RoboColumn ;96ウェルマイクロプレート用 トヨパール充塡

PROCESS
RoboColumn®;96ウェルマイクロプレート用
トヨパール充塡ミニカラム
RoboColumn は、トヨパール ® イオン交換体、疎水ゲル、ミッ
おける分離条件を至適化するために実施されたスクリーニン
クスモードゲル、アフィニティーゲルが充塡されたミニカラ
グ試験の例です。試料は、プロテイン A ゲルによるキャプ
ムです。これらの製品には、ゲル容量の異なる 2 種類の製品
チャー工程で精製された抗体試料で、トヨパール SuperQ-
があり、Tecan 社の Freedom EVO® のようなロボットによ
650M 充塡 RoboColumn で、異なる塩濃度、吸着バッファー
る全自動溶液分注システムで使用可能です。この製品を用い
れば、たんぱく質試料を最大 8 列の独立したミニカラムで同
pH, 溶出バッファー pH が検討されました。最も良い結果は、
時に、ハイスループットでクロマトグラフィー分離の検討が
0.08 mol/L NaCl を 含 む 0.02 mol/L り ん 酸 ナ ト リ ウ ム
(pH 6.5)で得られました。
可能です。カラムへの溶液分注は、空気圧ではなく溶液の加
圧送液により行われるため、それぞれのカラムが、独立した
システムで分離されるのに似ています。
Optimization of Anion Exchange Conditions
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GmbH 社の製品です。また Atoll GmbH 社の RoboColumn
8
と 同 様 な 製 品 で す。 市 販 の Array Plate に よ り、
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RoboColumn カラムユニットを、最大 96 本(製品を 12 列
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搭載)使用することが可能です。
主な特徴
C (mg/mL)
トヨパールを充塡した RoboColumn は、Tosoh Bioscience
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10mM PBS/40mM NaCI/pH 7.5
10mM PBS/40mM NaCI/pH 7.5
20mM PBS/80mM NaCI/pH 7.5
30mM PBS/120mM NaCI/pH 7.5
10mM PBS/10mM NaCI/pH 6.5
10mM PBS/40mM NaCI/pH 6.5
20mM PBS/80mM NaCI/pH 6.5
30mM PBS/120mM NaCI/pH 6.5
5
4
3
2
●ミニカラムの形状でマイクロプレートに対応
●複数カラムで同時並行してハイスループット分離
1
●充塡剤及び、クロマトグラフィー条件の全自動スクリー
0
100
200
300
400
500
600
ニング
LOAD
●ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー 分 離 に 関 す る 設 計 領 域(Design
space)の理解が容易
PLW
STRIP
V [µl]
図1
応用例
RoboColumn は、試料のハイスループット精製のみならず、
充塡剤のスクリーニング、分離条件のスクリーニング及び至
適化、スケールダウン試験など幅広い用途で使用できます。
スクリーニング
溶離液の吸着、洗浄、溶出(例;バッファーの pH、イオン強度、
塩の種類など)のスクリーニングのほか、複数充塡剤の同時
並行スクリーニングも可能です。分離条件を至適化したり、
実験における設計領域を探索する際には、同時に多数の異な
る分離条件を試験することができます。実験計画(Design of
Experiment: DoE)は、プロセスに多大な影響を与える要因
を特定するための統計的な試験法であり、これを実施すれば、
必要とされる実験の数を最小限にすることができます。
図1は、陰イオン交換体によるモノクローナル抗体の中間精
製工程(プラットフォーム)において、フロースルーモードに
プロテイン A ゲルで精製されたモノクローナル抗体試料を、TOYOPEARL SuperQ650M を充塡した RoboColumn を用い、各種条件で分離したクロマトグラフィー溶
出パターン。データは、Atoll GmbH 社の T. Shroder 氏のご厚意によります。
分離
RoboColumn は、小スケールでの精製や分離を、アイソクラ
ティックやステップグラジエントで実施することができま
す。例えば、プロテイン A ゲルを用いた培養液試料中のモノ
クローナル抗体の精製による工程内(in-process)モニタリ
ングや、試料の MS, ELISA あるいは CEI/SDS ゲル電気泳動
による分析の前処理としての応用があげられます。
取扱説明書(Instruction Manual)
RoboColumn の取扱説明書は、製品に付属されていません。
弊社ホームページからダウンロードをして取り寄せてください。
http://www.separations.eu.tosohbioscience.com/NR/
rdonlyres/EC4A0C01-AA02-488A-8FC8B0693061D9FD/0/M12P12A_RobocolumnsManual.pdf
PROCESS
カラムタイプ
RoboColumn は、ゲル容量 200μL(カラム高さは 10 mm)及
RoboColumn に充塡されたトヨパールゲルは、全てのグレー
び 600μL(カラム高さは 30 mm)の 2 種のタイプがあります。
ドで、より大きな充塡カラム ToyoScreen® カラム(1 mL,
カラムは、トヨパールが充塡された 1 列 8 本の独立したカラム
5 mL)や MiniChrom カラム(5 mL)が利用できます。また、
からなる形態となっており、各カラムの保存のための脱着可能
さらに大量に使用される場合は、各種バルク充塡剤のボトル
な上下 2 つのシリコーンカバー(カラム栓)がついています。
製品を利用することができます。
個々のカラムは、96 ウェル Array Plate に装着できます。
製品一覧
RoboColumn®
品番
TOYOPEARL® グレード
容量
(µL)
粒子径
(µm)
ポアサイズ
(nm)
価格
(円)
0045001
0045002
0045003
0045004
0045005
0045006
0045007
0045008
0045011
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0045021
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0045031
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0045033
0045034
0045035
0045036
0045037
0045038
0045051
0045052
0045061
0045062
0045063
0045064
0045071
0045072
TOYOPEARL GigaCap ® S-650M
TOYOPEARL GigaCap ® S-650M
TOYOPEARL GigaCap ® Q-650M
TOYOPEARL GigaCap ® Q-650M
TOYOPEARL GigaCap ® CM-650M
TOYOPEARL GigaCap ® CM-650M
TOYOPEARL GigaCap ® DEAE-650M
TOYOPEARL GigaCap ® DEAE-650M
TOYOPEARL Q-600C AR
TOYOPEARL Q-600C AR
TOYOPEARL NH2-750F
TOYOPEARL NH2-750F
TOYOPEARL Phenyl-600M
TOYOPEARL Phenyl-600M
TOYOPEARL Butyl-600M
TOYOPEARL Butyl-600M
TOYOPEARL PPG-600M
TOYOPEARL PPG-600M
TOYOPEARL Phenyl-650M
TOYOPEARL Phenyl-650M
TOYOPEARL MX-Trp-650M
TOYOPEARL MX-Trp-650M
TOYOPEARL AF-rProtein A-650F
TOYOPEARL AF-rProtein A-650F
TOYOPEARL AF-rProtein HC-650F
TOYOPEARL AF-rProtein HC-650F
TOYOPEARL HW-40F
TOYOPEARL HW-40F
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
200 x 8
600 x 8
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> 100
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100
50
50
20,000
24,000
20,000
24,000
20,000
24,000
20,000
24,000
20,000
24,000
20,000
24,000
22,000
29,000
22,000
29,000
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29,000
22,000
29,000
22,000
29,000
40,000
100,000
40,000
100,000
20,000
24,000
※ 初めて RoboColumn を Tecan 社 Freedom EVO に使用する場合は、別途、市販の Array Plate が必要となります。
※トヨパールを充塡したRoboColumnはTosoh Bioscience GmbH社の製品です。
※トヨパール、TOYOPEARL、TOYOPEARL GigaCap及びToyoScreenは、東ソー株式会社の登録商標です。
※RoboColumnはAtoll GmbH社の登録商標です。
※Freedom EVOはTecan Group Ltd.の登録商標です。
※掲載のデ−タ等はその数値を保証するものではありません。 お客様の使用環境・条件・判断基準に合わせてご確認ください。
バイオサイエンス事業部
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〒746-0015
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名古屋市中区栄1-2-7
福岡市中央区天神1-13-2
仙台市青葉区本町1-11-1
山口県周南市清水1-6-1
神奈川県綾瀬市早川2743-1
お問合わせe-mail hlc@tosoh.co.jp
バイオサイエンス事業部ホ−ムペ−ジ http://www.separations.asia.tosohbioscience.com/
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