Werner ND

ND-Immunstatus bei Hühnern und Puten in
Deutschland
- Untersuchungen mit HAH-Test und ELISA -
Ortrud Werner
Friedrich-Loeffler-Institut Insel Riems
AVID 2004, ND-Serologie
O. Werner, FLI Insel Riems
Geflügelpest-Verordnung
§ 7 Der Besitzer eines Hühner- oder eines Truthühnerbestandes hat die
Tiere seines Bestandes durch einen Tierarzt gegen die Newcastle
Krankheit impfen zu lassen.
Die Impfung ist in solchen Abständen zu wiederholen, dass im
gesamten bestand eine ausreichende Immunität der Tiere gegen die
NK vorhanden ist.
Über die durchgeführten Impfungen hat der Besitzer Nachweise zu
führen.
Die serologische Kontrolle des Immunstatus ist nicht
behördlich vorgeschrieben
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O. Werner, FLI Insel Riems
1
Antikörpernachweis bei ND
• HAH-Test ist Goldstandard
• Positiv ab 24 (4 log2) bei Verwendung von 4
HAE Antigen
• Direkte Korrelation zwischen HAH-Titer und
Schutzrate
• ELISA-Titer keine direkte Korrelation zur
Schutzrate
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HAH-Titer und Schutz gegen Newcastle Disease
14
12
HAH-Titer (log2)
10
8
6
4
2
0
HAH-Titer 9 bis 11 → keine Legeleistungsabfälle,
nach Belastung Titer 11 bis 12
HAH-Titer 6 bis 8 → deutlicher Legeleistungsabfall,
aber keine Mortalität, nach Belastung HAH-Titer bis 14
HAH-Titer 4 bis 6 → 0 % Mortalität nach
Belastungsinfektion
HAH-Titer 2 bis 5 → 10 % Mortalität nach
Belastungsinfektion
HAH-Titer <2 → 100 % Mortalität nach
Belastungsinfektion
Schutzrate (nach Belastungsinfektion mit Herts 33)
nach: Alan et al., 1978.FAO-publication
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O. Werner, FLI Insel Riems
2
Untersuchungsmaterial
• 45 Legehennenbestände
• 34 Masthühnerbestände
• 43 Putenbestände
• 10 Serumproben pro Bestand
• Proben aus Überwachung auf AI 2003
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Testmethoden
• HAH-Test mit 4 HAE NDV-Antigen La Sota
– Legehennen, Masthühner, Puten
• NDV-ELISA der Fa IDEXX
– Legehennen, Masthühner, Puten
• NDV-ELISA Fa BioChek
– Legehennen, Masthühner
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3
HAH-Ergebnisse Legehennen
HAH-Titerverteilung
Bestandsimmunität
80
4%
70
4%
A n z a h l (n = 4 5 3 )
60
50
29%
40
30
63%
20
10
0
10 12
32
43 45
65
76 78
alle immun
70% und mehr immun
unter 70% immun
alle negativ
9 10
11
98 10
11 12
HAH-Titer (x=6,0+2,4)
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HAH-Ergebnisse Masthühner
HAH-Titerverteilung
Bestandsimmunität
80
15%
70
24%
A n z a h l (n = 3 3 9 )
60
50
18%
40
30
20
43%
10
0
01
21
32
43
54
65 76
HAH-Titer (x=3,6+2,0)
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87
98 10
9
alle immun
70% und mehr immun
unter 70% immun
alle negativ
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4
HAH-Ergebnisse Puten
Bestandsimmunität
HAH-Titerverteilung
7%
80
21%
70
A n z a h l (n = 4 2 9 )
60
50
35%
40
30
20
10
37%
0
10 12
32 43 45
65 76 78
98 10
11 12
9 10
11
HAH-Titer (x=4,5+2,6)
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alle immun
70% und mehr immun
unter 70% immun
alle negativ
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Wertung der ELISA-Ergebnisse
IDEXX-ELISA
S/P-Verhältnis kleiner oder gleich 0,2 sollten als negativ,
größer als 0,2 positiv angesehen werden.
Biochek-ELISA
S/P kleiner 0,25 negativ,
0,25 bis kleiner 0,35 verdächtig,
0,35 oder größer positiv,
Jedes Labor sollte seine eigenen Erfahrungswerte für die Interpretation der
Ergebnisse sammeln. Mit anderen serologischen Testmethoden
vergleichen.
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5
Vergleich HAH – ELISA bei Legehennen
IDEXX
BioChek
HAH + HAH IDEXX + 392
34
IDEXX - 0
27
HAH + HAH BioChek + 391
20
BioChek - 1
41
Sensitivität = 392 =100 %
Sensitivität = 391 = 99,7 %
392
392
Spezifität = 27 = 44,3 %
Spezifität =
= 67,2 %
61
61
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41
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Vergleich HAH – ELISA bei Masthühnern
IDEXX
BioChek
HAH + HAH IDEXX + 146
78
IDEXX - 6
109
HAH + HAH BioChek + 134
46
BioChek - 18
141
Sensitivität = 146 = 96,1 %
Sensitivität = 134 = 88,1 %
152
152
Spezifität = 109 = 58,8 %
187
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Spezifität =
141
= 75,9 %
187
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6
Vergleich HAH – ELISA bei Puten
IDEXX positiv ab 0,4
IDEXX
HAH + HAH IDEXX + 277
55
IDEXX - 1
96
+
-
HAH + HAH 254
25
24
126
Sensitivität = 254 = 91,3 %
Sensitivität = 277 = 99,6 %
278
278
Spezifität = 126 = 83,4 %
Spezifität = 96 = 63,6 %
151
151
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Einfluss der Testmethode auf die Bewertung
der Bestandsimmunität
Legehennen
Puten
Masthühner
100%
80%
60%
40%
20%
0%
HAH
IDEXX
Biochek
IDEXX 0,4
HAH
IDEXX
Biochek
IDEXX 0,4
Alle immun
unter 70% immun
70% und mehr immun
alle negativ
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HAH
IDEXX
IDEXX 0,4
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7
Zusammenfassung
Trotz gesetzlich verankerter Impfpflicht sind nicht alle
Geflügelbestände ausreichend gegen ND geschützt. Das betrifft vor
allem Masthühner und Puten.
Mit den ELISA-Tests wurden zahlreiche im HAH negative Seren als
positiv beurteilt.
Die Ergebnisse des Biochek-ELISA stimmen besser mit den HAHErgebnissen überein als die des IDEXX-ELISA.
Es wird empfohlen, beim IDEXX-ELISA den cut off auf S/P = 0,4
festzulegen.
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