出力チーム なぜ素早い出力が必要? レスポンステスト レスポンステスト 液体培地 Under Construction 固体培地 Response Test Pick Measure Glucose 0.2% Glucose 0.2% IPTG 0.1mM (X-Gal 20μg/mL) Measure コロニーリフト IPTG 0.1mM (X-Gal 20μg/mL) テスト結果 Note:LacZ • LacZ-Xgalの出力までが遅いのはXgal濃度が 低いため? – Xgal 20μg/mLを40μg/mL,80μg/mLにしてレスポン スタイム計測 Note:LacZ • Miller assay : LacZ活性の定量化 ONPG:Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside Ortho-nitrophenolの吸光度を測定しLacZ活性を調べる Note:Luciferase • Luciferaseの反応:Coelenterazineの酸化 Coelenterazine • Coelenterazine:膜透過性がある Hydroxypropyl-β-Cyclodextrinを加えると水中 での安定性が向上 β-Cyclodextrin 来週の予定 • 他の出力を試し、評価する(Luciferase, mCherry)
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