DISS. ETH No. 15941 2 2. APR. '2005 Experimental determination of the fibre effectiveness of forages in ruminants with special emphasis on pasture grass A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGY ZURICH For the degree of Doctor ofNatural Sciences Presented by Christoph M. Graf Dipl. Biol. Uni. Bern Born on 13. October 1968 Citizen ofBolligen BE Accepted on the recommendation of Prof Dr. M. Kreuzer, examiner Prof Dr. M. Wanner, co-examiner Dr. F. Dohme, co-examiner Zurich, 2005 Summary 1. Summary In grassland-dominated regions like in Switzerland, grass-based milk production systems are of central interest with respect to low cost production and animal welfare. Efficient grazing systems therefore, in which the nutrient and energy requirement for the dairy cows is covered, need young and highly digestible swards. In turn, this forage, rich in readily fermentable carbohydrates, might not provide sufficient physical property to prevent ruminal disturbances, i.e. acidosis. A decreasing in physical property of fibre reduces chewing activity and thus lowers saliva production. Several attempts were made to determine the effectiveness of fibre and fibre requirements, respectively, of individual forages for dairy cows, e.g. efficacy of structure, structure value or (physical) effective NDF. Most of these evaluating systems are based on diets including concentrate supplementation and have limitations, especially in grass-based diets, which were very poorly estimated. In two experiments the effect of grass-alone diets supplemented with different forges and in different frequency of supplementation on chewing behaviour, milk performance and ruminal fermentation were tested. In experiment 3, forages differing in botanical characteristics, vegetation stage at harvest and conservation type were tested by four different laboratory methods to evaluate the effects related to the physical and chemical properties of fibres. In the first experiment, füll-time grazing compared with part-time grazing supplemented with either 5.5 kg DM hay or maize over night in bam was tested for its effects on chewing behaviour, eating and ruminating time, and ruminal pH. Six rumen cannulated Brown Swiss cows were used in a double 3 x 3 Latin square arrangement in three periods consisting of 21 days of adaptation and 7 days of data and sample collection. Chewing activity and ruminal pH fluctuation were determined continuously over 7 days using special measurement and recording systems. The device for continuous ruminal pH measurement was developed at the Agroscope Liebefeld-Posieux., Swiss Federal Research Station for Anima! Production and Dairy Products (ALP). The grazing system has no effect on DM intake, milk or body weight performance. Also no differences for ruminating time occurred, but füll-time grazing cows spent more time eating than supplemented cows. Over night, when cows got different diets, ruminal pH did not differ. In contrast, throughout the day cows, which had got the hay supplement over night, had a lower ruminal pH compared to the other cows. Nocturnal supplement feeding of hay gave obviously no advantage over füll time grazing, but even led to a lower daytime pH. In a second experiment, pasture grass combined with or without 6 kg supplemental hay, offered in one or three equal portions, was used to determine the effects on chewing behaviour and ruminal pH. Six rumen cannulated cows (Brown Swiss : Holstein = 1 : 1) were kept in bam and were subjected to a double 3 x 3 Latin square design in three periods similar to the first experiment. Effects were observed neither in body weight, milk performance nor in ruminal pH fluctuation. The eating time was - 1- Summary increased in grass only fed cows compared to the hay supplemented cows, but no differences were observed in ruminating time. Rurninal pH across the whole day was decreased in tendency when hay was fed once a day compared with the other two treatments. Hay supplementation gave no advantageous fermentation in the rumen compared to feeding only grass. On the other hand, hay supplementation once a day led in tendency to a more disadvantageous ruminal environment. In a third experiment, mixed swards in young and mature stage prepared as silage, haylage and hay as weil as five individual plant species, i.e. English and Italian ryegrass, orchard grass, red clover and alfalfa, of the first and second cut were tested by four laboratory methods for their effects on variables related to the physical property of fibrousness. In addition, the contrast of two maize silages, 3 and 7 mm in length, were compared with the individual plant species. Particle size distribution was determined by dry sieving with a particle size separator (< 8 mm, 8 - 19 and > 19) and thus the physically effective factor (pef) was estimated by the percentage of particles > 8 mm in length. The energy used for grinding the forage samples through a 5 mm sieve was measured. In sacco DM and NDF degradation after 3, 6, 12, 24, 48 and 96 h as weil as VF A and gas production after 24 h of in vitro incubation were determined. Finally, the results were compared with chemical analysis of cell wall constituents and traits describing the effectiveness of fibres, i.e. structure value (SV) and (physically) effective NDF, calculated by particles > 8 mm in length or by tabulate values of the Cornell-Penn-Miner Dairy System as weil as the Cornell Net Carbohydrate and Protein System. The grinding resistance did not or only weak differ between samples of different botanical characteristics, vegetative stage and conservation type. Young stages and the first cuts had increased proportions of particles < 19 mm in length as weil as in the degradable and soluble fraction of DM and NDF degradation and the patterns of fermentation. Silage making compared to haylage or hay making resulted in the highest proportion of particles > 19 mm, but no clear effect on in sacco and in vitro fermentation could be observed. Orchard grass expressed the lowest percentage of particles < 19 mm and fermentation intensity compared to the other grass and the legume species. Compared to maize, the average of the other single species had fewer particles < 8 mm and more particles > 19 mm in length and thus a less intense fermentation. Correlations often were significant with most of the fibre contents and currently recommended structure-describing parameters (i.e. SV, and effective NDF's). In conclusion, füll-time grazing in the present studies (experiment 1 and 2) never caused seriously low ruminal pH over longer periods. But nevertheless, for almost 2 hours per day ruminal pH reached values below 5.8. Hay, supposed to be rich in effective fibre, had no obvious positive effects in supporting or stabilizing the ruminal pH fluctuation. Moreover hay supplementation once a day even decreased average pH in the rumen compared to feeding only grass (both experiments) or hay supplementation for three times a day (experiment 2). Perhaps, cows with higher milk yield and thus depending on a higher grass intake reach therefore a lower and more detrimental pH. This effect might -2- Summary be additionally enhanced by the supplementation of concentrates. In contrast to the continuous measurement methods, the other periodically or indirectly applied methods were not so sensitive and did not show differences between the treatments. However, more research on grass-based diets in combination with supplementation is needed to understand its fibre effectiveness. In experiment 3, mainly particle size distribution and in sacco degradation clearly differed between the diverse forages investigated, while grinding resistance was not useful in that respect. For estimating the ultimate effectiveness of fibre in ruminant diets, both, the fibre content and the particle size distribution have to be considered, as can be seen from the selective response of fibre contents to sward maturity and of particle size distribution to conservation types of mixed swards. This is the case on systems based on effective NDF. A single, commonly accepted evaluating system to estimate the effectiveness of fibres is still needed thus facilitating complete and thoroughly tested datasets across a wide range of plant species to be included in feed tables. -3- Zusammenfassung 2. Zusammenfassung In Grasland dominierten Regionen wie in der Schweiz tragen Weidesysteme bei Milchkühen wesentlich zur Produktionskostensenkung bei und ermöglichen eine tiergerechte Haltung_ Hochleistende Milchkühe sind jedoch auf den Verzehr von jungem, leicht verdaulichem Gras angewiesen, um ihren hohen Nährstoff- und Energiebedarf decken zu können_ Futterrationen, welche reich an schnell fermentierbaren Kohlenhydraten sind, können anderseits zu einer Unterversorgung an physikalisch effektiver Struktur, respektive an strukturwirksamer Faser, führen_ Eine solche Unterversorgung kann eine optimale Pansenfunktion nicht mehr gewährleisten, da dadurch weniger pansenabpuffernder Speichel gebildet und so das Risiko einer Pansenazidose erhöht wird_ In der Vergangenheit wurden bereits mehrere Versuche unternommen, um die Faserwirksamkeit, respektive die notwendige Zufuhr an Struktur wirksamer Faser bei verschiedener Rationszusammensetzung für Milchkühe zu beschreiben; so zum Beispiel in der Strukturwirksamkeit, im Strukturwert oder im (physikalisch) effektiven NDF-Gehalt. Die meisten dieser Bewertungssysteme basieren allerdings auf Rationen, welche mit relativ hohem Kraftfutteranteil kombiniert wurden, und sind zudem sehr vage, insbesondere im Bezug auf Weidegang_ In zwei Experimenten wurde daher die Wirkung einer auf Grasfütterung basierenden Ration kombiniert mit der Zufütterung verschiedener Raufutterarten oder Zufütterungshäufigkeiten auf die Kauaktivität, die Milchleistung und die ruminale Fermentation untersucht. In Experiment 3 wurden Raufutter, welche sich in der botanischen Zusammensetzung, im Vegetationsstadium bei der Ernte oder in der Konservierungsart unterschieden, mit vier verschiedenen Labormethoden auf die Wirkung ihrer physikalischen Eigenschaften, welche möglicherweise die Effektivität der Faser beschreiben, untersucht. Im ersten Experiment wurde die Wirkung der Vollweide mit der Teilzeitweide, in welcher entweder 5.5 kg TS Heu oder Maissilage im Anbindstall über Nacht zugefüttert wurde, auf das Kauverhalten, Fress- und Wiederkaudauer, und den ruminalen pH-Verlauf verglichen_ Dazu wurden sechs Pansen fistulierte Milchkühe der Rasse Brown Swiss in einem doppelten 3 x 3 Lateinischen Quadrat während drei Durchgängen, bestehend aus je einer 21-tägigen Adaptations- und einer 7tägigen Messphase, getestet. Sowohl die Kauaktivität als auch der pH-Verlauf konnten kontinuierlich an jedem Tag der einzelnen Messphase gemessen und aufgezeichnet werden_ Die Messapparatur für die kontinuierliche pH-Messung im Pansen wurde eigens dafür an der Agroscope Liebefeld-Posieux, Eidgenössischen Forschungsanstalt für Nutztiere und Milchwirtschaft (ALP) entwickelt. Die verschiedenen Fütterungsvarianten hatten keinen Einfluss auf die Futteraufuahme, die Milch- oder die Körpergewichtsentwicklung_ Ebenfalls wurde die Wiederkaudauer nicht durch die unterschiedlichen Rationen beeinflusst. Hingegen verbrachten die Kühe mehr Zeit mit Fressen während der Vollweide als während den beiden Teilweiden mit Zufütterung im Stall. Wenn die Kühe über Nacht ihre unterschiedlichen Rationen erhielten, veränderte sich der pH-Verlauf nicht. Doch tagsüber, wenn alle - 4- Zusammenfassung Tiere auf der Weide waren, zeigten die Kühe, welche über Nacht Heu frassen, einen deutlich tieferen mittleren pH-Wert als die anderen Kühe. Das einmalige, nächtliche Zufüttern von Heu, einem mutmasslich strukturreichen Raufutter, ermöglicht offensichtlich keine vorteilhaftere Pansenfermentation verglichen mit der Vollweide, sondern führte im Gegenteil zu einem tieferen ruminalen pH-Wert über den Tag. Im zweiten Experiment wurde Gras mit oder ohne Zufütterung von 6 kg Heu entweder verteilt auf eine oder drei gleich grosse Portionen pro Tag in einem Anbindstall verfüttert, um die Wirkung auf das Kauverhalten und den ruminalen pH-Verlauf zu vergleichen. Der Versuch wurde mit sechs Pansen fistulierten Milchkühen (Brown Swiss Holstein = 1 1) in einem 3 x 3 Lateinischen Quadrat, während drei Durchgängen und mit Versuchsparametern, wie in Experiment 1 beschrieben, durchgeführt. Es konnte keine Wirkung auf das Körpergewicht, die Milchleistung oder den pHVerlauf festgestellt werden. Einzig die Fresszeit war bei den Kühen, die nur Gras frassen, erhöht, verglichen mit den Tieren mit Heuzufütterung. Hingegen unterschied sich die Wiederkaudauer nicht zwischen den unterschiedlichen Fütterungsweisen. Der tägliche pH-Verlauf war bei den einmal pro Tag mit Heu zugefütterten Kühen tendenziell tiefer. Die Zufütterung von Heu ergab erneut keinen Vorteil bezüglich des Fermentationsverlaufs im Pansen verglichen mit den nur grasfressenden Kühen. Im Gegenteil, einmal pro Tag verabreichtes Heu führte eher zu einem leicht tieferen Verlauf des pHWertes. Im dritten Experiment wurden sowohl junge und reife Vegetationsstadien einer Wiesengrasmischung (ausgewogener Mischbestand), konserviert als feuchte und trockene Silage und als Heu, als auch fünf Reinbestände (englisches und italienisches Raigras, Knaulgras, Rotklee Luzerne) mit vier Labormethoden auf ihre Wirkung bezüglich ihrer physikalischen Fasereigenschaften untersucht. Zusätzlich wurden die Interaktionen von Maissilagen, mit 3 respektive 7 mm Häcksellänge, mit den Einzelpflanzenarten mittels Kontrastanalysen verglichen. Mit Hilfe einer Futterschüttelbox wurde die Partikelgrössenverteilung (< 8, 8-19 und > 19 mm Länge) und daraus der physikalisch effektive Faktor (pef) als der Prozentsatz mit der Partikellänge > 8 mm bestimmt. Die Mahlwiderstandsenergie wurde gemessen, welche zum Zerkleinern auf eine theoretische Länge von 5 mm benötigt wurde. Ferner wurden die in sacco Abbaubarkeit von TS und NDF bestimmt, sowie die Gas- und FFS-Produktion nach einer 24-h in vitro Inkubation. Schliesslich wurden die Resultate mit den Gehalten an chemisch analysierten Zellwandbestandteilen sowie den theoretischen Werten der Fasereffektivität, d.h. Strukturwert und (physikalisch) effektive NDF, verglichen. Die (physikalisch) effektive NDF wurde einerseits durch die Prozentualverteilung der Partikel > 8 mm bestimmt und stammte anderseits aus Tabellenwerten des Cornell-Penn-Miner Dairy Systems und des Cornell Net Carbohydrate and Protein Systems. Im Mahlwiderstand unterschieden sich die verschiedenen Futterarten gar nicht oder nur sehr schwach. Junge Vegetationsstadien und erste Schnitte hatten einen -5- Zusammenfassung grösseren Prozentsatz in Partikellänge < 19 mm sowie eine erhöhte TS- und NDF-Abbaubarkeit und eine leicht intensivere Fermentation. Die feuchte Silage verglichen mit der trockenen Silage und dem Heu wies einen erhöhten Prozentsatz an Partikeln > 19 mm auf, aber in der Fermentierbarkeit war kein deutlicher Unterschied ersichtlich. Knaulgras fermentierte am schwächsten und hatte die geringsten Anteile an Partikeln < 19 mm verglichen mit den anderen Reinbeständen. Verglichen mit den Maissilagen wiesen die anderen Einzelarten im Mittel einen erhöhten Prozentsatz an Partikeln > 19 mm und eine niedrigere Fermentation auf. Es bestanden deutliche Korrelationen zwischen den untersuchten Daten und den Faserkonzentrationen sowie den empfohlenen strukturwertbestimmenden Parametern, d.h. SV und effektiven NDFs. Grundsätzlich konnte ein gravierend tiefer, ruminaler pH bei einer grasreichen Ration in den präsentierten Untersuchungen (Experiment 1 und 2) ausgeschlossen werden. Dennoch wurde ein pHWert im Pansen von unter 5.8 während fast zwei Stunden pro Tag gemessen. Heu, welches als faserreich gilt, konnte die ruminale pH-Entwicklung nicht stabilisieren. Im Gegenteil, eine einmalige Heuzufütterung pro Tag senkte den pH-Verlauf verglichen mit einer reinen Grasration (beide Experimente) oder einer dreimaligen Heuzufütterung pro Tag (Experiment 2). Vielleicht würden aber Kühe mit einer höheren Milchleistung und daher einer erhöhten Futteraufnahme einen bedenklich tieferen pH-Verlaufim Pansen entwickeln, insbesondere, wenn noch zusätzlich Kraftfutter zugefüttert würde. Im Gegensatz zu den kontinuierlich aufZeichnenden Messmethoden waren die periodisch erfassenden und indirekten Methoden nicht empfindlich genug, um die geringen Unterschiede zwischen den Behandlungen aufzuzeigen. Es bleibt nun weiter abzuklären, in welchem Masse und unter welchen Bedingungen bei einer grasreichen Ration eine Azidose im Pansen erzeugt wird, und welche Messmethoden sinnvoll sind, um diese zu erkennen und dadurch eine Beurteilung der Faserwirksamkeit von Weidegras zu ermöglichen. Im dritten Experiment trennten hauptsächlich die Partikelgrössenverteilung und die in sacco Abbaubarkeit die verschiedenen Futtervariationen deutlich. Der Mahlwiderstand war im Gegensatz dazu nicht geeignet. Die Kombination aus Faseranteil und Partikelgrössenverteilung erwies sich als sehr zweckdienlich zur Schätzung der Fasereffektivität. So zeigte sich die Bestimmung des Fasergehaltes v.a. bei der Differenzierung zwischen den Reifestadien als hoch selektiv, während die Partikelgrössenverteilung zwischen den Konservierungsarten wirksam differenzierte. Diese Kombination wird auch in den Bewertungssystemen angewendet, welche auf der effektiven NDF basieren. Zur umfassenden Bestimmung der idealen Fasereffektivität wäre nun ein einheitliches Bewertungssystem notwendig, welches erlauben würde, ein einziges, global angewendetes Konzept mit Tabellenwerten über einen grossen Bereich der verschiedensten Futterarten zu erstellen. -6-
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