᪩✄⏣኱Ꮫ኱Ꮫ㝔 ⌮ᕤᏛ◊✲⛉ ༤ ኈㄽᩥᑂᰝሗ࿌᭩ ㄽ ᩥ 㢟 ┠ Study of Advanced Drug Delivery of Liposomes by Maleimide Modification ⏦ ㄳ ⪅ Tianshu LI ᮤ ኳ⯎ ⏕࿨་⛉Ꮫᑓᨷ ⏕యศᏊ㞟ྜ⛉Ꮫ◊✲ 2013 ᖺ 7 ᭶ ୧ぶ፹ᛶศᏊࡀศᏊ㞟ྜࡋ࡚ᙧᡂࡉࢀࡿ஧ศᏊ⭷ᑠ⬊య㸦࣏ࣜࢯ࣮࣒㸧ࡣࠊ ⸆≀ࠊ᰾㓟ࠊࢱࣥࣃࢡ㉁࡞࡝ࡢ㐠ᦙయ࡜ࡋ࡚┒ࢇ࡟◊✲ࡀ✚ࡳ㔜ࡡࡽࢀࠊ୍ 㒊ࡣ᪤࡟⮫ᗋ౑⏝ࡉࢀࡿࡼ࠺࡟࡞ࡗࡓࠋ⭘⒆ࡣ⾑⟶࡜ࣜࣥࣃ⟶ࡀᮍ⇍࡛࠶ࡿ ࡓ ࡵ ࡟ ࠊࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ( ⢏ Ꮚ ᚄ 㸸 5 0 ࠿ ࡽ 3 0 0 n m ) ࡞ ࡝ ࡢ ࢼ ࣀ ⢏ Ꮚ ࡣ ⾑ ⟶ ࢆ ㏱㐣 ࡋ ࡚ 㞟 ✚ ࡉ ࢀ ࡿ 㸦 E n h a n c e d P e r m e a b i l i t y a n d R e t e n t i o n ( E P R ) ຠ ᯝ 㸧ࠋ ௚ ᪉ ࠊ ࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ࡣ Mononuclear Phagocytic Systems(MPS)࡟ ࡼ ࡗ ࡚ ⾑ ୰ ࠿ ࡽ ㎿㏿࡟᤼㝖ࡉࢀࡿࡓࡵ࡟ࠊᶆⓗ㒊఩ࡢ⸆≀⃰ᗘࡀ᭷ຠ⃰ᗘ࡟㐩ࡋ࡞࠸ㄢ㢟ࡶ࠶ ࡿࠋᚑࡗ࡚ࠊ⾑୰⁫␃ᛶࢆྥୖࡉࡏ࡞ࡀࡽᶆⓗ㒊఩࡟ᑐࡍࡿぶ࿴ᛶࢆ㧗ࡵࡿ ࡇ࡜ࡀᶵ⬟ᛶ࣏ࣜࢯ࣮࣒࡟ồࡵࡽࢀࡿࠋࡑࡢ୍᪉࡛ࠊ⣽⬊⭷ࡢࢱࣥࣃࢡ㉁⾲㠃࡟㟢ฟࡋ࡚࠸ࡿࢳ࣮࢜ࣝᇶࢆ฼⏝ࡋ࡚ࠊࢳ࣮࢜ࣝ཯ᛂᛶࡢ࣌ࣉࢳࢻࡸ᰾㓟ㄏᑟయࠊࢼࣀ⢏Ꮚࠊ㧗ศᏊࠊ࠶ࡿ࠸ࡣⰍ⣲࡞࡝ࢆ⣽⬊ෆ࡟✚ᴟⓗ࡟ྲྀ㎸ࡲࡏ ࡿ᪂ࡋ࠸ᡓ␎ࡀᥦ᱌ࡉࢀ࡚ጞࡵ࡚࠸ࡿࠋࡋ࠿ࡋࠊࢳ࣮࢜ࣝᇶࢆ௓ࡋࡓ⣽⬊ෆ ྲྀ㎸ࡳᶵᵓࡣࡲࡔ᫂ࡽ࠿࡟ࡉࢀ࡚࠸࡞࠸ࠋ ࡇࡢࡼ࠺࡞⫼ᬒࡢ୰࡛ࠊ⏦ㄳ⪅ࡣࢳ࣮࢜ࣝ࡜໬Ꮫ཯ᛂ࡟ࡼࡗ࡚⤖ྜࡍࡿ࣐ ࣞ࢖࣑ࢻᇶ࡟╔┠ࡋࠊࡑࢀࢆ࣏ࣜࢯ࣮࣒ࡢ⾲㠃࡟ᑟධࡉࡏࡓ࣏ࣜࢯ࣮࣒ (M-GGLG-liposome)ࢆ ⏝ ࠸ ࡓ in vitro ヨ㦂 ࡟ ࡼ ࡿ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ᣲ ື ࡞ ࡽ ࡧ ࡟ i n v i v o ヨ㦂 ࡟ ࡼ ࡿ ⸆ ≀ 㐠 ᦙ ຠ ᯝ ࡢ ⤖ ᯝ ࠿ ࡽ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ࡢ ຠ ᯝ ࢆ ☜ ㄆ ࡋ ࠊ᭦ ࡟ྛ✀㜼ᐖ๣ࡸ࣐ࣞ࢖࣑ࢻㄏᑟయࢆ⏝࠸ࡓ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ⬟ࡢ㜼ᐖヨ㦂 ࡟ࡼࡗ࡚⣽⬊⾲㠃ࢳ࣮࢜ࣝᇶࡀ㛵㐃ࡍࡿ⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳᶵᵓࢆ᫂ࡽ࠿࡟ࡍࡿࡇ ࡜ࢆ┠ⓗ࡜ࡋࡓࠋ ➨ 1 ❶ ࡛ ࡣ ࠊࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ࡢ ㄪ〇 ἲ ࡸ ≀ ᛶ ヨ㦂 ἲ ࢆ ࡲ ࡜ ࡵ ࡿ ࡜ ඹ ࡟ ࠊP E G ໬ ࡟ࡼࡿ⾑୰⁫␃ᛶࡢஹ㐍ࠊ่⃭ᛂ⟅ᛶࡢ௜୚ࠊᢠయࡸ࣌ࣉࢳࢻ࡞࡝࡟ࡼࡿᶆ ⓗ ᣦ ྥ ᛶ ࡞ ࡝ ࡢ ⸆ ≀ 㐠 ᦙ య ࡢ タィ ᣦ 㔪 ࢆ ࡲ ࡜ ࡵ ࡓ ⥲ ㄝ ࡢ ❶ ࡛ ࠶ ࡿ ࠋ⏦ ㄳ ⪅ ࡣ ࠊ GGLG/cholesterol/PEG5000-DSPE/M-PEG5000-Glu2C18=5/5/0.03/0.03( ࣔ ࣝ ẚ )࡛ ΰ ྜ ࡋ ࡓ ⢊ ᮎ ࢆ Ỉ ࿴ ࡉ ࡏ ࠊ extrusion ἲ ࡟ ࡼ ࡗ ࡚ ࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ࡜ ࡋ ࠊ ᢠ ⭘ ⒆ ๣ ࡛ ࠶ ࡿ doxorubicin(DOX)ࢆ pH ໙ 㓄 ἲ ࡟ ࡼ ࡗ ࡚ ࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ෆ ࡟ ᑒ ධ ࡍ ࡿ ᪉ ἲ ࢆ ᥇ ⏝ ࡋ ࡓ ࠋP E G 5 0 0 0 - G l u 2 C 1 8 ࡢ P E G ᮎ ➃ ࣓ ࢺ ࢟ ࢩ ᇶ ࢆ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ࡟ ⨨ ᥮ ࡋ ࡓ ᵓ 㐀 ࡢ ໬ ྜ ≀ M - P E G 5 0 0 0 - G l u 2 C 1 8 ࢆ ྜ ᡂ ࡋ ࡚ ౑ ⏝ ࡋ ࡓ ࠋࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ࡢ ⢏ Ꮚ ᚄ ࠊ DOX/⬡ ㉁ ẚ ࠊ DOX ෆ ໟ ຠ ⋡ ࡟ 㛵 ࡋ ࡚ ࡣ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ᑟ ධ ࡟ࡼࡿᙳ㡪ࢆㄆࡵ࡞࠸⠊ᅖ࡛㐺ษ࡟タᐃࡋ࡚࠾ࡾࠊ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶࡢᏳᐃᛶࢆ ⪃ ៖ ࡋ ࡚ ヨ ᩱ ࡣ 4Υ ಖ Ꮡ ࡛ 2 ࠿ ᭶ ௨ ෆ ࡟ ౑ ⏝ ࡍ ࡿ ࡞ ࡝ ᕤ ኵ ࢆ จ ࡽ ࡋ ࡚ ࠸ ࡿ ࠋ ➨ 2 ❶ ࡣ ࠊ➨ 1 ❶ ࡢ ࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ ヨ ᩱ M - G G L G - l i p o s o m e s ࡟ R h o - P E ⬡ ㉁ ࡟ ࡚ ⺯ ග ᶆ ㆑ ࡋ ࡓ ᚋ ࠊᵝ ࠎ ࡞ ⣽ ⬊ ᰴ ࠊH e L a ࠊH C C 1 9 5 4 ࠊM D A - M B - 4 6 8 ࠊN I H / 3 T 3 ࡸ COS-7 ࡟ ࡼ ࡿ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ᣲ ື ࡸ ⣽ ⬊ ẘ ᛶ ࢆ ㄪ ᰝ ࡋ ࡓ ⤖ ᯝ ࢆ ࡲ ࡜ ࡵ ࡚ ࠸ ࡿࠋ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶಟ㣭࡛ࡣ඲࡚ࡢ⣽⬊ᰴ࡟࠾࠸࡚⣽⬊࡟ࡼࡿྲྀ㎸ࡳຠ⋡ࡀ 2 ಸ௨ୖࡢᕪ࡛᭷ព࡟ቑຍࡋ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࡀ᫂ࡽ࠿࡜࡞ࡗࡓ୍᪉࡛ࠊࡇࡢᐇ㦂᮲ ௳ ࡛ ࡣ ⣽ ⬊ ẘ ᛶ ࡣ ㄆ ࡵ ࡽ ࢀ ࡞ ࠿ ࡗ ࡓ ࠋ ௚ ᪉ ࠊ M-GGLG-liposomes ࡢ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ࡣ G G L G - l i p o s o m e s ࡼ ࡾ ࡶ 2 ಸ ௨ ୖ ࡜ ࡞ ࡾ ࠊࡑ ࡋ ࡚ 㣬 ࿴ ࡟ 㐩 ࡍ ࡿ ᫬ 㛫 ࡣ 1 4 ಸ ௨ ୖ ࡛ ࠶ ࡗ ࡓ ࠋ ࡲ ࡓ ࠊ ᮏ ◊ ✲ ࡛ ࡣ ࠊ ᙜ ◊ ✲ ᐊ ࡟ ࡚ 㛤 Ⓨ ࡉ ࢀ ࡓ pH ᛂ ⟅ ᛶ GGLG-liposomes ࢆ ⏝ ࠸ ࡚ ࠾ ࡾ ࠊ ≉ ࡟ ࢚ ࣥ ࢻ ࢯ ࣮ ࣒ ࡢ ప pH ࡟ ࡚ ࢚ ࣥ ࢻ ࢯ ࣮ ࣒⭷࡜ࡢ⼥ྜ⬟ࡀྥୖࡍࡿᵝ࡟タィࡉࢀ࡚࠸ࡿࠋ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶಟ㣭ࡣ G G L G - l i p o s o m e s ࡢ p H ᛂ ⟅ ᛶ ࢆ ኚ ໬ ࡉ ࡏ ࡎ ࠊG G L G - D O X - l i p o s o m e s ࡜ ẚ ㍑ ࡋ ࡚ DOX ࡢ ⣽ ⬊ ෆ ື ែ (᰾ ࡬ ࡢ 㞟 ✚ ᛶ )࡟ ࡶ ᙳ 㡪 ࢆ ཬ ࡰ ࡉ ࡞ ࠸ ࡇ ࡜ ࢆ ☜ ㄆ ࡋ ࡓ ࠋ ௨ ୖ ࡼ ࡾ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ 㧗 ࠸ ⣽ ⬊ ẘ ᛶ ࡣ ಟ 㣭 ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ࡟ ࡼ ࡗ ࡚ ⣽ ⬊ ෆ ࡬ ࡢ liposomes ࡢ ྲྀ ㎸ ࡳ 㔞 ࡀ ቑ ኱ ࡋ ࡓ ࡇ ࡜ ࡜ ࠊ GGLG-liposomes ࡟ ࡼ ࡿ pH ᛂ ⟅ ᛶ ࡟ ࡼ ࡿ ࡜ ⪃ ࠼ ࡽ ࢀ ࠊ ◊ ✲ ᐊ ࡛ ⊂ ⮬ ࡟ 㛤 Ⓨ ࡉࢀࡓ࣏ࣜࢯ࣮࣒ࡢᵓᡂࡀࠊ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶࡢᑟධ࡟ࡼࡗ࡚ࡼࡾ㧗ᛶ⬟࡞⸆≀ 㐠ᦙయ࡜ࡋ࡚ᥦ♧࡛ࡁࡓࡇ࡜ࡣព⩏῝࠸ᡂᯝ࡜ࡋ࡚ホ౯࡛ࡁࡿࠋ ➨ 3 ❶ ࡛ ࡣ ࠊ ⏦ ㄳ ⪅ ࡣ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ in vivo ࡟ ࠾ ࡅ ࡿ ホ ౯ ヨ㦂ࡢ⤖ᯝࢆグ㏙ࡋࡓࠋ⏦ㄳ⪅ࡣࠊ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶࡣࢱࣥࣃࢡ㉁ࡸ࣌ࣉࢳࢻࢆ ᵓᡂࡍࡿࢩࢫࢸ࢖ࣥࡢࢳ࣮࢜ࣝ࡜཯ᛂࡍࡿࡓࡵ࡟ࠊ⾑ᾮ୰࡟࠾ࡅࡿ࣐ࣞ࢖࣑ ࢻᇶࡢኻάࢆ㑊ࡅࡿ┠ⓗ࡛㟼⬦ᢞ୚ࢆࡏࡎ࡟⭘⒆㒊఩࡬ࡢ⓶ୗᢞ୚ࢆ㑅ᢥࡋ ࡓ ࠋ2 㐌㛫 ࡢ 㛫㝸 ࡛ 2 ᅇ ヨ ᩱ ࢆ ⭘ ⒆ 㒊 ఩ ࡟ ⓶ ୗ ᢞ ୚ ࡋ ࡚ ࠊ60 ᪥ ᚋ ࡢ ⭘ ⒆ ࡢ ࢧ ࢖ ࢬ ࢆ ᐃ ࡋ ࡓ ࡜ ࡇ ࢁ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡣ DPPC-DOX-liposomes ࡸ GGLG-DOX-liposomes ࡜ ẚ ㍑ ࡋ ࡚ ⭘ ⒆ ࡢ ᡂ 㛗 ࢆ ᭷ ព ࡟ ᢚ ไ ࡍ ࡿ ࡇ ࡜ ࢆ ᫂ ࡽ ࠿ ࡟ ࡋ ࡓ ࠋ ᒁ ᡤ ᢞ ୚ ࡉ ࢀ ࡓ M-GGLG-DOX-liposomes ࡣ ⾑ ୰ ࡟ ධ ࡽ ࡎ ࠊ ᢞ ୚ ࡋ ࡓ ⭘ ⒆ 㒊 ఩ ࡟ 㛗 ࡃ ␃ ࡲ ࡗ ࡚ ௦ ㅰ ࡉ ࢀ ࠊD O X ⏤ ᮶ ࡢ ᢠ ⭘ ⒆ ຠ ᯝ ࢆ Ⓨ ⌧ ࡋ ⥆ ࡅ ࡓ ࡓ ࡵ ࡜ ⪃ ᐹ ࡉ ࢀ ࡿ ࠋ I n Vi v o I m a g i n g S y s t e m ( I V I S ) ࡟ ࡼ ࡿ 㠀 ౵ くゎ ᯒ ࡛ ࡣ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡀ ึ ᮇ ࡢ ศ ゎ ࡸ ࣜ ࣥ ࣃ ⠇ ࠿ ࡽ ࡢ ᤼ ἥ ࢆ ཷ ࡅ ࡎ ࡟ ࠊᢞ ୚ 5 ᪥ ᚋ ࡛ ࡶ ⣙ 4 0 㸣 ࡢ M - G G L G - D O X - l i p o s o m e s ࡀ ⭘ ⒆ 㒊 ఩ ࡟ ␃ ࡲ ࡾ ࠊ DPPC-liposomes ࡸ GGLG-liposomes ࡢ 20㸣 ࡼ ࡾ ࡶ ᱁ ẁ ࡟ 㧗 ࠸ ್ ࢆ ♧ ࡋ ࡓ ࠋ ࣏ࣜࢯ࣮࣒ࡀ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶ࡟ࡼࡗ࡚⏕యෆࡢ⭘⒆⤌⧊࡟࡚ຠ⋡Ⰻࡃ⣽⬊ෆ࡟ ྲྀ㎸ࡲࢀ⸆ຠࢆᙉຊ࡟Ⓨ᥹࡛ࡁࡓࡇ࡜ࡣึࡵ࡚ࡢᡂᯝ࡛࠶ࡾ㧗ࡃホ౯࡛ࡁࡿ ࡀࠊ㟼ὀᢞ୚࡟ࡼࡿᢠ⭘⒆ຠᯝࡢ᳨ウࡀᚲせ࡜ࡢᣦ᦬ࡶ࠶ࡗࡓࠋ ➨ 4 ❶ ࡣ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ ࢚ ࣥ ࢻ ࢧ ࢖ ࢺ ࣮ ࢩ ࢫ ⤒ ㊰ ࡸ ࡑ ࢀ ࡟ ཬ ࡰ ࡍ ⎔ ቃ ᅉ Ꮚ ࢆ ᫂ ࡽ ࠿ ࡟ ࡍ ࡿ ◊ ✲ ࡛ ࠶ ࡿ ࠋDPPC ࡸ GGLG-liposomes ࡜ ࡣ ␗ ࡞ ࡾ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ࡣ ྛ ✀ ࢚ ࣥ ࢻ ࢧ ࢖ ࢺ ࣮ ࢩ ࢫ㜼ᐖ๣࡟ࡼࡗ࡚ࡶṤ࡝ᢚไࡉࢀ࡞࠸⯆࿡῝࠸⤖ᯝࡀᚓࡽࢀࡓࠋ᭦࡟ࠊ㏻ᖖ ࡢ࣏ࣜࢯ࣮࣒࡛ࡣప ࡸ⾑ΎᏑᅾୗ࡞࡝ࡢ⎔ቃᅉᏊ࡛⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳᢚไࡀㄆ ࡵ ࡽ ࢀ ࡿ ࡀ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡣ ᢚ ไ ࡉ ࢀ ࡞ ࠸ ⤖ ᯝ ࡶ ᚓ ࡽ ࢀ ࠊ ㏻ ᖖ ࡢ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫࢆಁ㐍ࡍࡿ௨እ࡟࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶࡀ┤᥋㛵୚ࡍࡿูࡢ⣽ ⬊ෆྲྀ㎸ࡳ⤒㊰ࡢᏑᅾࢆ♧၀࡛ࡁࡓࠋࡇࢀࡣᏛ⾡ⓗ࡟ࡶᴟࡵ࡚㔜せ࡞▱ぢࡀ ぢ ฟ ࡉ ࢀ ࠊ௒ ᚋ ࡢ ◊ ✲ ࡟ ࡼ ࡾ ࡑ ࡢ ⤒ ㊰ ࡢ ࡼ ࡾ ヲ ⣽ ࡞ ▱ ぢ ࡢ 㞟 ✚ ࡀ ᮇ ᚅ ࡉ ࢀ ࡿ ࠋ ➨ 5 ❶ ࡣ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ ಁ 㐍 ⣽ ⬊ ྲྀ ㎸ ࡳ ࡟ ࠾ ࡅ ࡿ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻᇶࡢᶵ⬟࡟㛵ࡍࡿࢹ࢕ࢫ࢝ࢵࢩࣙࣥࡢ❶࡛࠶ࡿࠋ⣽⬊⾲㠃࡟ࡣࢪࢫࣝࣇ࢕ ࢻ ᇶ ࡜ ࢳ ࢜ ࣮ ࣝ ᇶ 㛫 ࡢ ஺ ᥮ ࢆ ゐ ፹ ࡍ ࡿ 㓝 ⣲ 2 protein disulfide isomerase(PDI) ࡟ ࡼ ࡾ ࠊ ࣇ ࣜ ࣮ ࡞ ࢳ ࢜ ࣮ ࣝ ᇶ ࡀ 㧗 ࡃ Ⓨ ⌧ ࡋ ࡚ ࠾ ࡾ ࠊ ࢳ ࢜ ࣮ ࣝ ཯ ᛂ ᛶ ᇶ ㉁ ࡢ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ࢆ ಁ 㐍 ࡋ ࡚ ࠸ ࡿ ࡇ ࡜ ࡟ ╔ ┠ ࡋ ࡓ ࠋ ࡑ ࡋ ࡚ ࠊ PDI 㜼 ᐖ ๣ ࡛ ࠶ ࡿ DTNB ࡸ bacitracin ࢆ ῧ ຍ ࡍ ࡿ ࡜ ࠊ ≉ ࡟ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ࡀ ኱ ࡁ ࡃ ᢚ ไ (10~40%)ࡉ ࢀ ࠊ ᮏ ᶵ ᵓ ࡟ ࡣ PDI ࡢ ά ᛶ ࠶ ࡿ ࠸ ࡣ ⣽ ⬊ ⾲㠃 ࡢ ࢳ ࢜ ࣮ ࣝ ᇶ ࡀ 㔜せ ࡞ ᙺ ๭ ࢆ ₇ ࡌ ࡚ ࠸ ࡿ ࡇ ࡜ ࡀ ᙉ ࡃ ♧ ၀ ࡉ ࢀ ࡓ ࠋ ࡲ ࡓ ࠊ M-GGLG-DOX-liposomes ࡢ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ࢆ ᣢ ࡘ ప ศ Ꮚ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ (N-ethylmareimide, NEM)ࢆ ⣽ ⬊ ⾲㠃 ࢳ ࢜ ࣮ ࣝ ᇶ ࡢ ࣈ ࣟ ࢵ ࢝ ࣮ ࡜ ࡋ ࡚ ῧ ຍ ࡋ ࡓ ࡜ ࡇ ࢁ ࠊ ప ⃰ ᗘ (0.01nM) ࡢ ῧ ຍ 㔞 ࡛ ຠ ᯝ ⓗ ࡟ M - G G L G - D O X - l i p o s o m e s ࡢ ⣽ ⬊ ྲྀ ㎸ ࡳ ⬟ ࢆ ᢚ ไ ࡋ ࡓ ࡀ ࠊ㧗 ⃰ ᗘ ( 1 0 0 P M ) ࡛ ࡣ ᳨ウࡋࡓࡍ࡭࡚ࡢ࣏ࣜࢯ࣮࣒࡟࠾࠸࡚⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳ⬟ࡀ᱁ẁ࡟ྥୖࡋࡓࠋ㧗 ⃰ ᗘ ࡢ ࣐ ࣞ ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ࡀ ⭷ ⼥ ྜ ࢱ ࣥ ࣃ ࢡ ㉁」 ྜ య ࡛ ࠶ ࡿ SNARE ࡀ 㛵 ୚ ࡍ ࡿ ⭷ ⼥ྜ⬟ࡢஹ㐍ࡍࡿ⌧㇟ࡣ᪤࡟▱ࡽࢀ࡚࠾ࡾࠊ࣏ࣜࢯ࣮࣒⾲㠃ࡢ㧗⃰ᗘ࣐ࣞ࢖ ࣑ ࢻ ᇶ ࡀ SNARE ࡟ ࡼ ࡿ ⣽ ⬊ -ࣜ ࣏ ࢯ ࣮ ࣒ 㛫 ࡢ ⭷ ⼥ ྜ ࢆ ಁ 㐍 ࡋ ࡚ ࠸ ࡿ ྍ ⬟ ᛶ ࡀ ⪃࠼ࡽࢀࠊࡇࢀࡀド᫂ࡉࢀࢀࡤ⭷⼥ྜ࡟ࡼࡿࢼࣀ⢏Ꮚࡢᑟධࡢ㐨ࡀᣅ࠿ࢀࡿ ࡇ࡜࡟࡞ࡾࠊ⏦ㄳ⪅ࡢ◊✲ࡀ㧗ࡃホ౯ࡉࢀࡿࠋ ➨ 6 ❶ ࡣᮏ Ꮫ఩ ㄽᩥࡢ ⤖ㄽ ࡛࠶ ࡿ ࠋ࣐ ࣞ࢖ ࣑ࢻ ᇶ࡟ ࡼࡿࣜ ࣏ࢯ ࣮࣒ ࡢ ⾲㠃 ಟ㣭ࡣ࣏ࣜࢯ࣮࣒ࡢ≀ᛶ࡟ࡣᙳ㡪ࢆཬࡰࡉࡎࠊ࣏ࣜࢯ࣮࣒ࡢ⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳ࡜ ⸆ ≀ ࡢ ⣽ ⬊ ෆ 㐠 ᦙ ࢆ ಁ 㐍 ࡟ ᐤ ୚ ࡍ ࡿ ࡇ ࡜ ࡀ in vitro, in vivo ヨ㦂 ࠿ ࡽ ᫂ ࡽ ࠿ ࡟࡞ࡗࡓࠋ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶࡣ⣽⬊⾲㠃ࡢࢳ࣮࢜ࣝᇶ࡟⤖ྜࡋ࡚⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳࡀ ಁ㐍ࡉࢀ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࢆᐇドࡋࠊ᭦࡟⭷⼥ྜ࡟㛵ࢃࡿࢱࣥࣃࢡ㉁࡜ࡶస⏝ࡋ࡚ ⣽⬊ෆ࡟ྲྀ㎸ࡲࢀࡿࡇ࡜ࡶ♧၀ࡉࢀࡓࠋ ᮏㄽᩥ࡛ࡣࠊྲྀᢅ࠸᫆ࡉࡸ㧗࠸཯ᛂᛶ࡜≉␗ᛶࢆ㚷ࡳ࡚࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶࢆࣜ ࣏ࢯ࣮࣒⾲㠃࡟ᑟධࡍࡿタィ࡛◊✲ࢆ㐍ࡵ࡚ࡁࡓࡀࠊᶆⓗ㒊఩ࡢ⣽⬊⾲㠃ࢳ ࣮࢜ࣝᇶ࡜཯ᛂࡍࡿ๓࡟ࠊ⾑₢ࢱࣥࣃࢡ㉁ࡸࡑࡢ௚ࡢ⤌⧊⾲㠃ࡢࢳ࣮࢜ࣝᇶ ࡜ࡢ཯ᛂ࡟ࡼࡿຠ⋡ࡢపୗࡀᠱᛕࡉࢀࡿࠋࡼࡾ⌧ᐇⓗ࡞タィ࡜ࡋ࡚ࠊ⣽⬊⾲㠃ࡢࢳ࣮࢜ࣝᇶ࡜స⏝ࡍࡿࢩࢫࢸ࢖ࣥ㢮⦕యࢆ࣏ࣜࢯ࣮࣒⾲㠃࡟ᑟධࡋࡓ⣔ ࡀ ᑟ ࠿ ࢀ ࠊ PDI ࡟ ࡼ ࡿ ⣽ ⬊ ෆ ྲྀ ㎸ ࡳ ࡶ ᮇ ᚅ ࡛ ࡁ ࡿ ࡛ ࠶ ࢁ ࠺ ࠋ ௨ ୖ ࡼ ࡾ ࠊ ᮏ Ꮫ ఩ㄽᩥࡣ࣐ࣞ࢖࣑ࢻᇶಟ㣭࣏ࣜࢯ࣮࣒ࡀ⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳຠ⋡ࢆⴭࡋࡃྥୖࡉࡏ ࡿࡇ࡜ࢆぢฟࡋࠊࡑࡢ⣽⬊ෆྲྀ㎸ࡳᶵᵓࡢゎ᫂࡟኱ࡁࡃ㋃ࡳ㎸ࡳࠊ⣽⬊⾲㠃 ࡟㟢ฟࢳ࣮࢜ࣝࡢ཯ᛂᛶࢆ฼⏝ࡍࡿ᪂ࡋ࠸⸆≀㐠ᦙయࡢᴫᛕࢆᥦ᱌ࡍࡿࡶࡢ ࡛ ࠶ ࡾ ࠊ ༤ ኈ (⌮ Ꮫ )࡜ ࡋ ࡚ ┦ ᛂ ࡋ ࠸ Ꮫ ఩ ㄽ ᩥ ࡛ ࠶ ࡿ ࡜ ㄆ ࡵ ࡽ ࢀ ࡿ ࠋ 2013 ᖺ 7 ᭶ 㸦୺ᰝ㸧 ᪩✄⏣኱Ꮫᩍᤵ ᕤᏛ༤ኈ㸦᪩✄⏣኱Ꮫ㸧Ṋᒸ┿ྖ ᪩✄⏣኱Ꮫᩍᤵ ༤ኈ㸦་Ꮫ㸧㸦៞᠕⩏ሿ኱Ꮫ㸧ྜ⏣ரே ᪩✄⏣኱Ꮫᩍᤵ ་Ꮫ༤ኈ㸦៞᠕⩏ሿ኱Ꮫ㸧ụ⏣ᗣኵ 3