delà de la deuxième heure comparativement au médicament de référence, le glibenclamide. L’effet des extraits sur la réduction de la glycémie de base au bout de deux heures après le traitement est de 2,82 ; 3,98 et 2,38 fois plus important que celui du glibenclamide respectivement pour les extraits au méthanol de G. buccholzianum, les extraits à l’acétate d’éthyle et à l’hexane de G. africanum. La streptozotocine a été utilisée pour provoquer une hyperglycémie permanente chez les rats. Injectée à l’animal, cette substance pénètre dans les cellules pancréatiques à travers un transporteur de glucose et détruit massivement les cellules béta des ilôts de Langerhans avec formation de radicaux libres qui transforment l’ADN. (Akbarzadeh et al. 2007). A la dose de 55 mg/Kg, cette drogue n’entraine néanmoins qu’une destruction partielle des cellules β (Ford et al., 1999). Nous avons constaté que le glibenclamide, l’extrait au méthanol de G. buccholzianum et l’extrait à l’acétate d’éthyle de G. africanum provoquent une baisse significative (P<0,05) de la glycémie. L’effet de ces deux extraits sur la réduction de la glycémie est supérieur à celui du glibenclamide. Mais au bout de 7 jours la différence n’est pas significative (P˃0,05) entre le taux de réduction dû à l’extrait au méthanol de G. buccholzianum (80,67%) et celui dû à l’extrait à l’acétate d’éthyle de G.africanum (83,26%). Le screening chimique (tableau 2) a montré que l’extrait au méthanol de G. buccholzianum contient des tanins, des flavonoïdes, des saponines, des glycosides cardiaques et des stérols tandis que l’extrait à l’acétate d’éthyle de G. africanum contient uniquement des flavonoïdes et des stérols. L’effet de l’extrait à l’acétate d’éthyle de G. africanum sur la réduction de la glycémie des rats soumis à une hyperglycémie permanente pourrait être lié à la présence des flavonoïdes comme il a été souligné par certains auteurs (N’Diaye et al. 2008 ; Olagbende-Dada et al. 2011). Les flavonoïdes agissent en effet en améliorant la sensibilité des cellules de l’organisme à l’insuline, ce qui permet de réduire l’incidence du diabète de type 2 (Lean et al. 1999 ; Ford et al. 1999). Dans les extraits de G. buccholzianum, en plus des flavonoïdes, on a noté la présence des tanins, des glycosides cardiaques et des saponines. Kambouché et al. (2009) ont montré l’effet antihyperglycémiant des saponines. De plus, les glycosides cardiaques inhibent la pompe à sodium Na+/K+ATPase qui intervient dans la sécrétion d’insuline (Rodgers et Knox, 2001). L’effet serait comparable au mécanisme d’action des sulfamides hypoglycémiants. Les sulfamides hypoglycémiants se lient à un récepteur spécifique, sur la membrane des Cellules β pancréatiques au voisinage du canal potassique ATP dépendant et provoquent la fermeture de ce dernier. Ceci va entrainer une dépolarisation membranaire des cellules β avec ouverture des canaux calciques voltage dépendant et un influx de Ca2+ déclenchant ainsi par exocytose l’extrusion des granules de sécrétion d’insuline (Grimaldi et al.2009). Il serait difficile de rapprocher le mode d’action des extraits au méthanol à celui du glibenclamide à cause du mélange de composés pouvant interférer ou avoir une action synergique dans ces extraits. Cette synergie ou cette interférence pourrait expliquer la différence d’action de l’extrait au méthanol des feuilles de G. buccholzianum par rapport à celui de l’extrait à l’acétate d’éthyle des feuilles de G. africanum. 5. Conclusion Les extraits au méthanol des feuilles de Gnetum buchholzianum et à l’acétate d’éthyle des feuilles de Gnetum africanum réduisent significativement le taux de glucose sanguin des rats normaux et des rats soumis à une hyperglycémie permanente par traitement à la streptozotocine. Cette action serait liée à leur composition chimique caractérisée par la présence des flavanoïdes, des saponines et des glucosides cardiaques. L’effet de ces extraits rappelle celui de certains insulinosecréteurs. Sous réserve d’analyses poussées, ces deux espèces végétales pourraient être utilisées dans les traitements hypoglycémiants. 64 Ndoumou et al., Sciences, Technologies et Développement (Février 2014), Volume 15, 60-65 Sciences, Technologies & Développement, ISSN 1029 - 2225 Remerciements Les auteurs tiennent à remercier le Responsable du jardin botanique de Limbé et les chercheurs du CENDEP qui ont facilité l’échantillonnage; le Laboratoire de Biochimie de la Faculté des Sciences de l’Université de Douala où a été fait l’essentiel de l’analyse. References William, P.F. Goodwin, B.L. & Ralser, S. 1994. Ductile deformation processes. Continental deformation. Ed. Paul L. Hancock, Univ. Bristol, UK., Pergamon Press, 1-27. Afssaps-Has, 2006.Traitement Médicamenteux Du Diabète De Type 2- Recommandation De Bonne Pratique. Akbarzadeh A., Norouzian D., Mehrabim. R., Jamshidi Sh., Farhangi A., Allah Verdi A., Mofidiant S.M.A., Lame Rad B., 2007. Induction of diabetes by streptozotocin in rats. Indian Journal of Clinical Biochemistry .22 (2): 60-64. Aloumba A., 2007. Approche anthropo-psychologique des usages thérapeutiques et “médico-magiques » du genre Gnetum. In Mialoundama F. Le koko ou mfumbu (Gnétacées). Une plante alimentaire d’Afrique centrale. L’Harmattan. 187 – 211. Brunetton J., 1999. Pharmacognosie, Phytochimie, Plantes Médicinales, 3e Ed : 319, 680, 791-793 Danaei G, Finucane MM, Lu Y, Singh GM, Cowan MJ, Paciorek. 2011. National, regional, and global trends in fasting plasma glucose and diabetes prevalence since 1980: systematic analysis of health examination surveys and epidemiological studies with 370 country-years and 2.7 million participants. Lancet, 378(9785):31–40. Fézan H. Tra Bi, Irié G.M., Kohué C.C. N’Gaman, Mohou C. H.B., 2008. Études de quelques plantes thérapeutiques utilisées dans le traitement de l’hypertension artérielle et du diabète : deux maladies émergentes en Côte d’Ivoire. Sciences & Nature 5(1) : 39 – 48. Ford Es, Will Jc, Bowman Ba, Narayan Km. 1999. Diabetes mellitus and serum carotenoids: findings from the third national health and nutrition examination survey. American Journal Epidemiology 149:168-176. Grimaldi A, Hartemann-Heurtier A, Jacqueminet S, Bosquet F, Masseboeuf N, Halbran M, Sachon C. (2009). Guide Du Diabète 4e Ed, Masson. Kambouche N., Merah B., Derdour A., Bellahouel S., Bouayed J., Dicko A., Younos C., 10-Karumi Y., Onyeyili Pa. Ogugbuaja Vo. (2004). Identification Of Active Principles Of M. Balsamina (Balsam Apple) Leaf Extract. J. Med. Sci. 4 (3): 179-182. Kazemi S., Sedigheh A, Moshtaghian J, Rafieian M. Azadeh A. Shamsi F. 2011. Liver-Protective Effects of Hydroalcoholic Extract of Allium Hirtifolium Boiss. in Rats with Alloxan-Induced Diabetes Mellitus. ARYA Atheroscler. 6(1): 11–15. Lean Me., Moroozu M., Kelly I., Burns J., Taluar D., Sattar N., Crozier A. (1999). Dietary flavonols protect diabetic human lymphocytes against oxidative damage to DNA. Diabetes 48:176-181. Lien E.L., Boyle F.G., Wrenn J.M., Perry R.W., Thompson C.A., Borzelleca J.F. 2001. Comparison of AIN-76 and AIN-93G diets: a 13- weeks study in rats. Food and Chemical Technology. 39. 385-392. Medjdoub H., Etude Phytochimique Et Activités Biologiques De Zygophyllum geslini coss. 2006. Magister. Université De Tlemcen. Mialoundama F., 2007. Le Koko ou Mfumbu (Gnetacées). Une plante alimentaire d’Afrique Centrale. L’harmattan- Etudes africaines. 211p. N’diaye M., Diatta W., Sy G. Y., Fall A. D.,Faye B., Bassene E. 2008. Activité Antihyperglycémiante De L’extrait Ethanolique De Feuilles D’icacina Senegalensis Juss (Icacinaceae). Medecine D’afrique Noire 55 : 441445. Olagbende-Dada S.O., Ogbonnia S.O., Coker H. A. B., Ukpo G.E. 2011. Blood glucose lowering effect of Aqueous extract Of Gratophyllum Pictum (Linn) Griff on alloxan induced diabetic rats and its acute toxicity in mice. African Journal Of Biotechnology 10 (6):1039-1043. Rodgers H. C., Knox A. J. 2001. Pharmacological treatment of biochemical defect in cystic fibrosis airways. European Respiratory Journal 17:1314-1321. Samba Babila C., Diatewa M., Ngoma Mouanda H. C, Ampa R., Abena A. A. 2007. Evaluation des propriétés hypoglycémiantes et antihyperglycémiantes de l’extrait aqueux des feuilles de Rauvolfia Vomitoria Afzel chez le Rat. Annales De L’université Marien Ngouabi, 8 (4) :88-93. Spinas, Lehman 2001. Diabète Sucré : Diagnostic, Classification Et Pathogenèse. Forum Med Suisse 20: 519-525. Soulimani R. 2009. Hypoglycemic And Antihyperglycemic Effects Of Anabasis Articulata (Forssk) Moq (Chenopodiaceae), An Algerian Medicinal Plant. African Journal Of Biotechnology 8 (20): 5589-5594. 65 Ndoumou et al., Sciences, Technologies et Développement (Février 2014), Volume 15, 60-65
© Copyright 2024 ExpyDoc