異種移植に関する基礎的研究（研究代表者：高尾尊身） ブタ内在性レトロウイルス（PERV）のヒト細胞への感染機構解明 と抑制機序 （分担研究者 藤吉利信） クラウン系ミニブタのPERVの構造 クラウン系ミニブタのSLA純系とPERV PERVはヒト細胞に病原性を示すか？ PERV制御の方法 クラウン系ミニブタにPERVのゲノムは存在するのか？ PCR プライマーの設計 Porcine Endogenous Retrovirus (PERV) 8849 bp 5'LTR U 3 R U 5 gag 7536 pro/pol pro/pol env 3'LTR U 3 5620 R U 5 PERV env Specific Primers Class-A: 360 bp (6361-6721) Class-B: 263 bp (6996-7259) Class-C: 281 bp (6137-6417) A B C Nested PCR primer SLA純系クラウン系ミニブタとPERV亜型の相関 MPK SLA-I SLA-II SLA-I/II ホモタイプ ヘテロタイプ ClassI PD1PERV ND gag 02 03 03 02 ClassII 21 7 S08 G11 MPK M 1 PD1 02/03 03/02 7/21 S08/G11 M 1 Clawn miniature swine H O 2 2 3 4 5 6 7 PERV env (Class B) Clawn miniature swine H O 2 2 3 4 5 6 7 PERV env (Class A) 8 8 M PERV env (Class C) M クラウン系ミニブタのPERVー現在のまとめ PERV-A PREV-B PERV-C NIHミニブ タ由来 黒ブタ クラウン系ミニブタ SLA-I ＋ ＋ ＋ SLA-II ＋ ＋ ＋ MPK(minipig kidney cell) ＋ ＋ ＋ Kagoshima Berkshire swine ＋ ＋ ＋ SLA純系のクラウン系ミニブタ2系統 PERV-A,B,Cのゲノムは存在する。 PERV発現 心、膵、肺、PERV発現－ 肝、腎、脾、PERV発現＋ ヒト細胞への感染性の有無 確認が必要 PERV感染の制御ーEnv抗体の作成 SU TM (96-128)(163-198) (254-298) (333-460) VRA VRB PRR A,Cの結合特異性 Gemeniano et al. Virology 346:108-117,2006 レセプターの結合に 必要な領域 Env peptide の合成→抗体作成
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