応用動物模型進行｢漢方薬改善代謝綜合症的 有効性及作用機理解明｣的研究 日本武庫川女子大学薬学部 高 背 東洋医薬学講座 明、辻早矢佳、吉富久恵 景：近年、世界各国的糖尿病、高血压等成人病（生活習慣病）、特別是代謝綜合症的発症率急 激上昇、成為人類主要死因疾患的重要危険因素之一。Insulin抵抗性（IR）是指在骨格筋・肝・脂肪 等Insulin感受性組織中Insulin的作用不能充分発揮而形成的病理状態、是代謝総合症等各種成人病 的共同病理基礎。因此、IR的防治対治療各種成人病有重要的意義、特別是利用中草薬開発有効的治 療薬越来越受到重視。本研究室多年来応用与人類代謝綜合症的病因、発病過程及病理変化相似的動 物模型（SHRSP-ZF）進行了多種中草薬有効成分的筛選、中薬配方療効評価及作用机理的研究。 我們根据伝統中医学的「祛瘀化痰」理論、以銀杏葉、田三七等為主薬組成了「漢方処方」並応用 SHRSP.ZF大鼠模型進行了「漢方処方」的予防・治療代謝綜合症的療効及作用機理的研究、現匯報如 下。 方 法：9 週齢的雄性 SHRSP.ZF 大鼠分成「漢方処方」投与組和対照組(各組 n=７)。「漢方処方」投与組 的飼料中添加 2％実験薬物。投与期間中経時測定観察体重、血压、空腹時血糖、血中 Insulin、血中脂質 的変化。実験結束時、麻酔状態下採血処死後摘出臓器組織、応用分子生物学方法進行相関蛋白質和基因 表達的分析。 結 果：漢方薬投与組与対照組相比、高血压状態顕著改善、血中 FFA、Insulin 濃度、空腹血糖値有意 降低。漢方投与組的血中中性脂肪顕示低値但無有意差。分子生物分析結果証明「漢方処方」有促進増加 肝臓中 total-eNOS、Akt 表達、但対 p-Akt(Ser473,Thr308)、p-eNOS(Ser1177)的磷酸化無明顕影響。 結 論：「漢方処方」有明顕降低代謝綜合症 SHRSP/ZF 大鼠的血压、増強周囲組織 Insulin 敏感性、改善 糖代謝的作用。其作用机理之一与「漢方処方」降低血中 FFA、増強 Insulin 信号通路中重要因子 Akt 及 内皮型 NO 合成酶 eNOS 表達有関。 1 応用動物模型進行 ｢漢方薬改善代謝綜合症的有効性及作 用機理的解明 ｣的研究 日本武庫川女子大学薬学部 東洋医薬学教室 高 明 代謝綜合症等生活習慣病 的予防・治療 ‣ 持久地堅持 生活習慣的改善（運動、食生活） ‣ 薬物治療的長期化 所至副作用、生活質量（QOL）低下 応用無毒副作用天然植物由来的漢方薬和 健食予防治療生活習慣病受到重視 我們利用与人類的生活習慣病非常相似的動物 模型進行了漢方薬療効和作用机理的研究 薬用植物： 番石榴葉（グアバ）、丹参、三七、雪蓮、 花弁茸、紅景天、冬虫夏草等々･･･数十種 生薬・植物： 由来の成分 西瓜由来L-Cit、丹参由来Salvianolic acid B、Ａ 桃的成分1-aminocyclopropanecarboxylic acid、 ･･･百種以上 漢方処方： 冠元顆粒、養血清脳顆粒、糖尿病方、新漢方処方 等々 ･･･十几種 自然発症代謝総合症大鼠（SHRSP-ZF） SHRSP.Z-Leprfa（SHRSP.ZF）大鼠 肥胖 高血圧 高脂血症 高血糖 高Ｉｎｓｕｌｉｎ 脳卒中発生 Lean Fatty 自然発生代謝総合症大鼠 SHRSP-ZF大鼠的主要病理特征 １。高血圧： 14周齢SBP達２００mmHg以上 ２．肥胖：14周令体重達４１０g以上。腸系膜脂肪 量6.6g約正常鼠的３倍。脂肪細胞増大。 ３.高脂血症： 中性脂肪６２６±１５４mg/ｄｌ ４．高血糖、高Insulin血症： 14周齢時 空腹時血糖： １３３±２１mg/dl Insulin値： ２４±５ng/ml。 ５．脂肪肝、腎臓損害 応用SHRSP/ZF大鼠 進行中薬療効和作用機序的研究 Methods 9週齢 ♂ SHRSP/ZF 観察項目 Control 群 ・・・ 水道水 6weeks 漢方薬群 ・・・ 2g/kg/day 経口投与 ① 摂食量・飲水量の観察 ② 血圧・体重・血糖値的測定 ・・・ 2週間毎 ③ 実験終了後に採血・・・血糖、CHO・FFA、TG、Insulin、AST/ALT ④ 臓器摘出・・・組織重量、包埋組織切片・染色、 組織免疫生化学、分子生物学分析 western lotting・PCR 漢方薬の組成 花弁茸、銀杏葉、田三七等々 結果． 被検漢方薬対血中指標的影響 Group 総胆固醇 (mg/dL) 中性脂肪 (mg/dL) 投与期間(weeks) 0 2 6 control 81±2.0 121±3.3 137±5.0 漢方 82±6.0 111±5.5 150±6.1 control 564±35 698±55 588±36 漢方 603±30 724±52 495±30 control 3.2±0.2 3.4±0.1 3.2±0.2 SHRSP/ZFラットのメタボリックパラメーターの表 遊離脂肪酸 FFA (mEq/L) 漢方 3.2±0.2 3.5±0.2 2.8±0.1* 空腹時血糖 (mg/dL) Insulin 濃度 (ng/mL) control 163±32 163±15 147±11 漢方 163±13 118±8.2* 107±3.8** control 11.3±2.2 40.6±11.6 37.2±2.2 漢方 9.6±2.2 35.9±5.9 27.8±0.6** Mean ±S.E.M.(n=7) ＊ｐ<0.05,＊＊ｐ<0.01 vs control 結果． 漢方薬対収縮期血圧変化的影響 （ｍｍＨｇ） ｐ<0.05 250 ｐ<0.05 ｐ<0.001 220 190 160 130 100 ０週 ２週 漢方薬 ４週 コントロール ６週 小 結 Ｉｎ ＳＨＲＳＰ/ＺＦ大鼠、漢方処方具有： １、降低血中FFA、改善脂肪代謝。 ２、改善Ｉｎｓｕｌｉｎ抵抗性、降低空腹血糖。 ３、抑制血圧上昇、増加脳血量、改善 脳循環。 漢方薬的作用機序分析 代謝綜合症等各種生活習慣病的共同病理基礎 Insulin抵抗性 Insulin信号通路阻滞 Ins Ｉｎｓｕｌｉｎ信号通路 IR P Se r IRS Tyr P PI3K Akt PEPCK G S 糖新生 P 糖元合成 空腹血糖下降 P P S1177 P eNOS T495 ＮＯ産生 血圧下降 結果． Akt的総量及燐酸化的影響 IR P Tyr PI3K Akt Akt P * (folds of control) IRS 2 band of density Ser P Ｃｏｎｔ 漢方群 * 1 0 PEPCK Total Akt p-Ser473Akt 結果． PEPCK mRNA表達量的影響 Ser P IRS P Tyr PI3K Akt Akt P Relative PEPCK mRNA level IR 1.5 1.0 0.5 ＣＯＮＴ PEPCK 糖新生 漢方群 結果． eNOS表達量的影響 IR ＊ IRS P Tyr PI3K Akt Akt P (folds of control) Ser P band of density 1.5 1.0 0.5 eNOS ＣＯＮＴ PEPCK 糖新生 漢方群 NO Mean±S.E.M *p<0.05 vs control まとめ 漢方薬服用 In s ＦＦＡ P Se r IR IRS Tyr P PI3K Akt PEPCK 糖新生 空腹血糖降低 P P S1177 G S P P eNOS T495 ＮＯ産生 血圧下降
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