sCLARITY

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組織透明化システム
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Easy-Clear®
Easy-Gel®
Easy-Passive®
Easy-Mount®
Easy-Index®
Superior
Simple
Safe
Scalable
組織透明化システム
ハイドロゲル重合システム
免疫染色システム
透明組織用イメージングチャンバー
屈折率調整透明化試薬
Live Cell Instrument
CLARITYとは
アクリルアミドベースのハイドロゲルを使い組織を透明化する技術です。CLARITYは脳や臓器などの組織を
まるごと透明なハイブリッドゲルに変換することで可視光および蛍光マーカーのアクセスを向上します。
それにより、分子ラベリングの技術と組み合わせてまるごとの臓器内のタンパク質や核酸の分布を高精度に
イメージングすることが可能です。この新技術は2013年にスタンフォード大学のKwanghun Chung博士、
Karl Deisseroth博士らによりNature誌に発表されました。
CLARITYのステップ
1. ハイドロゲルモノマーの浸透、およびハイドロゲルの組織重合
タンパク
DNA
Ș
小胞体
Ș
ベシクル
細胞膜
ハイドロゲル
Easy-Gel®
2. SDS溶液中での電気泳動により組織の脂質を除去（クリーニング）
SDSミセル
SDSミセルと一緒に
Extracted lipids
脂質が除去される
In SDS micelle
Easy-Clear®
3. ラベリング
4. 3次元イメージング
組織まるごと染色
抗体
顕微鏡観察
脱色剤で脱色
Easy-Gel®
Easy-Passive®
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Easy-Index®
Easy-Mount®
オリジナルCLARITYの問題点
̻ 組織へのダメージ
ˍ 強い電気化学反応により重要な生物組織サンプルが損傷するリスクがある
ˍ SDSの電気分解によりpHが下がり、蛍光タンパク質のクエンチング（消光）が起こる
ˍ 電極付近で発生するカーボンが組織表面に吸着して黒くなり、イメージングの妨げになる
ˍ 1方向の電気泳動では電場にムラができ、組織が部分的に透明化されないなどのことが起こる
ˍ 熱により蛍光タンパク質のシグナルのロスが起こる
̻ コスト
ˍ 高価な高濃度SDSバッファを大量に使う必要がある
ˍ pH低下およびカーボン発生のためにSDSバッファを頻繁に交換する必要がある
̻ スピード
ˍ 組織へのダメージを回避するために低電圧を使わざるを得ず、クリーニングに時間がかかる
CLARITYは世界で最も効率的な透明化手法として認識されながら、上記の問題点により使用が制限され
てきました。そこで、オリジナルCLARITYの開発者であるKwanghun Chung博士（現MIT）とLCI社の
共同開発によりこれらの問題点を解決した製品「sCLARITYシリーズ」が開発されました。シリーズの中核
である高速・オールインワン組織透明化システム「Easy-Clear」は電気化学反応による組織損傷の防止 /
SDSバッファ使用量の大幅な削減 / 安定した温度制御による蛍光シグナルロスの抑制等を実現しています。
sCLARITYシリーズはCLARITYの各ステップを高速かつスムーズに行うための装置・試薬がそろっています。
この技術は特許申請中で、PNAS誌に論文発表されました。
Stochastic electrotransport selectively enhances the transport of highly electromobile molecules.
Sung-Yon Kim ... Kwanghun Chung et al., PNAS 2015 112(46):E6274-83
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Easy-Clear®
組織透明化システム
CLARITYの透明化ではSDSバッファに電極を浸したチャンバーで電気泳動
を行います。この方式だと電極で黒いカーボン粒子が発生し組織に付着
します。加えて、電気泳動によるSDSの漸増的な酸化でpHが低下し、
サンプル内の蛍光分子やタンパク質が破壊されます。この問題を避ける
ためにSDSバッファを頻繁に交換する試みは、完全に問題を解決できない
ばかりかSDS溶液の大量消費につながります。
Easy-Clearはカーボン粒子対策、pH低下防止、組織損傷の防止、といった
機構を備え、蛍光シグナルとタンパク質のロスを防ぎ、それでいてSDS
バッファの消費を最小限に抑えます。
このシステムでは電極で発生した熱を効果的に除去できるので高電圧をかけることができ、それにより高速に透明化できます。
また、電気泳動中の自動サンプル回転機能により電場のムラをなくし、サンプル全体を均一に透明化することができます。
マウス全脳
透明化した脳
（Easy-ClearとEasy-Indexを使用）
ˍ オールインワンの高速透明化システム
ˍ シンプルで使いやすい
ˍ LCDタッチスクリーンで簡単操作
ˍ サンプルバッファ（バッファA）と電極バッファ（バッファB）を使用
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YFPイメージング
透明化前に導入した蛍光マーカーの観察はもちろん、抗体の浸透がよいので透明化後の染色もきれいに行えます。
Anti-GFP（後標識）
GFP（前標識）
様々な組織を透明化できます。
左：透明化前、右：透明化後
マージ
心臓
肺
肝臓
腎臓
腸
π タッチパネルで装置をコントロール
π チャンバーに印加する電圧を設定
π 電気泳動のON/OFFサイクルをmsオーダーで設定
π サンプルに合わせバッファ温度を調整
π サンプルの電気的特性に合わせ自動回転を調整
π サンプルバッファ(A)と電極バッファ(B)の循環ポンプを制御
π 透明化チェックおよび電気泳動停止のためのプリセットタイマー
π 電極極性転換機能
π バッファオーバーフローのアラーム機能
タッチスクリーンコントロールパネル
π オールインワンでコンパクト
௙ᵝ
π 超高速透明化
電圧レンジ
DC 0 ~ 280V
電流レンジ
0 ~ 1.5A
電気泳動スイッチサイクル
50ms ~ GD\V
リザーバー
ࣂࢵࣇ࢓$: 1Lࠊ
外形寸法 (W x D x H, mm)
350 x 450 x 650
π カーボン発生せず
温度制御レンジ
ᐊ ~ 50 Ȕ
π 全自動システム
π サンプルへの安全性
π 低SDS消費量
π pH低下せず
ࣂࢵࣇ࢓%: 1L
π 簡単操作
π 特許申請中
Easy-Clear用バッファ
1.
ࢧࣥࣉࣝࣂࢵࣇ࢓Aࠊ㟁ᴟࣂࢵࣇ࢓B (2 ࣎ࢺࣝ)
仕様
内容量
1L
-- 5
5 --
Easy-Gel®
ハイドロゲル重合システム
CLARITYでは組織から脂質を除去してもタンパク質などの分子は固定
されたままです。これにはハイドロゲルと組織の重合が必要です。
しかしながら、このステップの成功には安定した温度管理、適切な
振とう、十分な脱気が不可欠です。技術的な問題でこれを正しく行え
ないと満足な実験結果につながりません。
Easy-Gel®はこれをシンプルに実行します。Easy-Gel®は重合開始剤VA-044によるゲル化を50mlチューブ内で行うために温度を
正確に制御します。サンプルにより振とうのスピードを調整できます。最も重要な点は、Easy-Gel®では各サンプルチューブが
吸引ポンプに接続されており、完全な脱気を継続的に、確実に行うことができます。
また、Easy-Gel®はハイドロゲル重合の他に、ウォッシングや免疫染色といったステップにも使うことが可能です。
π 窒素ガス不要
π 個別温度制御
仕様
温度範囲
ᐊ ~ 50 Ȕ
π 個別脱気制御
振とうスピード
0 ~ 120 RPM
π 振とう制御
⬺Ẽ
0 ~ - 70 kPa
π 任意の50mlコニカルチューブ使用可
チューブ
ࢥࢽ࢝ࣝ, 8 x 50ml
π タッチスクリーン
π 特許申請中
Easy-Passive®
免疫染色システム
π 個別に温度制御
π 一度に10本の50mlチューブを使用可
π 振とう制御
π 簡単操作
仕様
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温度範囲
ᐊ ~ 50 Ȕ
振とうスピード
0 ~ 120 RPM
チューブ
ࢥࢽ࢝ࣝ, 10 x 50ml
Easy-Mount®
透明組織用イメージングチャンバー
Easy-Mountイメージングチャンバーは厚み8mmまでの透明組織を保持可能で、正立顕微鏡用と倒立顕微鏡用の2タイプを
用意しております。
π 任意のレンズと使用可能
π シンプルな使い勝手
π 特許申請中
仕様
最大サンプル厚み
8mm
スペーサー
1mm, 2mm, 3mm, 4mm, 5mm, 6mm, 7mm
カバーガラス
෇ᙧ, 25mm
材質
࢔࣑ࣝྜ㔠, ࢔ࢡࣜࣝ
Easy-Index®
屈折率調整透明化試薬
サンプルから脂質を除去した段階では屈折率のミスマッチにより完全に透明ではありません。Easy-Index®に浸すことで屈折率
を均一にし、サンプルをより透明にしてイメージングに最適な状態にします。
π リーズナブルな価格
π 浸けたままイメージング
π CLARITYサンプルの屈折率調整に最適
π CLARITY用レンズに使用可能
π 無害
仕様
内容量
50ml
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オーダーインフォメーション
Easy-Clear 組織透明化システム
EC-1001
Easy-Clear 組織透明化システム (1式)
Easy-Clear メインシステム x1
半透膜 x4
バッファA x2, バッファ B x2
サンプルホルダー x1
スライスサンプルホルダー x1
半透膜プッシャー x1
EC-Z1001
EC-Z1002
EC-Z1003
EC-Z1005
EC-Z1006
EC-Z1007
交換用電極 x2
半透膜 x10
バッファ A x10 (1箱) , バッファ B x10 (1箱)
サンプルホルダー x3
スライスサンプルホルダー x3
半透膜プッシャー
Easy-Gel ハイドロゲル重合システム
EG-1001
Easy-Gel ハイドロゲル重合システム (1式)
Easy-Gel メインシステム x1
吸引ポンプ x1
シリコンチューブ x1
EG-Z1001
EG-Z1002
バキュームポンプ
シリコンチューブ
Easy-Passive 免疫染色システム
Easy-Passive 免疫染色システム (1式)
EP-1001
Easy-Passive メインシステム x1
Easy-Mount 透明組織用イメージングチャンバー
Easy-Mount 透明組織用イメージングチャンバー, 正立顕微鏡用 (1式)
EM-1001
EM-2001
Easy-Mount 透明組織用イメージングチャンバー, 倒立顕微鏡用 (1式)
Easy-Mount チャンバー x1
シリコンガスケット x1
スペーサー(1mm, 2mm, 3mm, 4mm, 5mm, 6mm, 7mm) x1
EM-Z1001
EM-Z1002
EM-Z1003
EM-Z1004
Easy-Mount透明組織用イメージングチャンバー、正立顕微鏡用
Easy-Mount透明組織用イメージングチャンバー、倒立顕微鏡用
シリコンガスケット
スペーサー(1mm, 2mm, 3mm, 4mm, 5mm, 6mm, 7mm)
Easy-Index 屈折率調整透明化試薬
EI-Z1001
Easy-Index 屈折率調整透明化試薬 (1瓶, 50ml)
Live Cell Instrument
www.brck.co.jp
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㼀㻱㻸㻦㻌㻜㻥㻞㻙㻢㻞㻢㻙㻣㻞㻝㻝
mail: [email protected]
㻲㻭㼄㻦㻌㻜㻡㻞㻙㻥㻟㻞㻙㻢㻣㻡㻡
㻲㻭㼄㻦㻌㻜㻟㻙㻟㻤㻢㻝㻙㻣㻜㻞㻞
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