TaKaRa Z-Taq - Clontech Laboratories, Inc.

TaKaRa Z-Taq ™
Code No. R006A
Size: 200 units
Shipping at － 20℃
Store at － 20℃
Supplied Reagents :
10X Z-Taq Buffer (30 mM Mg2+)
dNTP Mixture (2.5 mM each)
800 μl
800 μl
Lot No.
Conc. :
Volume :
Expiration Date :
units/μl
μl
For a detailed protocol, refer to the product user
manual.
Storage Buffer:
20 mM
100 mM
0.1 mM
1 mM
0.5%
0.5%
50%
Tris-HCl (pH8.0)
KCl
EDTA
DTT
Tween 20
Nonidet P-40
Glycerol
Purity : Nicking, endonuclease, and exonuclease activity were not
detected after incubation of 0.6 μg of supercoiled pBR322 DNA,
0.6 μg of λDNA, or 0.6 μg of λ-Hin d III digest with 10 units of this
enzyme for 1 hour at 74℃.
Applications : For rapid DNA amplification by PCR.
PCR test :Good performance in PCR was confirmed by amplification of a
10 kb fragment from λDNA template.
General reaction mixture for PCR (total 50 μl) :
TaKaRa Z-Taq (2.5 units/μl)
0.5 μl
10X Z-Taq Buffer
5 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each)
4 μl (final conc. 200 μM)
Template
<1 μg
Primer 1
10 pmol (final conc. 0.2 μM)
Primer 2
10 pmol (final conc. 0.2 μM)
Sterilized distilled water
up to 50 μl
For multiple reactions, prepare a master mix consisting of TaKaRa Z-Taq ,
10X Z-Taq Buffer, and dNTP Mixture.
1 (or 5) sec.
X sec.＊
25 - 30 cycles
＊: Time may vary depending on size of amplified fragment. The recommended time is 10 - 20 sec./kb.
Examples :
Amplification of a 2 kb fragment
Amplification of a 8 kb fragment
98℃
68℃
98℃
68℃
1 (or 5) sec.
20 sec.
30 cycles
Amplification of a 20 kb fragment
98℃
68℃
1 (or 5) sec.
200 sec.
30 cycles
Examples:
Amplification of a 2 kb fragment
Amplification of a 8 kb fragment
98℃
55℃
72℃
98℃
55℃
72℃
1 (or 5) sec.
1 - 10 sec.
10 - 20 sec.
30 cycles
1 (or 5) sec.
1 - 10 sec.
80 sec.
30 cycles
Amplification of a 20 kb fragment
98℃
55℃
72℃
1 (or 5) sec.
1 - 10 sec.
200 sec.
30 cycles
* For shuttle PCR or 3 step PCR, longer incubation times may cause
diffusely smeared bands.
Supplied dNTP Mixture (2.5 mM each)
dNTP Mixture is ready for use in PCR without dilution.
Form : Dissolved in water (sodium salts), pH7 - 9
Purity : ≧ 98% for each dNTP
< Cool Start Method >
The "Cool Start Method" provides more accurate amplification and minimizes
amplification of nonspecific bands. This method is simple that does not require
specialized enzymes or additional reagents.
Protocol of Cool Start Method
1)Keep all reagents on ice until use.
2)Prepare the reaction mixture on ice＊1, 2.
＊ 1 : Order of reagent addition does not influence results.
＊ 2 : Results will not be affected by leaving the mixture on ice for 30 min. before
thermal cycling.
3)Set a thermal cycler with the designated program＊3.
＊ 3 : PCR conditions do not need to be changed for Cool Start.
4) Set the tubes in a thermal cycler and start thermal cycling immediately.
NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE
[P1] PCR Notice
Use of this product is covered by one or more of the following US patents and
corresponding patent claims outside the US: 5,789,224, 5,618,711, 6,127,155 and
claims outside the US corresponding to expired US Patent No. 5,079,352. The
purchase of this product includes a limited, non-transferable immunity from suit
under the foregoing patent claims for using only this amount of product for the
purchaser's own internal research. No right under any other patent claim, no right
to perform any patented method, and no right to perform commercial services of
any kind, including without limitation reporting the results of purchaser's activities
for a fee or other commercial consideration, is conveyed expressly, by implication,
or by estoppel. This product is for research use only. Diagnostic uses under Roche
patents require a separate license from Roche. Further information on purchasing
licenses may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied
Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.
[M57] LA Technology
This product is covered by the claims 6-16 outside the U.S. corresponding to the
expired U.S. Patent No. 5,436,149.
TaKaRa Z-Taq is a trademark of TAKARA BIO INC.
PCR Conditions (an example) :
98℃
68℃
3 step PCR can be conducted by setting the extension time to 1/3-1/5 of
the time required for Taq DNA polymerase.
1 (or 5) sec.
80 sec.
30 cycles
Note
This product is for research use only. It is not intended for use in
therapeutic or diagnostic procedures for humans or animals. Also, do
not use this product as food, cosmetic, or household item, etc.
Takara products may not be resold or transferred, modified for resale
or transfer, or used to manufacture commercial products without
written approval from TAKARA BIO INC.
If you require licenses for other use, please contact us by phone at
+81 77 543 7247 or from our website at www.takara-bio.com.
Your use of this product is also subject to compliance with any
applicable licensing requirements described on the product web
page. It is your responsibility to review, understand and adhere to
any restrictions imposed by such statements.
All trademarks are the property of their respective owners. Certain
trademarks may not be registered in all jurisdictions.
v201312Da
TaKaRa Z-Taq ®
Code No. R006A
Size: 200 units
添付試薬 : 10 × Z-Taq
Shipping at － 20℃
Store at － 20℃
Buffer (30 mM Mg2+)
dNTP Mixture（各 2.5 mM）
Lot No.
800 μl
800 μl
（英文面をご覧ください。）
濃度 :
（英文面をご覧ください。）
容量 :
（英文面をご覧ください。）
品質保証期限 :
（英文面をご覧ください。）
本製品の使用方法については、製品添付の取扱説明書
をご確認ください。
●形状
20 mM
100 mM
0.1 mM
1 mM
0.5%
0.5%
50%
Tris-HCl 緩衝液 (pH8.0)
KCl
EDTA
DTT
Tween 20
Nonidet P-40
Glycerol
●純度
1.10 U の本酵素と 0.6 μg のλ-Hin d III 分解物を 74℃、1 時間反応させ
ても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。
2.10 U の本酵素と 0.6 μg の supercoiled pBR322 DNA を 74℃、1 時間反
応させても DNA の電気泳動パターンに変化は起こらない。
3.10 U の本酵素と 0.6 μg のλDNA を 74℃、1 時間反応させても DNA
の電気泳動パターンに変化は起こらない。
●用途
Polymerase Chain Reaction (PCR) 法による迅速 DNA 増幅
● PCR 検定
λDNA を鋳型とした PCR 反応（増幅産物 10 kb）において良好な増幅が
見られることを確認している。
●一般的な PCR 反応液組成 (total 50 μl)
TaKaRa Z-Taq (2.5 units/ μl)
0.5 μl
10 × Z-Taq Buffer
5 μl
dNTP Mixture（各 2.5 mM）
4 μl (final conc. 200 μM)
Template
< 1 μg
Primer 1
10 pmol (final conc. 0.2 μM)
Primer 2
10 pmol (final conc. 0.2 μM)
滅菌蒸留水
up to 50 μl
複数反応を行う場合は、TaKaRa Z-Taq 、10×Z-Taq Buffer、dNTP Mixture
を含む Master Mix を作製することをお勧めします。
● PCR 条件（例）
98℃
68℃
1 (or 5) sec.
X sec.＊
25 〜 30 cycles
＊：増幅サイズにより適宜変更。10 〜 20 sec./kb が目安
例）
2 kb 増幅の場合
98℃
1 (or 5) sec.
68℃
20 sec.
20 kb 増幅の場合
98℃
1 (or 5) sec.
68℃
200 sec.
8 kb 増幅の場合
30 cycles
98℃
1 (or 5) sec.
68℃
80 sec.
30 cycles
30 cycles
3 ステップでの PCR も可能です。この場合、extension 時間の設定は Taq
DNA ポリメラーゼ使用時の約 1/3 〜 1/5 に設定してください。
例）
2 kb 増幅の場合
98℃
55℃
72℃
1 (or 5) sec.
1 ～ 10 sec.
10 ～ 20 sec.
8 kb 増幅の場合
30 cycles
98℃
55℃
72℃
1 (or 5) sec.
1 ～ 10 sec.
80 sec.
30 cycles
20 kb 増幅の場合
98℃
55℃
72℃
1 (or 5) sec.
1 ～ 10 sec.
200 sec.
30 cycles
注）シャトル PCR、3 ステップ PCR ともに incubation 時間が長すぎると
スメアーを生じる場合があります。
● dNTP Mixture（各 2.5 mM）
dATP、dCTP、dTTP、dGTP の等モル混合物で、希釈せずにそのまま PCR
反応に用いることができます。
形状：水溶液（ナトリウム塩）、pH7 〜 9
純度：各 98% 以上
◆ Cool Start 法 ◆
下記の Cool Start 法により簡便に PCR 時の非特異的増幅を抑えることが
できます。
【プロトコール】
1) 試薬をすべて氷上に置く。
2) 試薬分注後の反応チューブは、ただちに氷上に置く。
（チューブに加える試薬の順番は問題にならない。調製後 30 分たって
から反応しても問題はない。）
3) サーマルサイクラーはスタートするだけの状態にしておく。（設定は既
存のプログラムで OK。）
4) 反応チューブをサーマルサイクラーにセットし、ただちにスタートする。
● 注意
本製品は研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床
診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家
庭用品等として使用しないでください。
タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための
改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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Tel 077-543-6116
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