JL840886 DE.indd - Thermo Fisher Scientific

Gesamtbilirubin-Reagens
PRODUKTZUSAMMENFASSUNG
Stabilität
Linearbereich
Probentyp
Methode
Reagenzvorbereitung
:
Bei 2 bis 8 °C bis Ablaufdatum
:
bis 342 µmol/l (20,0 mg/dl)
:Serum
:Endpunkt
:
Wird gebrauchsfertig geliefert.
Symbole der Produktkennzeichnung
Autorisierte Vertretung
Temperaturgrenzen
In-vitro-Diagnostikum
Verwendbar bis/Verfallsdatum
Chargencode/Chargennummer
Bestellnummer
Gebrauchsanweisung
beachten
VORSICHT. Gebrauchsanweisung
beachten.
Hergestellt von
Ätzwirkung
ANWENDUNGSBEREICH
In-vitro-Diagnostikum. Für die quantitative Bestimmung des Gesamtbilirubins
in Serum.
3. Wenn die Reagensextinktion bei manueller Bestimmung bei 540 nm größer
als 0,100 ist, hat sich das Reagens möglicherweise verschlechtert und sollte
nicht verwendet werden.
ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG
Bilirubin, ein Produkt der Zerstörung roter Blutkörperchen, ist ein Gallenpigment,
das normalerweise im Blut zu finden ist. Die durchschnittliche Lebenserwartung
roter Blutkörperchen beträgt 120 Tage. Aufgrund ihres Verfalls werden ca. 6 g
Hämoglobin pro Tag freigesetzt. Retikuloendotheliale Zellen von Milz, Leber und
Knochenmark phagozytieren gealterte rote Blutkörperchen und verwandeln das
freigesetzte Hämoglobin in Bilirubin.1 Serumalbumin verbindet sich mit Bilirubin
und transportiert es zur Leber, wo es metabolisiert wird.
Erhöhte Serumbilirubinspiegel können auf eine Störung der Ausscheidefunktion
der Leber, auf übermäßige Hämolyse oder eine Obstruktion des Gallenwegs
hinweisen. 2 Hyperbilirubinämie kann auch mit obstruktivem Ikterus,
hämolytischem und hepatischem Ikterus, infektiöser Hepatitis und perniziöser
Anämie in Verbindung gebracht werden.
PROBENENTNAHME UND HANDHABUNG
Serum: Die empfohlene Probe weist frisches, nicht hämolysiertes Serum auf.1 Das
Serum unverzüglich von den Blutkörperchen trennen, um die Hämolyse zu minimieren.
Lagerung: Serumproben sind vor Lichteinfall zu schützen. Direkter Sonnen- oder
Weißlichteinfall können innerhalb einer Stunde eine Verringerung des Bilirubins um
50 % verursachen.1 Es wird empfohlen, dass Proben wie in NCCLS4 (H3, H4, H18)
oder gleichwertigen Publikationen beschrieben entnommen und verarbeitet werden.
Serumbilirubin ist bei Lagerung bei 2 bis 8 °C bis zu einer Woche und bei tiefgekühlter
und vor Lichteinfall geschützter Lagerung ca. drei Monate stabil.1
FUNKTIONSWEISE
Dieses Reagens ist eine Variation der elastischen Methode von Van den Bergh
und Mueller.3 Sowohl konjugiertes als auch freies Gesamtbilirubin wird mithilfe
eines stabilisierten Diazoniumsalzes von 3,5-Dichloroanilin gemessen, das mit
Bilirubin reagiert und Azobilirubin mit maximaler Extinktion bei 540 nm bildet.
Als Reaktionsbeschleuniger werden oberflächenaktive Substanzen verwendet.
Die Konzentration vorhandenen Bilirubins ist direkt proportional zur Extinktion
des spektrophotometrisch bei 540 nm gemessenen Azobilirubins.
REAGENSZUSAMMENSETZUNG
Wirkstoff
Konzentration
3,5-Dichlorophenyldiazoniumtetrafluoroborat0,36 mmol/l
oberflächenaktive Substanzen
Gefahrensymbol: Ätzwirkung
Signalwort: Gefahr
Erklärungen zu Gefahren
H318 Verursacht schwere Augenschäden
Vorsichtshinweise – Prävention
Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Schutzbrille/Gesichtsschutz tragen
Vorsichtshinweise – Reaktion
Augen
BEI AUGENKONTAKT: Für einige Minuten behutsam mit Wasser spülen.
Kontaktlinsen entfernen, soweit welche vorhanden und mühelos herauszunehmen
sind. Weiter spülen
Unverzüglich den GIFTNOTRUF oder einen Arzt rufen
Vorsichtshinweise – Lagerung
Keine
Vorsichtshinweise – Entsorgung
Keine
Nicht anderweitig klassifizierte Gefahren
Nicht zutreffend
Unbekannte Toxizität
0,01 % des Gemisches bestehen aus einem oder mehreren Wirkstoffen unbekannter
Toxizität
Sonstige Angaben
Verursacht leichte Hautreizungen
Schädlich für Wasserorganismen
Weitere Angaben sind dem Produktsicherheitsdatenblatt zu entnehmen.
REAGENSVORBEREITUNG
Das Reagens wird gebrauchsfertig geliefert.
LAGERUNG UND STABILITÄT
Das Reagens ist bei Lagerung bei 2 bis 8 °C und fest verschlossen bis zu dem
auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatum haltbar. Reagens vor Lichteinfall
schützen.
Anzeichen für eine Qualitätsminderung des Reagens:
1. Das Reagens sollte klar und farblos bis hellgelb aussehen.
2. Trübung oder Nichterreichen zugewiesener Werte bei analysierten
Kontrollseren könnten Anzeichen für eine Verschlechterung sein.
BEREITGESTELLTE MATERIALIEN
Gesamtbilirubin-Reagens
ERFORDERLICHE, ABER NICHT IM LIEFERUMFANG ENTHALTENE
MATERIALIEN
1. Thermo Data-Cal oder gleichwertig.
2. Thermo oder gleichwertige Kontrollmaterialien für normale und abnormale Assays.
3. Pipetten für die exakte Abgabe von 1,0-ml-Volumina.
4. Mikropipetten für die Abgabe von 0,05-ml-Volumina.
5. Geeignetes manuelles Gerät, das für eine Ablesung bei 540 nm kalibriert ist.
6. Analysegerät Hitachi 704® oder gleichwertig mit Handbuch und Zubehör.
ASSAYVERFAHREN
PARAMETER DES GERÄTS HITACHI 704
Test
Gesamt-Bil
Assay
1 PUNKT:6-0
Probevolumen
20
R1-Volumen
400-20-NO
R2-Volumen
0-20-NO
Wellenlänge
660/546
Kalib. Methode
Linear-0
STD (1) Konz.-Pos. 0-1
STD (2) Konz.-Pos. ( )-2
STD (3) Konz.-Pos. ( )-3
STD (4) Konz.-Pos. ( )-4
STD (5) Konz.-Pos. ( )-5
STD (6) Konz.-Pos. ( )-6
Einheit
mg/dl
SD-Grenze
0,1
Duplizierungsgrenze 200
Sensitivitätsgrenze
0
ABS-Grenze (Anst./Abst.)
0 (Anstieg)
Prozon-Grenze
0 (untere)
Erwarteter Wert
0,0 bis 1,5
Gerätefaktor
1,00
Die oben aufgeführten Parameter sollten bei der Programmierung des Hitachi 704
verwendet werden. Weitere Anweisungen finden Sie im Gerätehandbuch.
MANUELLES VERFAHREN
1. Geben Sie für jede Probe 1,0 ml Gesamt-Bilirubinreagens in gekennzeichnete
Teströhrchen.
2. Fügen Sie 0,05 ml Kalibrator, Kontrolle und Probe zum jeweiligen Teströhrchen
hinzu. Sofort mischen. Verwenden Sie 0,05 ml entionisiertes Wasser als Probe
für die Blindprobe.
3. Bei Reaktionstemperatur 5 Minuten lang inkubieren.
4. Stellen Sie die Wellenlänge des Geräts auf 540 nm ein. Nullen Sie mit der
Blindprobe.
5. Lesen und zeichnen Sie die Extinktion der Proben auf.
BLINDPROBE
Blindproben sind für einige trübe, ikterische und hämolysierte Proben erforderlich.
Dazu gehören viele Kontrollseren und Kalibratoren.
1. Geben Sie für jede zu verblindende Probe 1,0 ml Kochsalzlösung in
gekennzeichnete Teströhrchen.
2. Fügen Sie 0,05 ml jeder zu verblindenden Probe hinzu. Mischen und inkubieren
Sie 5 Minuten lang bei Reaktionstemperatur.
3. Stellen Sie die Wellenlänge des Geräts auf 540 nm ein. Mit Kochsalzlösung nullen.
4. Lesen und zeichnen Sie die Extinktion der Blindprobe auf. Subtrahieren Sie
diese Extinktion von Schritt 5 im Abschnitt über das manuelle Verfahren. Die
korrigierte Extinktion wird bei der Berechnung der Ergebnisse verwendet.
STABILITÄT DER ENDGÜLTIGEN REAKTIONSMISCHUNG
Das endgültige gefärbte Produkt ist bei kontrollierter Zimmertemperatur (15
bis 30 °C) 60 Minuten lang stabil. Das Hitachi 704 liest jeden Standard und
jede Probe gleichzeitig.
BERECHNUNG DER ERGEBNISSE
Das Analysegerät Hitachi 704 berechnet die Ergebnisse automatisch.
Verwenden Sie die nachfolgende Formel zur Berechnung der GesamtBilirubinkonzentration einer Probe bei Verwendung des manuellen Verfahrens.
Extinktion von Unbekannt
Gesamt-Bilirubin = —————————————————— x
Extinktion des Kalibrators
Beispiel:
Extinktion von Unbekannt =
0,052
Extinktion des Kalibrators =
0,180
Kalibratorwert
=5,2 mg/dl
0,052
Gesamt-Bilirubin = —————
0,180
x
Kalibratorwert
5,2 = 1,5 mg/dl
HINWEIS
Einheitskonvertierung: mg/dl x 17,1 = µ
mol/l.
KALIBRIERUNG
Bei diesem Verfahren ist es nicht erforderlich, eine Standardkurve zu bestimmen,
da die Reaktion bis 342 µmol/l (20,0 mg/dl) linear ist. Allerdings sollten bei der
Analyse jedes Satzes von Unbekannten eine Blindprobe und ein Kalibrator
verwendet werden.
QUALITÄTSKONTROLLE
Um eine ausreichende Qualitätskontrolle sicherzustellen, müssen normale und
abnormale Kontrollen mit gemessenen Werten als unbekannte Proben wie folgt
durchgeführt werden:• Mindestens alle acht Stunden.
• Wenn ein neues Fläschchen Reagens verwendet wird.
• Nach einer vorbeugenden Wartung oder einem Austausch einer kritischen
Komponente.
Kontrollergebnisse, die über den oberen Grenzwert oder unter den unteren
Grenzwert der festgelegten Bereiche fallen, zeigen an, dass der Assay
möglicherweise außerhalb der Fehlergrenzen liegt.
In solchen Situationen werden die folgenden Behebungsmaßnahmen empfohlen:• Wiederholen Sie dieselben Kontrollen.
• Wenn die Ergebnisse der wiederholten Kontrolle außerhalb der Grenzen liegen,
bereiten Sie ein frisches Kontrollserum vor, und wiederholen Sie den Test.
• Wenn Ergebnisse weiterhin außerhalb der Fehlergrenzen liegen, führen Sie
eine neue Kalibrierung mit einem frischen Kalibrator durch und wiederholen
Sie dann den Test.
• Wenn Ergebnisse weiterhin außerhalb der Fehlergrenzen liegen, führen Sie
eine neue Kalibrierung mit einem frischen Reagens durch und wiederholen
Sie dann den Test.
• Wenn die Ergebnisse weiterhin außerhalb der Fehlergrenzen liegen, wenden
Sie sich an den technischen Kundendienst oder den Händler vor Ort.
EINSCHRÄNKUNGEN
1. Informationen zu Einschränkungen für dieses Verfahren finden Sie
in den Abschnitten „Lagerung und Stabilität“, „Verschlechterung“,
„Probenentnahme“, „Störsubstanzen“, „Probenlagerung“, „Stabilität der
endgültigen Reaktionsmischung“ und „Linearität“.
2. Bilirubinkalibratoren in Chloroform dürfen bei diesem Verfahren nicht
verwendet werden, da keine mit Chloroform mischbaren Lösungsmittel
eingesetzt werden.
3. Bilirubin ist extrem lichtempfindlich. Für optimale Stabilität müssen Kalibrator,
Kontrolle und unbekannte Proben vor Lichteinfall geschützt werden.
STÖRSUBSTANZEN
1. Bei Verwendung eines Hitachi 704 oder eines manuellen Geräts bis zu 1335 mg/dl
Triglycerid wirkt sich Lipämie bei diesem Verfahren nicht störend aus.
2. Bei Verwendung des Hitachi 704 verursachen Hämoglobinspiegel von
83 mg/dl oder darüber signifikante Störungen bei einem Bilirubinspiegel
von 1,1 mg/dl. Ein Hämoglobinspiegel von bis zu 398 mg/dl wirkt sich bei
einem Bilirubinspiegel von 5,1 mg/dl nicht signifikant störend aus.
Bei einer manuellen Verwendung verursachen Hämoglobinspiegel von
83 mg/dl oder darüber eine signifikante Störung bei einem Bilirubinspiegel
von 1,3 mg/dl. Ein Hämoglobinspiegel von bis zu 204 mg/dl wirkt sich bei
einem Bilirubinspiegel von 5,3 mg/dl nicht signifikant störend aus.
3. Young hat die Auswirkungen von Arzneimitteln auf Serumbilirubinspiegel
untersucht.5
Fisher Diagnostics
ein Geschäftsbereich der Fisher Scientific Company, LLC
ein Bestandteil von Thermo Fisher Scientific, Inc.
Middletown, VA 22645-1905, USA
Tel.: 800-528-0494
540-869-3200
Fax: 540-869-8132
WMDE
Bergerweg 18
6085 AT Horn
Niederlande
JL840886-de (R0)
ERWARTETE WERTE
NORMALER BEREICH6
0,0 bis 1,5 mg/dl
Die angegebenen Werte sind für den erwarteten Bereich für diese Methode
repräsentativ und sollten nur als Richtlinie gelten. Es wird empfohlen, dass jedes
Labor diesen Bereich überprüft oder ein Referenzintervall für die betroffene
Population ableitet.7
LEISTUNGSDATEN
Die Leistungsmerkmale wurden auf einem Analysegerät Hitachi 704 und mit dem
manuellen Verfahren bestimmt. Wenn das Produkt auf einem anderen Analysegerät
verwendet wird, sollte der Benutzer Leistungsmerkmale bestimmen.
PRÄZISION
Die Intratestlauf-Reproduzierbarkeit wurde durch die 20-fache Analyse von drei
Stufen von Kontrollseren bestimmt.
Intratestlauf/Hitachi 704
NIEDRIG
MODERATE
HOCH
MITTEL
STD. ABW.
0,60 mg/dl0,00
5,90 mg/dl0,05
15,20 mg/dl0,10
CV %
0,00
0,85
0,66
Intratestlauf/Manuell
NIEDRIG
MODERATE
HOCH
MITTEL
STD. ABW.
1,0 mg/dl0,05
5,9 mg/dl0,13
14,7 mg/dl0,23
CV %
5,00
2,20
1,56
Die Intertestlauf-Reproduzierbarkeit wurde durch die Analyse von drei Stufen von
Kontrollseren als Einzelpunkte über 10 Testläufe in einem Zeitraum von 4 Tagen bestimmt.
Intertestlauf/Hitachi 704 NIEDRIG
MODERATE
HOCH
MITTEL STD. ABW. 0,63 mg/dl0,07
5,70 mg/dl0,07
14,50 mg/dl0,17
CV %
1,11
1,20
1,20
Intertestlauf/Manuell
NIEDRIG
MODERATE
HOCH
MITTEL
STD. ABW.
1,1 mg/dl0,07
6,0 mg/dl0,05
15,2 mg/dl0,32
CV %
6,40
0,83
2,10
VERGLEICH
Ein Vergleich des Thermo Gesamt-Bilirubins Nr. 1245 (y) mit Gesamt-Bilirubin Nr. 1240 (x)
wurde mit 169 Proben in einem Bereich von 0,1 bis 19,5 mg/dl auf dem Hitachi 704
durchgeführt. Die sich daraus ergebende Korrelationsgleichung ist y = 1,00x –
0,04 mit einem Korrelationskoeffizienten von 0,999.
Ein Vergleich des Thermo Gesamt-Bilirubins Nr. 1245 (y) mit Gesamt-Bilirubin
Nr. 1240 (x) wurde mit 167 Proben in einem Bereich von 0,2 mg/dl bis 21,6 mg/dl
manuell durchgeführt. Die sich daraus ergebende Korrelationsgleichung ist y = 0,99 –
0,01 mit einem Korrelationskoeffizienten von 0,999.
LINEARITÄT
Die Linearität reicht bis zu 342 µmol/l (20,0 mg/dl). Proben, die die Linearität
überschreiten, sollten mit Kochsalzlösung verdünnt und wiederholt werden.
Multiplizieren Sie bei Berechnung der Unbekannten die Konzentration durch den
Verdünnungsfaktor.
SENSITIVITÄT
Basierend auf der Geräteauflösung von A = 0,001 des Hitachi 704 hat das Thermo
Gesamt-Bilirubinreagens eine Sensitivität von 0,07 mg/dl. Die analytische Sensitivität
beträgt 0,1 mg/dl.
Basierend auf der Auflösung von A = 0,001 eines manuellen Geräts hat das Thermo
Gesamt-Bilirubinreagens eine Sensitivität von 0,03 mg/dl. Die analytische Sensitivität
beträgt 0,1 mg/dl.
LITERATUR
1. Tietz, N.W., „Fundamentals of Clinical Chemistry“, 2. Ausgabe, W.B. Saunders,
Philadelphia, 1976, S. 1028–1044.
2. Annino, J.S., „Clinical Chemistry Principles and Procedures“, 2. Ausgabe, Little,
Brown and Company, Boston, 1960, S. 203.
3. Van den Bergh, A. und Mueller, P., Biochem. Z. 77, 1916, S. 90.
4. NCCLS: „Standard Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens
by Venipuncture (H3)“, „Standard Procedures for the Collection of Diagnostic
Blood Specimens by Skin Puncture (H4)“, „Standard Procedures for Blood
Specimen Processing (H18)“, National Committee for Clinical Laboratory
Standards, Villanova, PA.
5. Young, D. S.: „Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests“, 3. Ausgabe, AACC
Press, Washington, D.C., 1990, S. 3-61 bis 3-72.
6. Henry, R., Cannon, D.C., und Winkelman, J.W., „Clinical Chemistry Principles and
Technics“, 2. Ausgabe, Harper and Row, Hagerstown, 1974, S. 1042.
7. Wachtel M et al, „Creation and Verification of Reference Intervals“. Laboratory
Medicine 1995; 26:593–7.
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Roche Diagnostics. Alle anderen Marken sind Eigentum des Unternehmens Thermo Fisher Scientific Inc
und seiner Tochtergesellschaften.
Nachbestellungsinformationen
Bestellnr.
1245-250
Konfiguration
2 x 125 ml

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