iPS細胞・幹細胞研究ガイドタカラバイオがご提供する製品ラインナップ 2015年5月改訂版 iPS細胞の調製・培養に幹細胞の凍結保存、品質管理、解析にタカラバイオでは、遺伝子導入に関する長年の技術ノウハウを活かし、iPS細胞の調製や品質評価のための研究試薬をご提供しています。 ※Cellartisは幹細胞の基礎研究から応用までを支援するタカラバイオのブランドです。幹細胞の分化誘導、分化細胞の応用に幹細胞研究ガイド検索弊社ウェブサイトでより詳細にご覧いただけます。 200 μm 200 μm ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp iPS細胞の調製・培養に iPS細胞誘導までの実験フロー＜組換えレトロウイルスベクターを用いたiPS細胞誘導＞＜エピソーマルベクターを用いたiPS細胞誘導＞ pDON-5 OKSLN DNA Human iPS Cell Generation Episomal Vector Mix（iPS細胞誘導エピソーマルベクター混合物）を正常ヒト末梢血単核球などにエレクトロポレーション pE-amphoベクターと pGPベクター TransIT-293を用いて3種類のベクターを G3T-hi細胞にコトランスフェクション培養 iPS細胞誘導用遺伝子発現レトロウイルスベクター iPS細胞コロニーの出現 RetroNectin 固定化シャーレ or プレート正常ヒト皮膚線維芽細胞（NHDF-Ad） ES細胞用培地で培養（＋bFGF）受託メニューも承ります・iPS細胞作製受託（※）・テラトーマ解析・CGH/CNV Array解析 iPS細胞コロニーの出現 ※エピソーマルベクターによる作製にも対応 ◆ iPS 細胞誘導用遺伝子発現組換えレトロウイルスの調製製品名容量製品コード価格（税別） Human iPS Cell Generation™ All-in-One Vector 10 μg 3671 ¥160,000 Retrovirus Constructive System Ampho 1 Set 6165 ¥136,000 0.4 ml MIR2704 ¥36,000 ® TransIT -293 Transfection Reagent ◆ レトロウイルスベクターの感染とiPS 細胞誘導製品名 RetroNectin® (Recombinant Human Fibronectin Fragment) iMatrix-511 ★ TRACP & ALP double-stain Kit 容量 0.5 mg（0.5 ml）製品コード T100A 価格（税別） ¥28,000 350 μg 892011 ¥28,000 5枚分（24穴培養プレート） MK300 ¥29,000 ★無償のサンプル品（容量 175 μg）をご用意しています。 ◆ iPS 細胞誘導用エピソーマルベクター製品名 Human iPS Cell Generation™ Episomal Vector Mix 容量製品コード価格（税別） 105 μl 3673 ¥100,000 ◆ ヒトiPS細胞／ES細胞培養システム・・・フィーダーフリー培養におススメ！製品名 DEF-CS™ 500 Cellartisブランド内容 DEF-CS Basal medium 500 ml DEF-CS COAT-1 4 ml DEF-CS GF-1 750 μl×2 DEF-CS GF-2 500 μl DEF-CS GF-3 200 μl - 2 - タカラバイオ｜iPS細胞・幹細胞研究ガイドサンプル配布中！容量製品コード価格（税別）・・プレートコーティング剤 1 Kit ・・培地添加剤 Y30010 ¥90,000 幹細胞の凍結保存、品質管理、解析に ◆ 幹細胞・iPS細胞の凍結保存に STEM-CELLBANKER® GMP grade 製品コード容量価格（税別） CB045 100 ml ¥28,000 CB047 20 ml×4 ¥28,000 ● GMPに準拠して製造された幹細胞・iPS細胞用の細胞凍結保存液 ● 既知成分により合成された無血清タイプ。動物由来の成分を含まない。 ※原薬等登録原簿（マスターファイル）に登録されています。新登場【STEM-CELLBANKER®が掲載された文献】 A novel efficient feeder-free culture system for the derivation of human induced pluripotent stem cells. M Nakagawa et al, Scientific Reports. 4:3594 （2014） ◆ 幹細胞に残存するマウスフィーダー細胞（MEF）をqPCRで検出・定量製品コード RR290 Mouse Feeder Cell Quantification Kit 容量 100回価格（税別） ¥70,000 ● マウスミトコンドリアDNA領域に設計したプライマーにより、混在率0.001%まで検出可能 ● mtDNAのコピー数測定のための核DNA検出プライマーを添付。 MEFのロット間補正も可能【実験例】 MEF条件下からフィーダーフリー条件下の培養に移行したヒトES細胞に残存する実験例フィーダーフリー培養によるMEFの除去 MEFの定量 10% MEF条件下開始終了混在率 hES細胞培養フィーダーフリー条件下 8% 6% 4% （結果） MEF条件下で培養したヒトES細胞を常法にて回収すると8％のMEFが混在していたが、フィーダーフリー培養に移行して1週間培養するとMEF細胞の混在は0.5％まで低下した。 2% 0% ※本データは、国立大学法人京都大学より提供を受けたヒトES細胞KhES-1株を使用して取得しました。開始製品コード CY232 ◆ リアルタイムPCRでマイコプラズマを迅速検出 Cycleave®PCR Mycoplasma Detection Kit 終了容量 50回価格（税別） ¥57,000 ● マイコプラズマの16S rRNA遺伝子をターゲットとして、リアルタイムPCRでマイコプラズマを網羅的かつ特異的に検出 ● 少なくともMycoplasma属中の10種およびAcholeplasma属中の1種を感度よく検出 ● サンプルの取り扱いが少なく、コンタミネーションのリスクが軽減製品コード PH016 ◆ ES細胞／iPS細胞の多分化能関連遺伝子のモニタリングに PrimerArray® Embryonic Stem Cells (Human) 容量 1 Set 価格（税別） ¥68,000 ● 幹細胞の多分化能と自己増幅能に関する88種類の遺伝子の発現変動によるスクリーニングが可能 ● SYBR® Premix Ex Taq™ II との組み合わせで条件検討は不要 PrimerArray®とマイクロアレイの相関 ● マスタープレート方式なので、幅広いリアルタイムPCR装置で使用可能（1）KhES-1（diff/early） ● 専用の解析ツールで相対定量結果を簡単にグラフ化可能（2） KhES-3 (diff/early) 実験例ヒト ES 細胞株 KhES-1 および KhES-3 の Early passage （Early）、Late passage（Late）、Differentiated（Diff）の3段階の培養細胞サンプルから調製したRNAを用いて、幹細胞関連発現遺伝子の発現変動を解析した。結果の一部を示す。 ◆ 未分化マーカー遺伝子プロモーター領域のDNAメチル化解析に TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) 製品コード R110A 容量 250 U 価格（税別） ¥32,000 R110B 250 U×4 ¥96,000 ● バイサルファイトシーケンスにお勧め！バイサルファイト処理後のウラシルを多く含むDNAの PCR増幅に最適 ● 抗Taq抗体を用いたホットスタートPCR酵素が非特異的増幅を抑えて確実に増幅タカラバイオ｜iPS細胞・幹細胞研究ガイド - 3 - 幹細胞の分化誘導、分化細胞の応用に ◆ 間葉系幹細胞を用いた分化誘導ヒト間葉系幹細胞（Mesenchymal Stem Cells：MSC） ● 骨髄、臍帯マトリックス、脂肪組織由来の間葉系幹細胞 ● in vitro における分化能力について確認済み ● CD44 / CD105陽性、CD31 / CD45陰性 ● 専用の増殖培地、および、脂肪細胞、軟骨細胞、骨芽細胞、神経細胞への分化培地もそれぞれご用意【ヒト骨髄由来間葉系幹細胞（hMSC-BM）の分化】 a：間葉系幹細胞脂肪細胞分化培地（製品コード C-28011）により脂肪細胞に分化（Oil Red O染色） b：間葉系幹細胞軟骨細胞分化培地（製品コード C-28012）により軟骨細胞に分化（Alcian Blue染色） c：間葉系幹細胞骨芽細胞分化培地（製品コード C-28013）により骨芽細胞に分化（Alizarin Red S染色） d：間葉系幹細胞神経細胞分化培地（製品コード C-28015）により神経細胞に分化製品名 a b c d 容量ヒト骨髄由来間葉系幹細胞各1 vial （≧5×105 cells）ヒト臍帯マトリックス由来間葉系幹細胞ヒト脂肪組織由来間葉系幹細胞製品コード価格（税別） C-12974 ¥118,000 C-12971 ¥149,000 C-12977 ¥130,000 ※細胞の継代にはDetach Kit （製品コード C-41200 / C-41210 / C-41220、容量各30 ml / 各125 ml / 各250 ml）をご使用ください。 ◆ヒトiPS／ES細胞由来分化細胞 Cellartisブランド概要製品名容量製品コード価格（税別）ヒトiPS細胞由来肝細胞培養キット Cellartis Enhanced hiPS-HEP 1 Kit Y10050 （※1） ¥235,000 ヒトES細胞由来心筋細胞培養キット Cellartis® Pure hES-CM 1 Kit Y10060 （※2) ¥180,000 1 Kit Y10070 （※2） ¥180,000 ヒトiPS細胞由来心筋細胞培養キット ® ® Cellartis hiPS-CM ※1：培地添加剤（Cellartis HEP Supplement）とプレートコーティング剤（Cellartis HEP Coat）を添付しています。 ※2：細胞融解時に用いる培地のベース（Cellartis CM Thawing Base）と細胞培養用基本培地（Cellartis CM Culture Base）を添付しています。ヒトiPS細胞由来肝細胞培養キット（ Cellartis® Enhanced hiPS-HEP ） ● 安定したCYP活性を有し、毒物代謝、肝毒性、物質輸送等のin vitro 評価にお勧め ● 肝特異性マーカーを発現（右図→） ● ロット間差の少ない品質で、安定供給が可能 ● ウイルス感染分野やワクチン開発分野での研究に利用可能 ◆ 神経分化培地 NDiff® Cellartisブランド 227 A1AT 製品コード Y40002 容量 500 ml ● 接着単層培養条件下でのマウスES細胞の神経分化に適した完全合成無血清培地 ● 適切な因子の添加によるマウスES細胞の培養も可能 Alb 価格（税別） ¥48,000 マウスES細胞を神経細胞へ分化させた様子（7日目）・本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。・本パンフレット記載の価格は2015年5月25日現在の希望小売価格です。価格に消費税は含まれておりません。・ライセンス情報については弊社ウェブサイトにてご確認ください。・本パンフレットに記載された社名および製品名は、特に記載がなくても各社の商標または登録商標です。 2015年5月作成G 取扱店東京支店 TEL 03-3271-8553 FAX 03-3271-7282 関西支店 TEL 077-565-6969 FAX 077-565-6995 TaKaRaテクニカルサポートライン TEL 077-543-6116 FAX 077-543-1977 ウェブサイト http://www.takara-bio.co.jp Facebook http://www.facebook.com/takarabio.jp