出力チーム

出力チーム
なぜ素早い出力が必要?
レスポンステスト
レスポンステスト
液体培地
Under Construction
固体培地
Response Test
Pick
Measure
Glucose 0.2%
Glucose 0.2%
IPTG 0.1mM
(X-Gal 20μg/mL)
Measure
コロニーリフト
IPTG 0.1mM
(X-Gal 20μg/mL)
テスト結果
Note:LacZ
• LacZ-Xgalの出力までが遅いのはXgal濃度が
低いため?
– Xgal 20μg/mLを40μg/mL,80μg/mLにしてレスポン
スタイム計測
Note:LacZ
• Miller assay : LacZ活性の定量化
ONPG:Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside
Ortho-nitrophenolの吸光度を測定しLacZ活性を調べる
Note:Luciferase
• Luciferaseの反応:Coelenterazineの酸化
Coelenterazine
• Coelenterazine:膜透過性がある
Hydroxypropyl-β-Cyclodextrinを加えると水中
での安定性が向上
β-Cyclodextrin
来週の予定
• 他の出力を試し、評価する(Luciferase,
mCherry)