Ein Vergleich von Coxiellose und Paratuberkulose dient dem

Ein Vergleich von Coxiellose und Paratuberkulose
dient dem Verständnis
Jens Böttcher
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.,
Senator-Gerauer-Str. 23, D-85586 Poing,
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
C. burnetii und M. avium ssp. paratuberculosis
Intrazelluläre Erreger
Infektion von Makrophagen
Strategien der Immunevasion
Erregerpersistenz
viele infizierte/immune Tiere ↔ einzelne chronisch infizierte Tiere
Hochausscheider mit starken Antikörperreaktionen
Entgleisung der Immunantwort
multi- und paucibacilläre Form
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Der rote Faden des Vortrags
•
Bedeutung
•
Fokus der Diagnostik: Chronische Infektion
•
Lösungsansatz: Merzung chronisch-infizierter Tiere und
Vermeidung chronischer Infektionen durch Impfung
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Ist MAP in der Milch eine ernste Bedrohung?
2 infizierte Bestände; 106 Einzelmilchproben
Einzelmilch-PCR: alle negativ,
Wie gut ist die Kot-PCR im Vergleich zur Kotkultur?
Kotkultur
KotPCR
neg
pos
∑
neg
689
2
691
pos
20
11
31
∑
709
13
722
Fazit:
Sicherheit Milch:
Kotkontamination, Melkhygiene.
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Coxiella burnetii in der Milch?
n
Bestände
12
Einzelmilchproben
824
POSITIV
45
Prozent (CI95%)
5.5% (3,9-7,3%)
Seroprävalenz:
2003: (kommerzieller Test; CHEKIT)
603 Milchviehbestände, 21051 Proben
72,8% Herdenprävalenz
14.2% Einzeltierprävalenz
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
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6.-8. Mai 2015
Coxiellen in der Milch: Alle Viertel beproben!
Kuh
C.b./ml)*
(Mittel)
PCR VL)*
PCR HL)*
PCR HR)*
PCR VR)*
49916
0,7
2,76
0
0
0
93380
0,8
0
0
0
3,09
93340
1,7
0
n.d.
0
5,11
49885
1,9
0
3,51
0
4,24
93361
2,1
4,67
3,61
0
0
93379
4,4
4,8
4
4,45
4,16
64 Tiere
neg
neg
neg
neg
neg
)* log10 Coxiellen/ml
9. Stendaler Symposium
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6.-8. Mai 2015
Tierseuchenbekämpfung in Deutschland
Wir sind auf Eradikation gepolt!
Hauttest
Zelluläre
Immunität
Tankmilchuntersuchung als
Kontrolle freier Bestände;
hohe Sensitivität!
Brucellose
BHV1
Enzootische Leukose
BVDV
Tuberkulose
Flächenimpfung
ohne Diagnostik
MKS
Aujeszkysche
Krankheit
Differenzierung
PI/TI-Tiere
DIVA-Konzept
Markervakzine und
Diagnostik
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
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6.-8. Mai 2015
Ist BVDV richtungsweisend?
• Merzung persistent-infizierter Tiere
• Impfung
Kontrolle transienter Infektionen
Vermeidung neuer PI-Tiere
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
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6.-8. Mai 2015
Konsequenz für Coxiellose und Paratuberkulose
chronisch
• Merzung persistent-infizierter Tiere
• Impfung
„transienter“
Kontrolle transienter Infektionen
ChronischChronisch-infizierter
Vermeidung neuer PI-Tiere
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Erregernachweise
akut
–
intermittierend
–
chronisch
Das unselektive Merzen von Kühen, die Erreger
ausscheiden, verursacht auch einen
wirtschaftlichen Schaden!
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
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6.-8. Mai 2015
Formel zur Vermeidung von Justizirrtümern
"Qpcr-cycling" by Zuzanna K. Filutowska - Own work. Licensed under CC BY-SA 3.0 via Wikimedia Commons http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Qpcr-cycling.png#/media/File:Qpcr-cycling.png
PCR
Ausscheider
+
+
„ELISA-sandwich“ von Jeffrey M. Vinocur - Eigenes Werk. Lizenziert unter CC BY 2.5 über
Wikimedia Commons - http://commons.wikimedia.org/wiki/File:ELISAsandwich.svg#/media/File:ELISA-sandwich.svg
ELISA
immunologisches Versagen
9. Stendaler Symposium
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6.-8. Mai 2015
Zwei Akteure der Coxiellose
Ausscheidung
nur puerperal
Milch
Phasenmuster
>> PhII+/PhI-
>> PhII+/PhI+
PhI-Titer
< 100
Ø 1000
PhII-Titer
Ø 1000
Ø 5000
IFN-γ
+++
(+)
IFN-γ post vacc
↑↑↑
↑→
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6.-8. Mai 2015
Impfung Coxiellose
September 2012: Abkalbung der
geimpften Färsen.
Aktueller
Stand
März
2010
August
2010
Milch-PCR Puerperal Tupfer-PCR
Juni
2011
Impfung der Färsen
Juni
2012
Impfung der Kühe
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
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6.-8. Mai 2015
Coxiellose-Lösungsvorschlag
Schritt 1: Identifikation der chronisch-infizierten Tiere
(Phase I-Titer >200 + Erregernachweis)
Schritt 2: Impfung (Coxevac®)
Schritt 3: Kontrolle der chronisch-infizierten Tiere (ggf. Merzung)
akut
–
intermittierend
–
chronisch
Impfung, Verhinderung chronischer Infektionen -
Merzung
Wir haben für die Coxiellose-Kontrolle sinnvolle Handlungsoptionen!
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Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
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Paratuberkulose-Bestände (n=2)
Umgebungsproben
Einzelkotproben
Einzelmilch
Zusätzlich: Blut
Tests
Zeit
Kultur
PCR
Antikörpertests (Idexx, IDVet, LSI)
IFN-γ-Stimulationstest
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Zwei MAP-infizierte Bestände
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Die letzten Kälber von
klinisch kranken Kühen!
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Einfluss der Antikörper (in-vitro-Versuch)
Parasitophore Vakuole
C. burnetii
Opsonierte Coxiellen
Phase I-Antikörper
Fc-Rezeptor
IL-10 ↑↑↑
Desnues et al, 2009: Role of specific antibodies in Coxiella burnetii infection of macrophages. Clinical Microbiology and Infection, Vol. 15, Supplement 2, 161-162
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Einfluss der Antikörper auf MAP-Infektion
Chronische Infektion
• Erreger aus der Umgebung
• Antikörper aus dem Kolostrum
???
Coxiellose: Mutter/Kalb Beziehungen fehlen bislang!
Die Impfung scheint die Entstehung chronischer
Euterinfektion zu verhindern.
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Entstehung chronischer Infektionen
Paratuberkulose
Coxiellose (Hypothese)
Kälber
Kuhstall
Infektion naiver Tiere
Kälber von
Hochausscheidern
Galaktogene Infektion
naiver Tiere?
Hochausscheider im
finalen Stadium haben
Antikörper
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Der rote Faden des Vortrags
•
Bedeutung: Coxiellose > Paratuberkulose
•
Diagnostik der chronischen Infektion: Erreger + Antikörper
•
Lösungsansatz: Diagnose der chronischen Infektion und Impfung
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015
Danksagung
Diese Studie wurde mit finanzieller
Unterstützung des Freistaates
Bayern und der bayerischen
Tierseuchenkasse durchgeführt.
Vielen Dank für Ihre
Aufmerksamkeit.
9. Stendaler Symposium
Tiergesundheitsdienst Bayern e.V.
© Jens Böttcher
6.-8. Mai 2015