Mikroskopie von Carl Zeiss Axio Observer Was wollen Sie heute vom Leben wissen? Beobachten. Manipulieren. Analysieren. Die inverse Forschungsplattform für das Live Cell Imaging. Wie öffnen Sie sich den Zugang zu den anspruchsvollsten Life ScienceApplikationen? 2001 wurde das menschliche Genom entschlüsselt. Eine wissenschaftliche Revolution. Doch damit fingen die Fragen an. Seither bewegt die internationalen Forschungsteams weniger das Was, mehr das Wie wenn es um Prozesse in und zwischen lebenden Zellen geht. Wie funktionieren Moleküle oder Proteine, Lipide, Enzyme, DNA, RNA? Wie interagieren sie? Und wozu? Auf der Suche nach den Antworten stehen anspruchsvollste mikroskopische Verfahren zur Beobachtung, Manipulation und Analyse im Mittelpunkt der Forschungsarbeit. Allen voran die Fluoreszenztechniken. Ihre Entwicklung hat sich Carl Zeiss zur Mission gemacht und seinem Engagement einen Namen gegeben: FluoresScience. Diese Initiative stellt seit Jahren die führenden Mikroskopsysteme für angewandte Forschung und Grundlagenforschung und hilft, in der Wissenschaft neue Wege zu gehen. Jetzt bringt eine technische Neuentwicklung die Wissenschaft ein weiteres Stück voran. Axio Observer, das inverse Forschungsmikroskop von Carl Zeiss. Entwickelt für ein Höchstmaß an Flexibilität in den aktuellen und zukünftigen Live Cell-Verfahren. Und realisiert als voll integrierte Forschungsplattform zur ZellObservation, Zell-Manipulation und Zell-Analyse. Wirtschaftlich ausbaubar vom Basisstativ bis in High Speed-, Laser Scanning Mikroskopie- oder Mikrodissektion-Dimensionen. Axio Observer: Womit könnten Sie den hohen Ansprüchen der Life ScienceProjekte heute besser begegnen? 2 Axio Observer 3 Das ApoTome und PlasDIC wurden mit dem R&D 100 Award ausgezeichnet. Ist die Optik bei lebenden Zellen an ihre Grenzen gelangt? Carl Zeiss hat die Möglichkeiten der Optik für seine • Isolierte Objektive i LCI Plan-Neofluar 25x und Forschungsplattformen seit jeher bis an die äußer- 63x und i Plan-Apochromat 63x. Thermisch ste Grenze ausgereizt. Mit Axio Observer bauen wir isoliert, nur so haben Sie die perfekte Tempe- diesen Vorsprung weiter aus. Mit Neuentwicklungen ratur am Ort der Beobachtung. in Kontrastverfahren, Objektiven und mit vielen • LD Plan-Neofluar Ph1 Ph2- Korr, die Innova- innovativen Details. An den Grenzen zum Unsicht- tion: positiver und negativer Phasenkontrast in baren stehen sie für noch etwas mehr Informa- einem Objektiv vereint. tionsgehalt, noch bessere Anpassung an die vielsei- • C-Apochromat und LD C-Apochromat, tigen Live Cell-Applikation, für noch komfortablere perfekt, wenn es auf kompromisslose Hochauf- Abläufe. lösung ankommt. Ideal für LSM, ApoTome und Dekonvolution. • Plan-Apochromat für höchste Ansprüche an Jede Reihe eine Klasse für sich: Bildebnung und Farbkorrektion. die Objektive • LD Plan-Neofluar, die anspruchsvollen Viel- Die Augen der inversen Forschungsplattform seitigen, einsetzbar für alle Deckglas-Präparate Axio Observer – entwickelt, um die unterschied- (0,17 mm) und Plastikkulturschalen mit Boden- lichen Aufgabenstellungen im Live Cell Imaging dicken bis zu 2 mm. brillant zu erfüllen. Und Objektivreihe für Objektiv- • EC Plan-Neofluar für starke Kontraste und reihe eine Klasse für sich: universelle Einsatzmöglichkeiten. • LD A-Plan, die günstigen, flexibel einsetzbaren • LCI Objektive LCI Plan-Neofluar 25x, 63x sowie Standardobjektive von Carl Zeiss für die inverse LD LCI Plan-Apochromat 25x. Hervorragende Multi- Mikroskopie. immersions-Objektive mit optimalen Korrekturmöglichkeiten für sphärische Abberation, ab- Optimal für das ganze Sehfeld: gestimmt auf das spezielle Temperaturspektrum der neue DIC in Life Science-Experimenten und hier die Der Differential Interference Contrast der neuen Besten von Carl Zeiss. Die LD Variante erlaubt Generation steht für Brillanz und homogene noch tiefer in die Probe zu fokussieren. Ausleuchtung über das gesamte Sehfeld. Bilddetails DIC DIC PlasDIC 1. 2. 4 3. 1. Vorderhirnneuronen (Ratte) kultiviert auf Poly-D-Lysin/Laminin-Deckgläsern. J. Perron, Columbia University, Columbia, USA. 2. MDCK Zellen (Hund) nach kurzer Inkubationszeit. R. Nitschke, Life Imaging Center, Universität Freiburg, Deutschland. werden bis in die Peripheriebereiche gut aufgelöst Innovation in Plus und Minus: und kontrastiert. Eine weitere Neuerung ist die der Phasenkontrast Kombination von Polarisator und Nomarski-Prisma Vertraut und doch überraschend anders: der neue in einem Sandwich. Ihr Vorteil: das bisherige manu- Phasenkontrast in einer wirtschaftlichen 2-in-1- elle Einschwenken des Polarisators entfällt. Lösung und einem neuen Anwendungsbereich. Der negative Phasenkontrast zeigt Vorteile bei Praktisch, ökonomisch, dicken Zellbereichen oder Teilungsstadien. Die überzeugend: PlasDIC Kombination von positivem und negativem Pha- Glas oder Plastik? Der ökonomische Reliefkontrast senkontrast erlaubt es jetzt, alle Strukturen Ihres von Carl Zeiss ist unempfindlich gegenüber dop- Objektes mit einem Objektiv optimal zu kontras- pelbrechenden Materialien und daher für Plastik- tieren. Das Umschalten: einfach über Blenden- schalen genauso geeignet wie für Glasboden- wechsel. Sie werden den neuen Phasenkontrast gefäße. In der Anwendung empfiehlt sich PlasDIC schätzen – beim normalen Monitoring genauso bei dickeren adhärenten Zellen oder Oozyten und wie für spezielle morphologische Fragestellungen. ist außerdem hervorragend geeignet für die Intrazytoplasmische Spermieninjektion (ICSI) aufgrund Automatisch schneller: der ausgezeichneten Reliefdarstellung. PlasDIC ist der neue Durchlicht-Shutter einfach zu bedienen und funktioniert bereits mit Neuer Standard seit Axio Observer: das schnellere der kostengünstigen LD A-Plan Reihe. Steigen Ihre Schalten, lautlos und schwingungsarm. Zeitge- Anforderungen, empfehlen sich die LD Plan- winn und Bedienkomfort basieren auf einem Neofluar Objektive. neuen integrierten Shutter-Konzept. Im Durchlicht zum ersten Mal automatisiert mit kurzer Schaltzeit. Und deshalb perfekt für die Konfiguration von Phase + 4. Phase 5. Time Lapse-Experimenten, z. B. für den schnellen Wechsel von Durchlicht zu Fluoreszenz. + Ph 3. Menschliche Embryonen (Vierzellstadium). S. Mittmann, IVF-Labor, Göttingen, Deutschland. - Ph 4. und 5. MDCK Zellen (Hund) – Dicke Zellbereiche werden durch den negativen Phasenkontrast besser dargestellt. R. Nitschke, Life Imaging Center, Universität Freiburg, Deutschland. + Ph 5 Warum dreht sich alles um die beste Fluoreszenz? Differenzierteste Fluoreszenztechniken – in der For- Signale randgelagerter Zellen sind nun besser ana- schung an lebenden Zellen werden sie zunehmend zu lysierbar – sowohl im Vergleich der unterschied- Standards. Carl Zeiss konzentriert sein Know-how lichen Fluoreszenzfarbstoffe als auch mit Signalen und seine Innovationskraft auf die Weiterentwick- zentral gelegener Zellen in einem Kanal. Alternativ lungen dieser Techniken. Um sie immer neuen An- hierzu entscheiden Sie sich für den Strahlengang wendungen zugänglich zu machen. An der Spitze der mit erweitertem Transmissionsspektrum bereits ab Entwicklung inverser Mikroskope ist Axio Observer. 340 nm. Mit der leistungsfähigsten, flexibelsten und schonendsten Fluoreszenz, die zu brillanten Ergebnissen Schneller und flexibler: führt. der Reflektorrevolver Die schnellere Anpassung der Reflektorbestückung Perfektioniert für alle Wellenlängen: der neue Fluoreszenz-Strahlengang Axio Observer steht für die neue Qualität in der Fluoreszenz. Apochromatisch korrigiert, bietet er gleich bleibend gute Kontrastierung und homogene Ausleuchtung bis in die Peripheriebereiche. Bei nahezu jeder Anregungswellenlänge. Ihr Vorteil: an das Experiment – bei der wachsenden Vielfalt fluoreszierender Proteine ein relevanter Zeitvorteil. Der Reflektorrevolver von Axio Observer ist hierfür gleich dreifach optimiert: sechs Filterpositionen bieten mehr Flexibilität. Der Austausch der Filtersätze ohne vorherigen Ausbau des Revolvers erspart einen kompletten Arbeitsgang. Und schließlich ist der Revolver von Axio Observer mit Positionswechsel unter 200 ms einfach schneller. Übrigens, über ACR* können die Filtermodule vom System automatisch ausgelesen und erkannt werden – die Konfiguration am Mikroskop oder in der Software entfällt damit komplett. Vorteile: beschleunigter Ablauf und Sicherheit in der Dokumentation. * Automatic Component Recognition. Verfügbar für Axio Observer.Z1 Fluoreszenz – Die Bedienung 6 Reflektorrevolver: eine Sache von Sekunden – jetzt werden die Filtersätze gewechselt, ohne den Reflektorrevolver zuvor auszubauen. Leicht erreichbar und einfach zu bedienen: die Blendenschieber von Axio Observer. 14 Strahlengang 15 1 Zwischenbildebene Fototubus 2 Okular 3 Zwischenbildebene Frontport 4 Zwischenbildebene Baseport 5 Umschaltung Strahlengang zw. Baseport/Frontport/Vis. Beobachtung 6 Sideport Prismen 7 Tubuslinse 8 Analysator 9 Reflektorwürfel 10 Leuchtfeldblende 11 Aperturblende 12 Filterschieber 13 HBO Lampe 14 HAL Lampe 15 Leuchtfeldblende 16 Polarisator 17 Aperturblende 18 Kondensor 19 Objektiv 16 2 1 17 18 13 19 10 11 9 8 3 7 12 6 5 4 Vielfalt für das Cell Observing: Standard oder High Speed: die Lichtquellen die Fluoreszenz-Shutter Für Axio Observer steht gleich ein ganzes Spektrum Zwei Shutter für die Fluoreszenz – mehr Optionen leistungsfähiger Lichtquellen zur Verfügung. Für alle für Ihr Experiment. Axio Observer verfügt neben Standardanwendungen gut geeignet sind die selbst- dem Standard-Shutter über eine externe und ex- justierende HBO Lampe sowie verschiedene, langle- trem langlebige High Speed-Variante (5 Mio. Schal- bige Metallhalogenidlampen. Für schnellste Anre- tungen). Via Triggerimpulse durch die Kamera gungswechsel im High Speed Imaging lässt sich die gesteuert, wird dieser Shutter nur unmittelbar zur auf Xenonlampen basierende Lichtquelle Sutter Bildakquise geöffnet. Die Lichtbelastung der Zellen Lambda DG-4 einkoppeln. Die innovative, auf Hoch- ist auf ein absolutes Minimum reduziert. Gerade für leistungs-LEDs basierende Lichtquelle Colibri emp- Live Cell-Experimente eine zentrale Komponente. fiehlt sich ebenfalls für schnellste Anregungswechsel. Ihr Vorteil: die kleine Bandbreite der LEDs von Colibri liefert extrem kontrastreiche Bilder. 1. 2. 1. Zytoskelett und Kern markiert mit Quantum Dots, HeLa Zellen. 2. Vorderhirnneuronen (Ratte) kultiviert auf Poly-D-Lysin/Laminin-Deckgläsern. Gefärbt mit DAPI (blau), TUJ1 Anti-Beta-Tubulin (grün) und Anti-ActRII (H65) (rot). J. Perron, Columbia University, Columbia, USA. Bei Colibri liefert jede LED einen definierten, schmalen Bereich des Spektrums. Unerwünschtes Licht entsteht gar nicht erst und muss daher auch nicht unterdrückt werden. 7 Variabilität und Reproduzierbarkeit: Brillante Entwicklung: die Blendenschieber die High Efficiency-Filtersätze Rechteckblende, FL-Abschwächer* und Irisblende*: Bis zu 50% kürzere Belichtungszeiten – die High die drei Blendenschieber stehen für die Einsatz- Efficiency, kurz: HE-Fluoreszenzfilter, bieten ein breite von Axio Observer im Live Cell Imaging. deutlich verbessertes Signal-Rausch-Verhältnis Und in Kombination aus motorischem Irisblenden- und sorgen für das schonendere Fluoreszenz- und FL-Abschwächer für ein Höchstmaß an Imaging lebender Zellen. Die erhöhte Transmission Motorisierung im Fluoreszenz-Strahlengang. Der bei Anregung und Emission führt zusammen mit motorische FL-Abschwächer stellt automatisch die extrem steilen Kanten zu einer klaren Signaltren- korrekte Fluoreszenz-Intensität ein, je nach Filter- nung und optimaler Ausbeute. satz und Objektiv. * Als mechanische oder motorische Variante erhältlich Blendenschieber Vielfache Optionen für ihren individuellen Arbeitsplatz: die manuellen oder motorischen Blendenschieber. Push&Click 00:00:00 8 00:12:00 00:25:00 Histon-2B-DsRed (rot) exprimierende HeLa Zellen, transfiziert mit HIV-1-Rev-YFP (grün). Hintergrund: Phasenkontrast. Durch Behandlung mit Leptomyzin B akkumuliert Rev im Zellkern. H. Wolff, GSF Institut für Molekulare Virologie, Neuherberg, Deutschland. Workflow Wer denkt den Workflow neu, wenn Applikationen immer komplexer werden? Die Zeiten sind vorbei, als sich Mikroskope alleine über optische Leistung differenzierten. Die Komplexität heutiger Anwendungen in allen Bereichen der Life Sciences macht die einfache Bedienbarkeit zu einem Erfolgsfaktor der Forschungsarbeit. Die Herausforderung für Carl Zeiss, den Workflow von der Planung bis zu Monitoring und Analyse neu zu überdenken und mit einem intelligenten Bedienkonzept zu verbinden. Axio Observer definiert ab sofort den Maßstab für Bedienkomfort und -effizienz. Die Voraussetzung dafür, dass das immense Leistungspotenzial dieser High End-Plattform schnell und ökonomisch nutzbar wird. Kultivierungsbedingungen steuern. Die Aktivierung des Kontrastmanagers oder kompletter persönlicher User-Settings losgelöst vom PC „just with a tip of your finger“ wird Sie begeistern. Für das Stativ D1 wurde ein neues LCD-Display mit umfassender Statusdarstellung entwickelt. Gewähltes Objektiv, Shutter-Stellung, etc.: alle Einstellungen sind mit einem Augenaufschlag einsehbar. Zudem ist das LCD eine erhebliche Hilfe bei der Systemkonfiguration. Freiraum für die Bedienung: die Docking Station Die raumsparende und immens praktische Lösung, Erkennbare Komfortsteigerung: wenn Sie das System direkt vom PC aus bedienen. TFT und LCD Über die Docking Station von Axio Observer haben Eingabe- und Monitoring-Station zugleich – Sie Zugriff zur kompletten Menüführung des TFT das Touchscreen TFT-Display für das motorisierte sowie aller Bedienelemente zur Probenpositionie- Axio Observer Stativ Z1 eröffnet eine neue Dimen- rung*. Die Bedienelemente sind identisch mit den sion in der automatischen Bedienung. Steuerung Elementen, die sich am Stativ befinden – eine und Monitoring wurden radikal zusammenge- Umstellung auf andersartige Knöpfe entfällt. Die führt. Das Ergebnis ist einzigartig: das gesamte Zusammenführung aller Bedienelemente in einer Mikroskop lässt sich über eine extrem kurze und kompakten Einheit: gerade bei komplexen System- übersichtliche Menüführung bedienen, gültig aufbauten ein wesentlicher Vorteil. auch für die Inkubationskomponenten, die die * In Verbindung mit Scanningtisch CAN TFT-Display Docking Station Das TFT-Display am Stativ oder in der Docking Station sorgt für transparente Menüführung bei der Steuerung und Konfiguration. 9 Zooplankton (Brachionus plicatilis) ernährt sich von Phytoplankton (Heterocapsa triquetra). A. Hagiwara, T. Oda, Faculty of Fisheries, Nagasaki University, Nagasaki, Japan. Kleine Details mit großer Wirkung: Sie wechseln, wer konfiguriert? die manuellen Bedienelemente ACR Sie spüren den Unterschied beim ersten Griff: die Die Automatic Component Recognition ACR steht Bedienelemente von Axio Observer sind durch- für das innovative Konzept der automatischen dachter, intelligenter und einfacher, als alles, was Erkennung von Objektiven und Reflektormodulen Sie bisher kennen. Die Knöpfe im Tastenring sind von Carl Zeiss. Die optionale Zusatzkomponente ohne Entfernung der Hand vom z-Trieb erreichbar. für Axio Observer.Z1 liest neu eingesetzte Filter- Dazu frei zu belegen* und blind bedienbar. sätze und Objektive aus und übernimmt sie in die Steuern Sie einfach das gesamte Mikroskop – ohne Systemkonfiguration. Das bedeutet für Sie deutliche den Blick vom Okular zu wenden. Die Rändelräder Zeitersparnis, reduziertes Fehlerrisiko und mehr für die Intensität der Beleuchtung und Öffnung der Komfort. Sowohl im Alltag beim Wechsel der Leuchtfeldblende im Durchlicht erlauben eine sehr Filtersätze als auch bei der gemeinsamen Nutzung feinfühlige Bedienung und damit ideale Anpas- der Filtersätze an mehreren Stativen. sung an Ihr Präparat. Dazu helfen Ihnen Grafiken am Stativ und im TFT-Display, einfach noch schnel- Einfach effizienter: die Kontrast- ler zum Ziel zu kommen. kombinationen im Durchlicht Ein Objektiv, drei Verfahren, mehr Informationen * Gilt bei D1 nur für einen Arbeitsplatz mit PC in weniger Zeit: für Axio Observer wurden die Kontrastkombinationen im Durchlicht weiter ausgebaut. PlasDIC & Phase & DIC oder negative Phase & positive Phase & DIC mit einem Objektiv sind Beispiele, wie Sie mehr und unterschiedliche Informationen über Ihre Probe bekommen. Oder auf einfache Weise an Flexibilität für unterschied- Ein Chip macht den entscheidenden Unterschied. Alle Filtersätze und Objektive sind in einer Version für die Automatic Component Recognition ACR lieferbar. liche Applikationen gewinnen. Hocheffizient. Automatic Component Recognition ACR 10 Workflow Automatisch im gewählten Länger entspannt bleiben: Kontrast: der Kontrastmanager der Ergotubus Ein spürbares Plus in Ihrem Workflow. Sie wählen Die Lösung für lange Arbeitszeiten am Mikroskop. den Kontrast oder die Kontrastkombination und 50 mm höhenverstellbar und mit ergonomisch das Stativ sorgt für die korrekte Einstellung der not- idealen festen Einblickswinkel von 25° erfüllt der wendigen Komponenten. Auch wenn Sie einen Ergotubus für Axio Observer höchste Komfortan- Vergrößerungswechsel vornehmen. Angenehm sprüche. Und sorgt für entspannte Haltung selbst und extrem zeitsparend insbesondere bei der bei stundenlangen Direktbeobachtungen. Direktbeobachtung, denn mehrere bisher notwendige Anpassungsschritte entfallen. Durchlicht und Auflicht gut geregelt: der Lichtmanager Mit der Docking Station befinden sich die bekannten Bedienelemente zur Steuerung des Mikroskopes direkt neben Ihrem PC. Der Lichtmanager der Generation Axio Observer ist mehr als ein wirksamer Schutz vor zu hohen Lichtintensitäten im Durchlicht. Denn sowohl im Durchlicht wie auch im Auflicht passt er die Lichtintensität beim Vergrößerungswechsel korrekt an. Zusätzlich werden die Fluoreszenzkanäle berücksichtigt und die Intensität entsprechend angepasst. Für die Zellen ein zusätzlicher Schutz vor zu hoher Anregungsintensität. Und für Ihre Augen bei der Direktbeobachtung angenehmer und weniger ermüdend. LCD Ergotubus z-Trieb mit Tastenring LCD-Display, Ergotubus oder Tastenring: das gesamte Bedienkonzept von Axio Observer ist auf komfortablen und schnellen Workflow ausgelegt. 11 Inkubation Was bringt der Quantensprung in der Zell-Inkubation? Mit Axio Observer beginnt eine neue Zeit der Kompromisslos in der Bedienung Zellinkubation. Temperatur, CO2 und Luftfeuchte sind Bei Axio Observer lässt sich die gesamte Inkuba- damit fest im Griff. Ein deutlicher Leistungssprung tion über das TFT-Display steuern, wahlweise auch mit richtungweisenden Innovationen – allen voran über die Systemsoftware AxioVision. Ein revolu- frei programmierbare Temperaturwechsel in Verbin- tionäres Bedienkonzept: dynamische Experimente dung mit einem weiten Temperaturbereich. sind nun frei programmierbar. Die innovative Experimentführung erlaubt Ihnen, temperatursensitive Proteinmutanten zu analysieren oder Heat- Optimierte Inkubatoren und Flexibilität in der Bereitstellung der Temperatur Inkubation für jede Anforderung – von Tischinkubator PM S1 bis hin zu XL Inkubatoren mit Varianten für TIRF und LSM oder der Mikromanipulation unter CO2-Atmosphäre stehen Ihnen viele Optionen offen. Kompakt und komfortabel: die Tischinkubation erlaubt neben der elektrischen Beheizung auch das Temperieren auf Basis einer Kühl- bzw. Heizflüssigkeit für höchste Freiheit in der Experimentführung, schnelle Temperaturwechsel und einen extrem großen Temperaturbereich von 4-45°C. Das neue Stapelkonzept für die Kontrollmodule Höchste Effektivität bei der Bereitstellung der Umweltparameter, absolut platzsparend und dabei ökonomisch. Die Kontrollmodule können je nach Bedarf aufgerüstet werden. So haben Sie zu jeder Zeit das System, das Ihren Ansprüchen entspricht. Inkubator PM S1 1. shock-Experimente durchzuführen. Die thermisch isolierten Objektive und Kontrollsensor T S1 Thermisch isolierte Objektive stehen für optimale Temperatur am Probenort und sind ideal für dynamische Temperaturexperimente, weil der Temperaturfluss in hintere Objektivbereiche unterbrochen ist. Die gewünschte Temperatur wird dadurch noch schneller und exakter erreicht. Eine weitere, wichtige Option ist Kontrollsensor T S1. Damit ist die Temperatur am Ort der Beobachtung nun exakt messbar. Ihr Experiment ist somit validiert. Alles bleibt im Trockenen: Aqua Stop II Wirksamer Mikroskopschutz bei vollem Bedienungsfreiraum: Aqua Stop II für Axio Observer ist nun noch sicherer durch lückenlosen Schutz. Beim häufigen Wechsel der Petrischale, aber auch gerade bei Perfusionsexperimenten unverzichtbar. Empfindliche Mikroskopkomponenten sind perfekt geschützt. Aqua Stop II 2. 1. Optimale Inkubationsbedingungen, mehr Freiraum: der Inkubator PM S1 für Petrischalen und Multiwell-Schalen. 2. Der Aqua Stop II – perfektes Sicherheitskonzept für Axio Observer. Fokus Was bietet Ihnen mehr Sicherheit als Definite Focus? Neu entwickelt, um perfekte Driftfreiheit in z und somit maximale Sicherheit im Live Cell Imaging zu gewährleisten: Definite Focus von Carl Zeiss. Eine einmal ausgewählte Präparatebene wird dauerhaft gehalten, auch wenn sie kontrastarme Strukturen aufweist – ein wesentlicher Vorteil gegenüber softwarebasierten Ansätzen. Nicht verwertbare Experimente gehören ab sofort der Vergangenheit an. Das Strahlvereinigermodul für Definite Focus sitzt im Objektivrevolver und kann bei Bedarf schnell entfernt oder für Spezialanwendungen ausgetauscht werden. Immer perfekt im Fokus werden. Für Fluoreszenzanwendungen sind Stan- Das Infrarotlicht einer LED tastet die Weglänge dardfiltersätze verwendbar. Wirtschaftlichkeit inklu- zwischen Objektiv und Boden des Kultivierungs- sive: Definite Focus kann auf bestehende Stative gefäßes ab. Treten Abweichungen auf, z. B. durch Axio Observer.Z1 vor Ort nachgerüstet werden. eine veränderte Raumtemperatur, stellt das System über den z-Trieb die ursprüngliche Beob- Zentral und leicht zu bedienen achtungsebene automatisch wieder ein. Definite Focus ist optimal eingebunden in das Bedienkonzept von Axio Observer. Statuseinstellung Vielseitig einzusetzen und sofort und Monitoring erfolgen über das TFT Display von startklar Axio Observer oder über AxioVision. Wie sämtliche Fluoreszenzanwendungen bleiben vom LED- steuerbaren Komponenten wird auch Definite Licht unbeeinträchtigt, denn die eingesetzte Focus somit zentral bedient. Komfortabel und einfach. Wellenlänge (835 nm) ist von den Anregungsund Emissionsspektren aller gängigen Chromo2. Auch Kalziummessungen phore weit entfernt. oder Tweezer-Techniken sind möglich. Time Lapse-Experimente können mit Definite Focus ohne auf den temperaturstabilen Zustand der Mikroskopkomponenten zu warten sofort gestartet werden. Auch dynamische Experimente, Definite Focus projiziert ein Gitter auf den Gefäßboden, das dieser auf einen Sensorchip reflektiert. Aufgrund der Schrägstellung des Sensorchips ist nur ein schmaler Bereich des Gitters scharf abgebildet. Driften werden ausgeglichen, indem dieser schmale Bereich über den z-Trieb von Axio Observer scharf gehalten wird. bei denen unterschiedliche Temperaturen vorgeLED (835 nm) geben werden, sind mit Definite Focus schnell Reflektierende Oberfläche und komfortabel durchführbar. Verschiebung bedingt durch Driften Gitter Flexibel und ökonomisch Mit Definite Focus können an Axio Observer alle Objektiv Fixierter Sensorchip gängigen Objektive verwendet und alle Kontrastierungsmethoden durchgeführt werden. Auch Plastikschalen und LD Objektive können eingesetzt Scharf abgebildeter Bereich auf dem Sensorchip Strahlvereinigermodul Gitterprojektion 13 Wie wächst eine Zellforschungsstation mit Ihren Anforderungen? Noch nie hat die Integration von Mikroskop, Soft- Modul für Modul. Für die mehrdimensionale ware und externen Komponenten ein derartig Bildaufnahme z. B. mit Mehrkanal-Fluoreszenz, hohes Leistungsniveau erreicht. Und noch nie waren Zeitreihen, Z-Stapel oder Mark&Find. Die Durch- Systeme für das Beobachten, die Manipulation und führung dynamischer Temperaturexperimente ist die Analyse so flexibel. Die zukunftweisende Archi- schon mit dem Basispaket möglich. tektur von Axio Observer öffnet das System für die uneingeschränkte Einbindung externer Komponen- Gezielter zum Ergebnis: ten. Und machen die innovativen Zellforschungs- die Analyse mit AxioVision stationen von Carl Zeiss zu Lösungen, mit denen Sie Anspruchsvollste Aufgaben intelligent vereinfacht – auch die anspruchsvollen Anwendungen realisieren, die Analysemodule von AxioVision bieten für fast die noch vor Ihnen liegen. jede Applikation die Lösung auf höchstem technischen Niveau. Einsetzbar auch im laufenden Experi- Modulare Intelligenz: die Dokumentation mit AxioVision Entwickelt, um auch die komplexen Anwendungen mit lebenden Zellen ökonomisch zu machen, setzt die Mikroskop-Software von Carl Zeiss die Standards in Benutzerführung, Individualisierung und Leistungsspektrum. Vom Basispaket bis in anspruchsvollste Dimensionen ausbaubar, wächst AxioVision buchstäblich mit Ihren Aufgaben. ment. Beispielsweise beim Modul Physiologie. Es übernimmt den Intensitätsvergleich innerhalb der Kanäle in definierten Regionen (ROI) inklusive der grafischen Darstellung. Daneben stehen Ihnen mit AxioVision viele weitere Module zur Verfügung. Für Standardintensitätsmessungen zum Beispiel. Oder für die Positionsanalyse unterschiedlicher Fluorophore (Kolokalisation). Auch wenn es darum geht, Emissionen den Fluorophoren zuzuordnen (Widefield Multichannel Unmixing). Oder für intelligente Zeitreihen-Verarbeitung, u. a. zur Darstellung bewegter Objektregionen unter Angabe von Geschwindigkeit und Beschleunigung. AxioCam 14 Gesamtsystem Sehen und dokumentieren: abgestimmt, ist jede einzelne Komponente – die Blauen von Carl Zeiss Mikroskop, Kamera, Lichtquelle, Shutter sowie die Die Kameras von Carl Zeiss empfehlen sich in allen Fokussierung – für maximale Geschwindigkeit opti- Leistungsklassen – für das Fluoreszenz-Imaging miert. Oft sinnvoll als Ergänzung des High Speed- besonders in monochrom. Die AxioCam HRm mit Systems: das AxioVision Modul Physiologie zur höchster Auflösung, 14 Bit Dynamik und optiona- Kalkulation von Emissionsintensitäten (Ratio-Experi- lem Microscanning. Die AxioCam MRm mit hoher smente) mit Dual Kamera Option. Sensitivität und ihrem vielseitigen Einsatz- spektrum. Oder die AxioCam HSm, die bewegte Ausgezeichnete optische Schnitte: Bilder in Echtzeit auf die Festplatte bringt. Mit bis ApoTome zu 360 Bildern pro Sekunde*. Gemeinsam ist allen Die Lösung für das überstrahlungsfreie 3D Imaging Modellen: Sie entscheiden sich für perfekt inte- dicker Proben und Gewebeschnitte. ApoTome be- grierte Kameratechnik, die die Performance Ihres geistert mit ausgezeichneter Bildqualität und einem Systems optimal unterstützt. denkbar einfachen Bedienkonzept. Einsetzbar bei den D1 und Z1 Stativen von Axio Observer, wird der Komplett für das Live Cell Imaging Mikroskopeinschub einfach in die Ebene der Leucht- bis in High Speed-Dimension: feldblende des Auflichtstrahlengangs gebracht. Über Cell Observer® das Prinzip der Gitterprojektion entstehen online ® Cell Observer ist seit langem die etablierte Kom- präzise optische Schnitte. Mit erhöhtem Kontrast plettlösung im Live Cell Imaging. Die neue Option und deutlich gesteigerter axialer Auflösung. ® Cell Observer HS (High Speed) ist für die Dokumentation schneller Prozesse und Langzeitbeob- High End in 3D: die LSM Systeme achtung im Live Cell Imaging perfektioniert. Im Unübertroffen in spektraler Auflösung, zeitlicher Mittelpunkt der Einsatzmöglichkeiten: Kalziumstu- Auflösung und Sensitivität: die Laser Scanning dien, Zilienbewegungen, Vesikeltransport, Entstehung von Mikrotubuli… D. h. hochdynamische Pro- LSM Duo zesse, die höchste Anforderungen an das gesamte Erfüllt selbst die höchsten Ansprüche an die konfokale Mikroskopie: die Verbindung von LSM META und LSM LIVE lässt absolut keine Wünsche offen. ® System stellen. Alle Elemente von Cell Observer HS werden direkt per Hardware und damit ohne Verzögerung gesteuert. Perfekt aufeinander * Bei Binning 5x5, volles Kamerasehfeld ApoTome 15 0:00 2:45 3:00 Hormoninduzierte Genexpression in HeLa Zellen. Das mRFP-markierte Protein (gelb) wird hormonell induziert und induziert seinerseits die Expression des YFP-markierten Reporterproteins (blau). H. Wolff, GSF Institut für molekulare Virologie, Neuherberg, Deutschland. Systeme von Carl Zeiss sind die High End- Schneiden und Entnehmen von Analysematerial Techniken beim Blick in die Tiefe Ihrer Zellen. ohne jede Berührung der Probe. Kontakt- und LSM 510 META erfasst sogar die spektrale damit kontaminationsfrei erhalten Sie reinstes, Signatur jedes einzelnen Bildpunktes – für perfek- eindeutig definiertes Probenmaterial für alle Arten tes Unmixing. LSM 5 LIVE bringt mit > 100 von Downstream-Prozessen. Von genetischen frames/sec. eine neue Dimension in die Scange- Analysen bis zur Kultivierung isolierter Zellen. In schwindigkeit – und dies bei noch höherer Sen- der DNA- und RNA-Aufarbeitung, zur Proteinana- sitivität. Ideal für die Beobachtung von Transport- lyse und in der Forschung mit lebenden Zellen bie- vorgängen in Zellen und Organismus, z. B. die tet dieses System der Wissenschaft neue Möglich- Bewegung von Blutkörperchen im Gefäßsystem keiten und Perspektiven. oder die Veränderung dendritischer Spines an Neuronen. LSM 510 NLO ermöglicht mit seiner Höchste Auflösung im Multiphotonenanregung in ungeahnte Tiefen des evaneszenten Feld: Laser TIRF Präparates vorzudringen – bei idealen Vorausset- Laser TIRF von Carl Zeiss steht für neue Erkennt- zungen mehrere 100 µm. nisse über membrannahe oder membrangebundene Transportprozesse. Aber auch zellfreie Systeme Hochreine Proben für exakte stehen im Fokus, u. a. beim Studium von Protein- Ergebnisse: PALM MicroBeam Protein-Interaktionen. Die kompakte Komplett- Enorm in der Einsatzbreite und 100% berührungs- lösung für die Total Internal Reflection Fluores- frei bei der Isolation kleinster Gewebeproben wie cence bietet die beste Bildqualität in allen Wellen- Chromosomen, Organellen, Zellen oder kleinen längen – ohne Nachjustage des TIRF-Winkels. Organismen: PALM MicroBeam ist die Lösung für Platzsparender Ansatz: der TIRF-Schieber wird ein- Laser Microdissection and Pressure Catapulting fach in die Leuchtfeldebene eingeführt. Vollstän- (LMPC), das erstmals Lasermikrodissektion mit dig durchdacht bis in die Zusatzkomponenten wie dem Transport durch Laserlicht verbindet. Das ein- spezielle TIRF-Inkubatoren mit integrierter Laser- zigartige patentierte Verfahren ermöglicht das sicherheit. PALM MicroBeam Lebende Zelle nach TIRF Laser-Transportpuls 1. 16 1. B16/F1 Melanom Zellen (Maus) – TIRF Beleuchtung. Blau: CFP-Aktin. Anregung 458 nm, grün: DsRed-Clathrin Light Chain A. Anregung 514 nm. Alpha Plan-Fluar 100x/1,45 Öl. Oberbanscheidt, van den Boom, Bähler, I. Allg. Zoologie u. Genetik, Universität Münster, Deutschland. C D A. TIRF B. Laserport C. Laser (Catapulting, Tweezer) D. Epi-Fluoreszenz A Neue Flexibilität in den Fluoreszenz- Basis für höhere Erfolgsraten: Axio anwendungen: der Laserport Observer in der Mikromanipulation Speziell für anspruchsvolle Laseranwendungen Axio Observer ist die perfekte Plattform für die wie FRAP, Uncaging oder für die gezielte Deletion In-vitro-Fertilisation (IVF) oder für die Arbeit mit zellulärer Strukturen entwickelt: der Laserport für Stammzellen. Gleich mehrere Gründe sprechen Axio Observer. Für die Aufnahme Ihrer eigenen dafür. Die extrem hohe Stabilität und die vielsei- Lösung zur Einkopplung. Er steht für simultanes tigen Adaptionsmöglichkeiten für Manipulatoren Arbeiten mit Auflichtfluoreszenz, für den schnellen sind nur zwei davon. Ein weiterer Grund ist PlasDIC, Wechsel zu TIRF-Applikationen u.v.m. Insgesamt für der innovative Reliefkontrast für die Durchführung eine neue Flexibilität in der Anwendung – ohne die der Intrazytoplasmischen Spermieninjektion (ICSI). Notwendigkeit, den Unendlichstrahlengang zu er- Einfach überzeugend in seiner Qualität und leichten weitern. Und ohne Kompromisse in puncto opti- Bedienung – und bereits vielfach in IVF-Laboren ein- sche Qualität. gesetzt. Aber auch das optimierte klassische DIC ist B mit höchster Detailauflösung ideal für noch höhere Erfolgsraten, z. B. bei der Spermienbeurteilung. Ein weiteres wichtiges Detail ist der Glashalterrahmen Thermo Plate. Die Temperaturverteilung in der Kulturschale ist dadurch homogen. Die gesamte Mikromanipulation – Eppendorf Tischoberfläche ist absolut eben – das Handling der Kulturschalen dadurch sicher und unproblematisch. Mikromanipulation – Narishige 17 Warum ist die Basis für alle Zellforschungssysteme mehr als ein Stativ? Die Anforderungen an ein Forschungsmikroskop in den • Axio Observer.A1: Für anspruchsvolle Life Sciences sind so vielfältig wie die Applika- Routineaufgaben im Live Cell Imaging und tionen. Entsprechend variabel ist das Ausbaukonzept gerade auch in der Mikromanipulation ideal. von Axio Observer. Drei Stative, konzipiert für unter- Das manuelle Stativ bietet dieselbe hohe schiedliche Anwendungsschwerpunkte. Dieses Konzept optische Qualität wie die anderen Typen. ist die Voraussetzung dafür, dass Sie mit Axio Observer • Axio Observer.D1: Höherer Bedienkomfort, jede Systemlösung wirtschaftlich realisieren. mehr Flexibilität. Beim D1 Stativ können Reflektorrevolver, Kondensor und Auflichtstrahlengang motorisch gewählt werden. Drei für mehr Entscheidungs- • Axio Observer.Z1: Das Non-puls-ultra der freiraum: die Stativtypen inversen Forschungsmikroskopie bietet der- Vom ökonomischen Einstieg in die Forschungsklasse zeit das Maximum an Bedienkomfort und bis zu den High End-Dimensionen des Live Cell Flexibilität für automatisch geführte Online- Imaging: das Stativkonzept von Axio Observer gibt Experimente. Ihnen den Freiraum, sich je nach Anforderung und Budget zu entscheiden. Immer für ein Hochleistungsmikroskop, immer wirtschaftlich sinnvoll: Axio Observer: drei Stative, drei Bedienkonzepte Axio Observer.A1 Axio Observer.D1 Axio Observer.Z1 Die Basislösung für die manuelle Bedienung Mehr als Standard: halbmotorisch mit einem frei konfigurierbaren Tastenring*, mit LCD-Display und Lichtmanager Das Höchstmaß an Komfort: vollmotorisch mit zwei frei konfigurierbaren Tastenringen, mit TFT-Display am Stativ oder in der Docking Station, Lichtmanager und Kontrastmanager * Voraussetzung ist ein Arbeitsplatz mit PC 18 20 21 22 Systemübersicht 42 36 46 42 36 46 42 36 46 23 297 187 425 646 Stative 150 294 386 468,5 613 Axio Observer Ausrüstung Stativ Codierung Tubuslinsenaufnahme Optovarrevolver Objektivrevolver Reflektorrevolver Kondensor Auflichtstrahlengang Shutter Blendenschieber oder FL-Abschwächer Dokumentation z-Fokus Display Laserport Schaltspiegel für 2 Leuchten Erregerfilterrad Aqua Stop II Lasersicherheitseinrichtung TIRF/LSM Imaging Confocal - = nicht möglich + = im Stativ enthalten o = optional möglich Option manuell motorisch vom Stativ auslesbar 1fach 3fach cod 3fach mot 3x H/3x H DIC man 6x H DIC cod 6x H DIC mot 6x H DIC ACR mot 6x man 6x cod 6x mot 6x mot ACR N.A. 0,35 man N.A. 0,55 man N.A. 0,55 mot N.A. 0,8 man N.A. 1,4 man apochromatisch man apochromatisch mot UV optimiert man schneller Uniblitz-Shutter DL Shutter Standard AL schneller Uniblitz-Shutter AL man mot Sideport (Links) Sideport (Rechts) Fototubus Baseport/Frontport man mot LCD-Display TFT-Display Docking Station für TFT man mot AxioCam/AxioVision ApoTome Cell Observer® TIRF LSM 510 LSM Exciter ConfoCor 2 A1 + + + o o o o o o o o o o o + o o o - D1 + o* + o o • o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o + + + o o o o o o o o o - Z1 + + o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o + + o + o o o o o o o o o o o o • = erforderlich * = optional: Reflektorrevolver, Kondensor und Auflichteinrichtung 19 Alles von Vorteil Das Mikroskop • Die neue Flexibilität in der inversen Forschungsklasse • Entwickelt für Observation, Manipulation und Analyse lebender Zellen • Automatic Component Recognition ACR für Objektive und Reflektormodule • Einfach effizienter durch mehr Kontrastkombinationen im Durchlicht • Optimal geregelt durch Kontrast- und Lichtmanagement Die Optik • Länger entspannter Arbeiten mit Ergotubus • Hochleistungsobjektive für die unterschiedlichen • Automatisiert für Zeitgewinn und mehr Aufgabenstellungen im Live Cell Imaging, Bedienkomfort durch neues Shutter-Konzept führend durch spezielle LCI und thermisch isolierte Objektive • Optimierter Differentieller Interferenz Kontrast für homogene Ausleuchtung über das gesamte Sehfeld • Innovativ und offen für neue Anwendungs- Die Sicherheit • Unerschütterlich: das bewährte Pyramidendesign • Wirksamer Mikroskopschutz bei vollem Bedienungsfreiraum durch Aqua Stop II bereiche: die Kombination von positivem und negativem Phasenkontrast in einem Objektiv Die Zellforschungsstation • Einzigartige Flexibilität für jedes AnwendungsDie Fluoreszenz • Absolute Brillanz bis in die Peripheriebereiche durch neu designten Fluoreszenzstrahlengang • Apochromatische Korrektion für beste Abbildung aller Wellenlängen • Bis zu 70% höhere Anregungsintensität durch leistungsstarke Filtersätze niveau von Routine bis High End • Ein Höchstmaß an Integration auf allen Systemebenen • Zell-Inkubation auf einem neuen Leistungsniveau • Offene Systemarchitektur für einfaches Einbinden externer Komponenten • Bis zu 50% kürzere Belichtungszeiten durch HE-Filtersätze • 6fach Reflektorrevolver, schneller im Positions- Das System • Optionen: Cell Observer® oder Cell Observer® HS wechsel (< 200 ms) mit neuem Quick Change- • Imaging Software AxioVision Konzept für die Filtersätze • TIRF, LSM, Mikrodissektion, Laserport für • Vielseitiges Beleuchtungsspektrum von der selbstjustierenden HBO bis zur High Speed- FRAP und Uncaging • Einzigartige Lösungen für die Inkubation Lichtquelle Das Ausbaukonzept Der Workflow • Neu dimensionierter Bedienkomfort für Steuerung und Monitoring via TFT-Display • Flexible Systemsteuerung über Stativ, TFT, Docking Station oder PC • Höchstleistung wirtschaftlich realisierbar: das variable Ausbaukonzept in drei Stativen • Konzipiert für unterschiedliche Anforderungen und Anwendungsschwerpunkte • Zukunftssichere Wachstumsplattform 60-2-0015/d – gedruckt 08.08 Carl Zeiss Microscopy GmbH 07745 Jena,Germany BioSciences [email protected] www.zeiss.de/axioobserver Änderungen vorbehalten. Gedruckt auf umweltfreundlich chlorfrei gebleichtem Papier. • Spürbar intelligenter in der manuellen Bedienung
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