埼玉県公害センター研究報告〔28〕58∼53(1993) 糞便汚染指標としてのコプロスタノールに関する研究 その2.公共用水域調査 高橋 基之 要 旨 コプロスクノールを指標とする糞便汚染調査を,埼玉県内の公共用水域21地点について行った0 調査した河川のコプロスクノール濃度を環境基準の各類型別にみると,AA類型の荒川・中津 川合流点前では不検出,A類型地点では,越辺川い今川橋で下水処理排水の影響を確認できた他 は,0.1〃g/ゼ以下の微量汚染であったo B類型地点は,汚濁河川である霞川の影響を強く受け ている入間川・富士見橋を除き,1描/ゼ以下の汚染であった0汚濁の進んだE類型地点では′ 不老川t入曽橋の19.5〃g/路最高に1■5〃g/ゼ以上と,糞便汚染が進んでいることを確認でき た。 コプロスクノール濃度と他の水質項目間の相関を求めたところ,大腸菌群数有機汚潮旨標の BOD,CODなどと良い相関を示した。 今回の結果から,コプロスクノールは,公共用水域の糞便汚染を化学的に証明する有効な指標 物質であることがわかった。 究2)以来,内湾の海水や底質3),河畔)などで広く行 1 はじめに われ,糞便汚染の履歴や汚染度を衰すものとして,そ 河川水の糞便汚染ほ,病原性細菌や寄生虫,ウイル の指標性を十分に証明してきた。 スにより人に健康被害を及ぼすおそれがあることか 埼玉県内の公共用水域における糞便汚染甚大腸菌群 ら,その監視が大変重要な意味を持つ。これまでその 数でみると,ここ数年環境基準達成率は3摘前後と他 評価は 糞便性大腸菌をはじめとする細菌試験がほと の項目に比べ非常に低く,方法や基準値を再検討する んどで,公共用水域の環境基準についても大腸菌群数 必要がある。そこで県内の公共用水域21地点におい が公定法となっている。しかし,糞便汚染指標として て,コプロスクノール濃度から糞便汚染を評価し,あ これらの微生物を使うことには大きな疑問が生じてい わせて他の水質項目との相関を求めることとした。 る。まず河川環境中での様々な因子により細菌はその 致を増減するため,糞便汚染の定量的な判断が困難な こと,さらに下水放流の際の塩素消毒により細菌が死 2 ■調査方法 滅し,検出できなくなることが挙げられる。特に排泄 調査は埼玉県内公共水域21地点について,1992年9 物からの腸管系ウイルスは,塩素処理などでは完全に 月から10月にかけて行った0調査地点を環境基準の類 不癌化しないため,依然として水系感染の危険をはら 型指定別に見ると,AA・l地点,A・6地点 B・ むことが指摘されている−)。 そこで新たな糞便汚染の化学的指標物質としてコプ と,人為的汚染のない河川上流から,汚濁の進んだ都 ロスクノール(5β一Cbolestan−3β−01)を使用 市河川まで広く対象とした。 6地点,C・1地点,E・6地点 無指定・1地点 する試みが,1967年Mur七aughとBunchによる研 − 50 − 調査項目は以下の通りである。また,分析に使用し た試薬,器具,コプロスクノールおよびコレステロー ルの測定方法などは,‘‘その1.コプロスクノールの 扁品忘芯詣 ̄【∴ ̄■∴五芸「で閻 ̄て三岳加配P(づ ■ Coprostanol 水溶解度”に準じた。 :JIS K OlO2 12.1 DO 〝 32 BOD // 21 COD // 17 SS :環境庁告示第59号 付表6 EC :JIS K OlO2 13 Cl ̄ :衛生試験法 T−N :環境庁告示第59号 付表7 T−P :環境庁告示第59号 付表8 MBAS :JIS K OlO2 30.1 −Ⅰ・・nu”””﹄ pH 皿 0 0 0 囲0 醐0 0 0 0 5 5﹂川﹁3一7︼・・・■一ヽ︼ :JIS E OlO1 7 L コレステロール . 〝 水温 1.1T ﹄ 遍 ⋮j・・U・・・・t・・・川場町 l1.﹂ 10 8 = − − − − ・且 08 掴 銅 00 00 0 0 AU ︻U O O q J 血 1 q 7 6 コプロスタノール:GC/MS法 大腸菌群数 :最確数定量法 3 結果および考案 環境試料におけるコプロスクノールの分析で問題と なるのは,構造の類似したコレステロール(Cbolest −5−en−3β【0托 さらにコプロスクノールのエ ビマーであるコレスクノール(5α・【Cholest且n→ 3β−01)との分離である。コレステロールはコプロ 図1 ステロール賛のマススペクトル スクノールの前駆物質であるが,食物や動物脂肪にも 含まれるため,これが直接糞便汚染を示唆するもので はない。コレスクノールほ,コレステロールの5番炭 素に水素がα一配位したコプロスクノールの立体異性 体であり,コレステロール中に約2タす含まれてい る5〕。これらのマススペクトルを図1に示す。また, b lリ 1tll h ⊂亡 標準試料と河川水のGC/MSによるタロマトゲラム 封 柑( 】 0 0 ヨ を図2に示す。コプロスクノールとコレステロールは 2 58 8 8 0 Z q OO 捕 分子構造が類似しているため,その分離,定量にはこ − ロ】 4J ■ ・ ■ ・ く ⊃ 一 r= U 用 ら l∫ つ 15 08 q ロ れまでシリル誘導体化3・4)を必要としたが,本法の 壊 寧 日 〝 E 几 ) ■ . づ ( コ 冨 ナノ d く く ) h 亡 1 8 一 ⊂ i h 同 日 l ( 】 88 0 0 キャピラリーGC/MSでは直接に分析が可能であっ む ■ 一 1 一 つ ( J = 臼 た。コレスクノールはコプロスタノwルとほとんど同 じマススペクトルを示すが,保持時間がコプロスター 158呼 ルより約20秒長いため,支障なく分析できた。図2の 川 80G占 新河岸川 いろは坊 508QQ・ 河川水は,下水処理場排水や浄化槽排水,生活雑排水 ロ t甲 ; 一 郎五==玉亙二二道虹二 ⊥止虹⊥二由L ⊥」由 などの流入で汚濁している新河岸川こいろは橋を例と したが,共存物質による妨害もなく定量が可能であった。 今回調査した地点の水質測定結果を表1に示す。環 図2 標準試料と河川水のGC/MSクロマトグラム 〟 51− 間川・富士見橋で3.8〃g/且 他は1〃g/ゼ未満で あった。富士見橋は約1血上流で霞川が合流してい 墳墓準類型指定AAの荒jlい中津川合流点前では,コ プロスクノールは検出されなかった。大腸菌群数は, 540MPN/100万諺と環境基準値50MPN/100適を大 る。この霞川涜域は下水道の整備が遅れているため, きく越えているが.例年達成率は50%程度で,糞便汚 生活系の雑排水と浄化槽排水,畜産系排水の占める割 染よりも自然負荷による影響が大きいと考えられる。 合が多くなっている。今回の調査でも,類型指定され ていない霞川■大和橋で13.2〃g/ゼの高濃度を示し A類型地点のコプロスクノール濃度は,越辺川・今 ており,富士見橋上流の豊水橋の値0.4〃g/ゼと比較 川橋の0.4〃g/ゼを除き,0.1〃g/ゼ以下であった0 今川橋は約1.5km上流に下水処理場が位置するため, その排水の影響を受けていると考えられる。大腸菌群 すると,富士見橋の水質に相当の影響を及ぼしている ことが確かめられた。 数は全地点で環境基準値1000MPN/100仇gを超過し E類型では不老川■入曽橋の19.5〝g/ゼを最高に た。大腸菌群は全てが糞便由来ではないとしても,上 1.5〃g/ゼ以上のコプロスクノールを検出した0どの 涜に浄化槽などの発生源があることを考え合わせる 地点も浄化槽排水や下水処理場排水の流入割合は多 と,コプロスクノールは検出感度の点で大腸菌群数に く,特に不老川流域の整備の遅れを裏付ける結果と 劣っていると思われる。 なった。 コプロスクノールと他の水質との濃度相関を求めた BおよびC類型地点のコプロスクノール濃度は,入 表1 公共用水域調査結果 両 川 名 嘉 川 荒川 入 間川 延 辺川 高鳥川 赤平川 濱慕川 入 榔 Il 人世川 枝川 庭木川 市野川 和田吉野川 市 野 川 新河岸川 白子 川 最 冒川 東 員川 寧漫川 不 孝川I 石川 . 諜 水地 点 ヰ 剰 Il合読 点 J 葬集積 ; 拾食 セ ン ター 前 三 今川 描 ; 天 神凛 赤 平椙 常谷 楕 菩 士見ヰ 王 水# 発川合藻点前 塵芥太* 天 神層 看見薫 徒歩棲 小ろは凛 ≡封礫 某嶺 部県境旦点 栗橿 ふ 営繕 : 大和 葦 地 点 .渾 聖 蕃・ 号 1 1 二A A 10 : A 2g A 31 . Å 35 Å 42 ;A 43 A 2了 B 王8 ▲ B ココ B 3畠 ・ B 4日 . B ヰ1 B 3 ヨ C 右5 E 6 7 E 右8 E 6ヨ . E 了O E 丁ヰ E ヨ7 水温 7 一口ユタノ ースラローふ 一 C I 〟 g/ 止 g/L 1.g 1日.6 0 0・ 24 4 0 口 2.0 2 7 .2 0 0 3 .8 8 l 3 .1 1丁.丁 ヨ 口 27 .2 0 25 .9 0 ヨ 2 .8 □ 26 1 8 ヰ.4 27 .6 ユ8 王2 .3 ヱ6 .5 0 ヨ4 4 .3 0 lT .1 1 .3 26 .3 0 ヨq l _丁 ほ .0 0ヨ g .5 8 1丁.3 l .8 ヨ 巳 8 .3 18 7 ヨ 16 .旦 H .ヰ Zヨ 8 .Z 1 6 .8 3 巳 6 17 0 1ヱ.1 1T ,8 7 .6 2 ヨヱ 巳 丑.0 1旦.る 巴 ヨ 三島.5 ヨ5 .1 q 2 7 .ヨ 王3 .5 lコ p H D O tg /L 8 .8 18 .8 8 .2 10 .0 名.2 9 8 l0 .0 8 .l 凹 T .且 7 S 且ヰ 8 .9 9 7 了 7 巳 8 .3 了,6 1 1 .ロ g .1 ‖ .8 1 8 .Q T .丁 3 .皇 5 .1 T .8 畠.5 6 .5 3 .8 7 .3 8 T 了 ロ 了 7 ロ 巳 7 7 B O D 1 g /L 0 河 口 2 ロヨ ロ 8 8 8 ロコ ロ口 ヨ 8 6 ヨ T ヨ ロ 口 8 ヨ 巴 了 5 0 35 8 田 q C O D ▼g/L 1ヨ . 2 .l 1 .7 2 .0 l.0 1. 9 2 4 □ 7 丁 8 ヨ 丁 ヨ 6 ¢ ヨ 5 皇 三三 ‖ S S E C 〃 S/亡霊 1 ヱ0 180 1石0 2 0() 190 19 0 21 0 30 0 ヱ3 0 2 10 0 27 【 I 36 0 21 u 3 38 曾 3 了0 口 l エロ 山 8 28 か川 9 ロ 3 3Q u ヰ90 4 占0 …1 538 10 暮g几 0 0 0 之 0 0 0 右 u ロ C l ■g /L 1 .4 4 .6 2 .4 9 .S 3 .5 4 9 7ヨ . 2l 0 三三 0 3¢8 5丁0 T N ■g 几 0 .4 1 1.0 0 1.Q q 2. 50 1 .00 1 .20 1 .20 3 .gO ヱ.ヨ0 2 .28 1 .相 2 .9 0 3 .2 8 3 .T O 8 .胡 古、8 Q 8 .10 ヨ.即 12 .80 1 2 .t柑 竜.王8 T P 「三 先S 義g/L 0 .O 13 0 .0 4丁 0 .8 4 l Q .8 T O 0 .8 ヱ9 Q . 055 8 . 0田 0 8 Q 0 0 8 8 0 0 8 0 4 丁Ⅰ ! 巳 2 8¢ 巳 ユ80 8 8! 沌 0 0 0 0 0 8 8 0 0 0 8 8 8 8 8 8 0 8 .11 0 巳.8 3 . TO ロ .85 C 81 1 . 川 /10叫 l 540 丁98 0 13(】 0( I 24 80 0 1 TO O 4 ヨ8 0 T qO O g ヱ踊 0 0 g2 8 00 1 18 0【l 1 30 00 g 28 80 ユ10 0 168 _ 中延 』 衰2 公共用水域各水質項目間の単相関係数 訂 「 爾 A S ! T P 竜 丁 訂 千 丁 「 T 竺 = 亡 ≡ 」 」 雲 B O ロ DO p H ‡ 書更 壬… 壬テ 暮 壬 王手 手‡ 王主 576招 5612網5 持 642ヨ 主暮銅 3 9838409 ま書 暮 重 土嚢 コ 71 日 ユタ 三三 ほ50l . 雪5ヨ増53 8. 59錮暑5 8 . ノー妄 8警 17 .・ 警 5竜 ・ 丁警 2 ぷ ……2 1日 ・ヰ1‡ iヰ ‡壬 ‡‡ L .92657ヰ L。 志 48 03 ▲ 昌品 。 コはテ 川■”■−・− b ぷ ;127旦」 L L 士 L。 蒜 51 し。ふ 5。L 8 5;5。6 2 L 8 3墨5王73 L 8 ふ 4 _旦 p=み H 8. 3≡7738 0. 232853 L8 . ヱ41丁 ‡ 呂8 L8 .46門3 士;8門3 L 。7; 需 品 z。L 。舶 柑 L。. 蒜 1。  ̄  ̄ i壬 DO 8. 6ヰ萱562 8. 51ヨ168 8 . 51ヨ5 ヨ 丁 8.看1 品 9 L 蒜 Ⅰ5 L T6;芸3TI L . 喜7;;6ヨふ 8;描 5 b 語 三三』諾 需 品 9 』 る壱; ;75 3 L 諾 ヱ2 』’ 糾;;。 話 7蒜 47 』.62; ;三関 ∈三 悪 8 L . ,蒜 lヨl SS b 3椚  ̄ 云1 b :5蒜 己C L T ̄  ̄ 丁蒜  ̄ ⊂1 諾 T N 潤 ;;16 2 L . 4㌫ T ̄ 宇 b .9蒜 ヱ雪b 諾 8T b . 38ヰ855ふ 66 b . 55;;。8 5 ∈.46;ヰ11。』孟 l;;5乃 E .8蒜 ヨ。』.1333銅 5 』.5品 5ふ 蒜 84 し 蒜 ヰI b .9蒜 叫 64 」 。3 ‡ 62 5…b .6蒜 _ 型」 有 蓋量 判定 「 B A S 』.55;モミ9き − 52− 暮 壬 ■ 意差 9∬ 以上 王: 孟蓋 95; 以上 ものを表2に示す。コプロスクノールはコレステロー 慮した理論的な水域別の管理基準値のようなものは提 ル,BOD,COD等の有機汚濁物監 さらに糞便汚染 唱できなかった。・しかし,コプロスクノールが化学試 の影響を受ける大腸菌群数と良い相関を示した。大腸 験であるということで,糞便汚染指標としての大きな 菌群を含む糞便由来のバクテリアとコプロスタノール 利点があることを確認できた。 は必ずしも良い相関を示さないという報告4・6〉に対 今回の調査結果を基に,各類型のコプロスクノール し,今回の調査地点においては,大腸菌群数との問に 濃度目標値を示すと,AA類型では不検出,A類型で 最も良い相関が見られた。その他にも,生活排水に由 は,利用目的としての水浴を考慮し公衆衛生の面から 来する汚濁項目のMBAS,T−N,T−Pと相関が見 0.1〟g/ゼ以下,B類型では上水道への利用もあるた られたが,塩素イオンとは95%以上の有意差は見られ ず,イオン類の総量の目安となる導伝率とも低い値と め1〃g/ゼ以下が適当と思われる。さらに,飲料水 源の河川に流入し,大きな負荷を与える下水処理場な なった。これらは,今回の調査対象についてのみ当て どでは排水基準を設ける必要もあると考えられる。 はまる結果であるが,埼玉県内の公共用水域において 河川水中におけるコプロスクノールの調査は,分析 は,有機再演と糞便汚染は密接に関係していると考え 操作の煩雑さと微量の検出が要求されることから,あ られる。 まり一般的に行われてこなかった。しかし,分解能に 優れ比較的操作の容易な四重極型GC/MSの普及か 今回の調査とコプロスクノールの化学的性質から, 糞便汚染の指標としてコプロスクノールを用いる利点 ら,コプロスクノールは今後様々な分野における糞便 を幾つか挙げることができる。まず,環境中や塩素処 汚染調査の一手法としての活用が期待される。 理で変化を受けず,分解も約一週間程度と比較的ゆっ おわりに,この研究を進める桟会を与えて下さり, くりであること,さらに硫酸添カロなどによる前処理で 多くの助言と協力を頂いた現環境部水質保全課の針谷 試料の保存も可能である。また,今回の方法では最短 さゆり主任に謝意を表します。 2時間で分析結果を得られることから,細菌試験より も迅速性に優れている。 一文 献 細菌試験と比較した場合,糞便汚染の検出感度が大 きな問題となるが,測定が煩雑で困難とされるウイル 1)矢野一好:水環境におけるウイルスの実態と水処 理,水道協会推誌,62〔肌15−21,1993 スについて試算すると次のようになる。人ほ1日に平 均0.2から1gのコプロスクノールを排出する5)。ま た腸管系ウイルスに感染した人は糞便1gあたり106 2)J.J.Murtaugh and R.L.Bunch:SteroIs as a measuTe Of fecalpollution,J,Water Pollut.Cont.Fed.,39,404−409,1967 粒子ものウイルスを1ケ月以上にわたって排出し続 け,人口の1割は常時感染している1)。仮に一日の糞 3)J.0.Grimalt et al.:Assessment of Fecal 便の量を100g,コプロスタノールの排出量を1g・と すれば,今回の定量下限値0.1〝g/gは100粛あたり SteroIs and Ketones asIndicators of Urban SewageInputs to CoastalWaters,Environl 1個のウイルスの検出に相当する。当然河川への流達 量は沈降,分解などにより減少するが,理論的にはこ Sci.Tecbno主リ24,357−363,1990 4)高屋真一:コプロスタノールを指標とした河川の し尿汚染,水質汚裔研究,7,510−516,1984 のように微量の糞便汚染の検出も可能と言える。 5)R.W.Walker et al.:Coprostanolas an iBdicator of 指calpollution,CRC Crl七1Cal 4 まとめ ReviewinEnv.Cont.,Apr.,91−112,1982 今回は,河川水域における各種の糞便由来微生物に 6)B.J.Dutka et al.:Relationship be七ween ついてまで調査していないため,コプロスクノールと bacterlal1ndica七ors of wa七er pollu七ion and 微生物試験の感度について比較することはできなかっ 指calsteroIs,Wat甜Resリ 8,1047 ̄1055,1974 た。またコプロスタノールについて,疫学的な面を考 一.53 −
© Copyright 2024 ExpyDoc