J774-Dual™細胞 免疫シグナル伝達を簡単に評価可能 本製品は、マウスマクロファージ様株化細胞 J774.1 を改変したレポーター細胞です。デュアルレポーター 遺伝子の採用で、IRF と NF-κB 経路の活性化を同時にアッセイできます。 特 長 ● IRF と NF-κB 経路の活性化を同時にアッセイ 製品紹介 ■ レポーターとシグナル伝達経路 シグナル伝達経路 プロモーター レポーター遺伝子 IRF 5 個の ISRE（IFN-stimulated response element）と Lucia 連結されている ISG54 最小プロモーター （分泌型ルシフェラーゼ） NF-κB 5 個の NF-κB 応答配列と 3 個の c-Rel 結合部位に SEAP 連結されている IFN-β最小プロモーター （分泌型アルカリホスファターゼ） 本製品は、2 種類のプロモーターにより、それぞれの分泌型レポーター遺伝子を発現します。これにより、IRF と NF-κB 経路の活性化の有無を容易に確認できます。 評価データ ■ 自然免疫受容体 （PRR） アゴニストに対する NF-κB 経路の応答 本細胞に NF-κB 経路を活性化することが既知であるさまざまな PRR アゴニストを用いて刺激した。Pam3CSK4 （TLR1/2 リガンド 1μg/ml）、超高純度リポポリサッカライド大腸菌 K12 由来（TLR4 リガンド 100ng/ml）、Poly(I:C) （TLR3 リガ ンド 10ng/ml）、ODN1826（TLR9 リガンド 10μg/ml） 、L18-MDP（NOD2 リガンド 10μg/ml） 。NF-κB 経路の活性化は、 SEAP の検出試薬である QUANTI-Blue™を用いて OD655nm の値を測定することで評価した。 ■ PRR アゴニストに対する IRF 経路の応答 本細胞に IRF 経路を活性化することが既知であるさまざまな PRR アゴニストを用いて刺激した。2 3 -cGAMP（STING リガンド 2μg/ml)、Poly(I:C)/LyoVec™複合体（RIG-I/MDA-5 リガンド 30ng/ml）、3 ppp-dsRNA(3P-RNA)/LyoVec™複合体 （RIG-I リガンド 1μg/ml）。IRF 経路の活性化は、Lucia の検出試薬である QUANTI-Luc™とルミノメーターを用いて発光 量を測定することで評価した。 ■ 価格表 製品名 J774-Dual™ Cells 毒劇物 メーカー製品番号 容量 価格 劇 j774d-nfis 3-7×106 cells 282,000 製品には細胞の他に、検出試薬、抗生物質や抗菌剤から構成されています。 詳細は InvivoGen 社 Web site （http://www.invivogen.com/j774-dual） を参照ください。 3 LabFab News Vol.13 Aug 2015
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