® 免疫・がん・糖尿病関連の研究に 免疫反応を高活性化 MEGACD40L®：CD40 リガンド (CD154) MEGACD40L® は CD40 リガンド (CD40L/CD154) にアディポネクチン (Adiponectin/ACRP30/AdipoQ) のコラー ゲンドメインを結合したリコンビナントタンパク質です。免疫反応の高活性化にご使用いただけます。 特長 ● 高活性：通常の CD40 リガンドよりも免疫反応を高活性化！なのにエンハンサーは不要！ ● 高純度：エンドトキシンレベルが競合品と比べて 10∼100 倍も低い (≦0.01EU/µg) ● 一貫した高品質と安定性 CD40 リガンドとは？ 活性化 T 細胞に主に発現する約 33 kDa の II 型膜貫通の TNF スーパーファミリータンパク質です。CD40 と結合することで B 細胞の増殖や接着性、分化を刺激するため、T 細胞依存的な抗原への B 細胞のさまざまな段階の応答に関与します。このこ とから、移植拒絶反応や関節リウマチ、甲状腺疾患、多発性硬化症、アテローム硬化症、ぜんそく関連起動炎症、自己免疫疾患、 がんに対する免疫応答として重要です。 CD40L と MEGACD40L® の違い CD40L は生体内で 1 つの三量体を形成していますが、MEGACD40L® は人工的にアディポネクチンのコラーゲンドメインを 介して三量体を 2 セット形成させたキメラタンパク質です。この構成が における CD40L の膜介在集合体を模倣して おり ( 下図 )、【CD40L + エンハンサー】の組み合わせに代わって 簡易かつ同等以上の免疫反応の活性効果をもたらします。 他社品と比べて低エンドトキシン！ MEGACD40L® 100x less Endotoxin than competitor キメラドメイン CD40L （アディポネクチン） レセプター 集合体形成 CD40 Max Endotoxin Units/µg (LAL) CD40L <1.0 1 0.8 0.6 0.4 <0.01 0.2 0 Enzo MEGACD40L® Competitor A 図 1 競合品 A とのエンドトキシン含有量の比較 活性 大 活性 小 CD40L + エンハンサーよりも高活性！ Miｍic Natural CD40L-mediated Immune Response % CD86+ B Cells (CD19+) 75 70 65 60 55 50 45 40 ng/ml MegaCD40L 35 30 0.01 0.1 1 10 100 1000 10000 % CD86+ B-cells 80 図 2 本品による B 細胞リンパ球の活性化 末梢血単核球（PBMC）を、48 ウェ ルプレートに 1×106 cells/well で播 種し、5％CO2、37℃で 48 時間イン キュベートした。各ウェルには、段 階希釈した本品を添加した血清フ リーの試験培地 200 µL を含む。処 理後、細胞を洗浄し、マウス抗ヒト CD19-PE 抗体及びマウス抗ヒト CD86-APC 抗体で二重染色し、フ ローサイトメトリーで分析した。各 濃度における CD86 陽性で二重染色 された CD19 陽性 B 細胞のパーセン トを表示した。 70 60 MEGACD40L® CD40L + 2 µg/ml Enhancer CD40L Only 50 40 30 20 0.01 0.1 1 10 100 Concentration (ng/ml) 図 3 MEGACD40L® と CD40L( 品番：ALX-850-064) との B 細胞の活性化比 Enzo Life Sciences, Inc. メーカー略号：ENZ 品名 MEGACD40L® (Soluble) 種由来 Human Mouse 品番 ALX-522-110-C010 ALX-522-120-C010 包装 10 µg 10 µg 価格 ¥92,000 ¥97,000 その他の免疫高活性化 TNF リガンド商品 ( エンハンサー不要 ) オリゴマーの三量体形成を促進する独自の KILLER リンカーペプチドを 結合したリコンビナント TRAIL タンパク質。 アポトーシス誘導濃度：10-100 ng/ml ED50：20 ng/mL (BJAB 細胞 ) TM 図 1 TRAIL 高感度細胞のアポトーシス 100 % Cell death 90 80 B JAB 70 JK 60 50 40 30 50 10 0 10000 1111 123.5 13.7 ng/mL 1.5 0.16 0 Jurkat 及び BJAB 細胞のアポトーシ ス誘導は KILLERTRAIL™濃度が 10 ～ 100 ng/ml の時に濃度依存的に高 い活性を示した。ヒト Jurkat 及び BJAB 細胞 (5x104 cells) を 10% ウ シ胎児血清を含む RPMI1640 培地 100 µl を 96 ウェルプレート中で 37℃、16 時間、図で示された各濃度 の KILLERTRAILTM 存在下で培養し た。細胞死はフローサイトメトリーに よって定量化した。 SUPERKILLERTRAILTM TRAIL ジスルフィド仲介クロスリンクを増加させた変異 KILLERＴＭリンカー ペプチドを結合したリコンビナント TRAIL タンパク質。 アポトーシス誘導濃度： >5 ng/ml（ヒトリコンビナント） >10 ng/ml（マウスリコンビナント） 広範囲の TRAIL-Rs のクロスリンクが必要な細胞株への使用時に、 優れています。（Jurkat 細胞など） SUPERFASLIGANDTM Jurkat Cell death - 3 hr incubation with SUPERFASLIGANDTM 100 80 60 40 20 10000 100 1000 10 1 0.1 0.01 0.001 図 2 Jurkat 細胞を用いた細胞死 各濃度の SUPERFASLIGANDTM を加 えた Jurkat 細胞 (50,000 cells/well) を 3 時間インキュベートし、細胞生存 性を測定した。生存率 % は SUPERFASLIGANDTM を含まないコ ントロールウェルと比較して決定した。 0.0001 -20 [SUPERFASLIGANDTM] (ng/mL) MEGATNF-αTM TNF-α ACRP30headless ドメインを結合したリコンビナント TNF-αタンパク質。腫瘍 形成やウイルス増殖を防ぎ、熱、アポトーシス細胞死、悪液質、炎症を誘導し ます。 図 3 マウス WEHI-164 細胞に対する rhsMEGATNF-αを用いた細胞死アッセイ 1.4 rhsMEGATNF-α マウス WEHI-164 細胞 (50,000 cells in 10% ウシ胎児血清含有の RPMI 培地 ) を 96 ウェルプレート中で図で示された濃度で 37℃、12 時間インキュベートした。細胞生 存性は PMS/MTS ベースの細胞増殖アッセイ キットを用いて決定した。 0.7 ● KILLERTRAILTM Strage and Dilution Buffer FasL N 末端リンカーを結合したリコンビナント Fas リガンドタンパク質。 アポトーシス誘導濃度：＞1 ng/mL ED50：1 ng/mL (A20 細胞 ) % Living Cells TRAIL OD 490 nm KILLERTRAILTM 0.01 0.03 0.12 ng/mL 0.5 2 0 30 125 2000 0 500 KILLERTRAIL™および SUPERKILLERTRAIL™タンパクにご使用い ただける保存・希釈用のバッファーです。 ● ACRP30 MEGACD40L® や MEGATNF-α™に対するネガティブコントロール化合物です。 Enzo Life Sciences, Inc. メーカー略号：ENZ 関連商品群 TRAIL 品名 KILLERTRAILTM (Soluble) SUPERKILLERTRAILTM (Soluble) KILLERTRAILTM Storage and Dilution Buffer FasL SUPERFASLIGANDTM (Soluble) MEGATNF-α TM TNF-α ACRP30 (Soluble) 種由来 品番 包装 希望販売価格 Human ALX-201-073-C020 ALX-201-073-3020 ALX-201-123-C500 20 µg 3×20 µg 500 µg ¥78,000 ¥161,000 ¥260,000 Human ALX-201-115-3010 ALX-201-115-C010 3×10 µg 10 µg ¥166,000 ¥78,000 Mouse ALX-201-130-C020 ALX-201-130-3020 20 µg 3×20 µg ¥74,000 ¥161,000 - ALX-505-005-R500 500 µL ¥30,000 Human ALX-522-020-C005 ALX-522-020-3005 5 µg 3×5 µg ¥51,000 ¥118,000 Human Human Mouse ALX-522-046-C010 ALX-203-002-C010 ALX-203-003-C010 10 µg 10 µg 10 µg ¥115,000 ¥49,000 ¥49,000 ● 希望販売価格 ･･･「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は２０１5 年 5 月１日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。 ● 使 用 範 囲 ･･･ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意下さい。 （12246）
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