51-26 アフィニティーリガンド内包ヒドロゲノレ部分充填キャピラリーを用いる電気泳動分析徳島総大同線豊裕、久保箔也 O 大塚浩二京大院工 I 緒言 1 アフィニティキャピラリー電気泳動 (ACE) は，生体肉来の酵素等が有する特異的相互作用(アフプトアピジンを，モデル世料にはピオチンおよびイミノピオチンを用いた。イニティ)を利用して賦料の選択的分離を行う分析訟アルギン鮫ナトリウムは，高い生体適合性を有し仁" ~ である。 ACE 分析では，アフィニティリガンド (AL) の話加によって速やかにヒドロゲルを形成することが知を泳動液に酷加する手法と分隊キヤピラリー内に固定られている。キヤピラリー内に AL を含むアルギン陵ナ化する手訟の開発が主に進められてきた。後者の固定トリウム溶液を部分的に注入後!電気泳動によって C，告化訟ではを導入し， AL 内包アルギン酷ヒドログル部分充填キヤ AL が試料と共に移動しないため l 測定毎に高価な A工を消費せず， AL による検出妨害がないなピラリどの利点を有している。一方で l 固定化の操作が煩維を行い l レであり!固定化中にアフィニテイが失活する場合があ検出した。るなどの欠点も指摘されている。本研究では，これらを調製した。その後，試料を注入して ACE 分衡ザー励起蛍光 (ex!，引 11.488/520 nm) によって I 結果と考察 1 泳動機として 1 m MCaCl 0m Mglyc 凹 1I1 の問題を解決可能な固定化材料としてアルギン酷ヒド ( PH 10 . 5) ログルの利用を賦み， AL をその活性を維持したまま充填されたキャピラリーを作製し CE 分析を行った結果，キャピラリー内に簡使な手順で固定化する AL 内包ヒピオチンやイミノピオチンのピークが消失した四ドロゲル部分充填キャピラリーの調製と，それを用いたそデルタンパク質の ACE 分析について検酎を行った [ful."Ushima 主ら d即 1. Chem .201 4.86.5 9 7 7 ]0 とから l を用いてアピジンを含むヒドロゲルが部分的にこのこ形成されたヒドロゲルにアピジンが内包されていることとその活性が維持されていることがそれぞれ磁器された。また，フロンタル解析結果から注入したア I 実験 1 ACE 分析はキヤピラリー電気泳動装置ピジンが定量的に固定化されていることが明らかとなっ P/ ACEMDQ( BeckmanCOllltcr) を用いて行い，分磁キヤた。緩衝液を 15 1 1 M : HEPES ( PH 7.0) に藍更し，同様にピラリ AC E 分析を行った結果! イミノピオチンは保持されなかには内径 50μm 全長 40 cm 有効分隊長 30 ロn の内面無処理のフ斗ーズドシリカキヤピラリーった。 ( PO l Y l l l i c r oTcchnol 咋ic~) を使用した。泳動液には 1 1l叫ミノピオチンの選択的漫縮を達成した。 CaC1 2 を含む緩衝液を， AL にはアピジンおよびス卜レこの結果に基づいて， pH スイッチングによってイ