DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIETAL PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA LABORATORIO 2 Biología l Práctica: Microscopia ll OBJETIVOS: - Identificar los componentes del microscopio óptico y los procedimientos correctos de manipulación del microscopio para observación de muestras biológicas, así como la identificación de componentes celulares y microorganismos. PARTE II IDENTIFICACIÓN DE COMPONENTES Y MANIPULACIÓN DEL MICROSCOPIO PARA OBSERVACIÓN DE MUESTRAS PREVIAMENTE PREPARADAS. RECURSOS A UTILIZAR EN LA PRÁCTICA (EQUIPOS / INSTRUMENTOS) MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR Bata Blanca, Guantes. Papel absorbente Jabón Tapabocas. Papel y lápiz para tomar apuntes Agua estancada Piscina, charca, florero, rio,asequia. Papel milimetrado Tela de cuadros 2 centímetros Láminas portaobjetos, Laminillas Cubre objetos. MATERIALES QUE LE SERÁN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO Lamina con extendido coloreada, Microscopio, Aceite de inmersión, Papel de Arroz o de óptica, Alcohol isopropílico. DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIETAL PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA LABORATORIO 2 Biología l - .PROCEDIMIENTO. - Realización de Montaje húmedo 1.1. Tome con un gotero una muestra de agua. (Cada muestra por separado) 1.2. Coloque la gota de agua estancada sobre una lámina porta 1.3. Tome una laminilla cubreobjetos, en posición oblicua, (45 grados) y apoyando una arista deje caer de lado la gota, déjela caer suavemente. 1.4. Retire el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente. - Manejo del microscopio 2.1. Encienda el microscopio 2.2. Coloque el objetivo de menor aumento 4X 2.3. Baje la platina completamente girando el tornillo macrométrico. 2.4. Tome la lámina con la preparación fíjese que esté completamente seca en la parte inferior 2.5. Coloque la lámina con la preparación de agua estancada sobre la platina sujetándola con las pinzas. 2.6. Procure que la preparación quede centrada, girando el tornillo para desplazamiento del carro móvil Tome una gota de la muestra de agua estancada. 2.7. Gire el tornillo macrométrico en sentido contrario a las agujas del reloj para subir la platina hasta el tope. 2.8. Debe hacerlo mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación. 2.9. Cierre o abra el diafragma hasta una posición intermedia, accionando su perilla en sentido contrario a las Agujas del reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni demasiado tenue. 2.10. Inicie la observación con el objetivo de 4X. 2.11. Mirando a través de los oculares, separe lentamente el objetivo de la preparación con el tornillo macrométrico en sentido de las agujas del reloj hasta lograr observar la imagen. 2.12. Cuando se observe algo nítida la muestra, gire el tornillo micrométrico hasta obtener un enfoque fino. 2.13. Gire el revolver 2.14. Coloque el objetivo de 10X 2.15. Visualice con el objetivo de 10X y detalle las estructuras 2.16. Gire el revólver y visualice con el objetivo de 40X enfoque con el tornillo micrométrico y detalle las estructuras .Detalle como el campo se reduce y lo que observas se reduce. DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIETAL PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA LABORATORIO 2 Biología l - Observación con el objetivo de inmersión 100X 3.1. Se utiliza para la observación de muestras fijadas, no para muestras frescas 3.2. Coloque el objetivo de inmersión de manera que el orificio de la platina quede entre el objetivo de 100X y el de 40X 3.3. Suba totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que aplicar el aceite 3.4. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre la preparación en el círculo de luz 3.5. Coloque una lámina coloreada sobre la platina 3.6. Ubique el objetivo de 100x 3.7. Suba la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de aceite 3.8. Observe la imagen con aumento de 100X 3.10. Limpie el objetivo de inmersión con un papel especial para óptica y alcohol isopropílico 3.11. Deje el objetivo de menor aumento en posición de trabajo - Comprobación de los poderes o capacidades del microscopio óptico 4.1 Realice un montaje húmedo con la letra asimétrica y obsérvela al microscopio siguiendo los pasos anteriores. 4.2 Calcule el aumento del tamaño del objeto observado para cada objetivo del microscopio con el cual le correspondió trabajar. 4.3 Realice un montaje húmedo con una hebra de hilo y obsérvela al microscopio siguiendo los pasos anteriores. - Cálculo del diámetro del campo de visión 5. Realice un montaje húmedo con un centímetro cuadrado de papel milimetrado y obsérvelo al microscopio 5.1 Calcule el diámetro del campo de visión para un aumento de 4x en un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. ENTREGABLE: Aspectos mínimos que debe llevar un informe final 1. Titulo 2. Objetivos 3. Resumen de la información teórica 4. Esquema de pasos para las observaciones en el laboratorio o diagrama de flujo en orden riguroso por cada observación 5. Respuesta a cuestionario de cada práctica 5. Descripción detallada de las observaciones 6. Conclusiones DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y EDUCACION AMBIETAL PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA LABORATORIO 2 Biología l 7. Referencias bibliográficas Preguntas a dar respuesta: ¿Qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada? ¿Son todos de igual tamaño y forma? ¿Se observan organismos móviles o estáticos? ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento al observar la letra? ¿Cómo se manifiesta el poder de resolución? ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento? ¿Cómo se manifiesta el poder de definición? ¿Cómo se manifiesta el poder de penetración o profundidad? ¿Cuál es la utilidad del microscopio? . ¿En qué montaje se observó mejor el poder de penetración? Calcule el diámetro del campo de visión para aumentos de 10X, 40X del mismo cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. ¿Al observar la letra asimétrica: ¿Se ve invertida, o en la misma posición en que estaría si se viera a simple- vista? ¿Parece como si se viera por un espejo? Al mover la preparación hacia la derecha. ¿Hacia dónde se mueve la imagen? ¿Al alejara el portaobjeto o la muestra de usted hacia donde se nueve la imagen?
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