免疫反応下における好塩基球の形態学的研究第1編特異的抗原による好塩基球の形態学的変化の走査型電子顕微鏡観察岡山大学医学部第2内科学教室(主任:木村郁郎教授) 大学院医学研究科小林誠 (昭和54年3月23日 Key words:好塩基球,脱走査電顕,気第1章緒顆粒,特異的抗原管支喘息超微構造観察における有用性が広く認識されるに至言好塩基球は1879年Ehrlich1)に受稿) っているが,好塩基球についての走査型電子顕微鏡より初めて記載されを用いた観察はみあたらないようである.そこで著た多核白血球の1つで,組織肥胖細胞と同様のメタ者は走査型電子顕微鏡を用いた末梢血好塩基球の観クロマジーを呈する顆粒で満たされた血液細胞であ察法の考案,およびこれを用いて気管支喘息患者のるが,末梢血中への出現率は他の白血球成分に比し末梢血に特異抗原を添加した際の好塩基球の細胞表て極端に少なく,その機能については最近まで不明面の形態学的変化特に顆粒放出機序について検討をのままであった。1961年にShelley2)らはペニシリン行なったので報告する. 過敏症の患者末梢血にペニシリンを添加した際に好第2章対象並びに方法塩基球が脱顆粒を起こすことを光学顕微鏡で観察し, また木村ら3),4)は好塩基球好酸球同時直接算定液を考第1節案し,こアレルギー性疾患を有しない健康人3例,それを用いて気管支喘息の発作前後で好塩基球が変動することを明らかにし, Pruzansky tterson5)は and レルギー症4例,お Pa- アレルギー患者の末梢血に特異抗原を添を発見し,後にIgEが (Table あること好塩基球とのみ結合し,他 cellでアレルゲン或いは抗ヒト免疫グロプリンEと ctionに diatorをよりhistamineを放出し,即含む各種のchemical 時型アレルギ/反ことが判明したが,ア好塩基球浮遊液の作製好塩基球の分離は,ヘパリン0.5mlをスポーザプル注射器で,空のintera 14×104mmの me W. 応を惹起するシリコン処理試験管で, 6% 275.000) 1mlとともに30分 ∼1時の上清1m2か塩基球の形態的変化特に顆粒放出機序については, よる比重遠沈法を用いて行なった.次未だ不明の点が多いようである. rich fractionで一方1973年頃からPolliack8),9),10),11)らにより走査型電子顕微鏡を用いてB & Tリン処理試験管に採取しRPMI ンパ球を始めとすに行なわれるようになり,走浮遊して,好査型電子顕微鏡の表面第2項 733 ら教室いでbasophil を村田ピペットでシリコ 1640に塩基球浮遊液1.0mlを受身感作処理 (M. 度勾配液にて1200rpmで10 分間遠沈して洗滌し, cell pelletをRPMI る各種白血球の細胞表面形態についての研究が活発. 採血し, dextran 間室温に放置の谷崎ら12)の考案したFicoll-Conray濃ある第5層入れたディ腹時静脈血6mlをして赤血球を沈降させた後,そレルギー反応の場における好を選んだ。方法第1項あり, ばア scoreが+3 1) 第2節の白血球とは結合しないことを証明した。こうした一連の研究により好塩基球はIgEのtarget よびダニのRAST 以上のアトピー型気管支喘息患者4例加すると好塩基球が減少することを見出した。これに相前後して石坂ら6),7)はreaginがIgEで対象 1640に作製した。再 734 小林誠 Table 1 Clinical features of subjects * Atoplc dermstltls ** HD:House-dust BW: Allerglc Buckwheat rhinitis *** Ca: Candida not Br: Broncasma tested Alt: Alternaria Asp: Asperglllus RW:Ragwced 受身感作のための血清はダニ過敏性を有するアトピー型気管支喘息患者(21才,男, RAST scoreダニ+4)か IgE>4000IU/ml, ら分離した血清を1.0mlずつ試験管に分注し凍結保存(一70℃)しの都度融解して実験に供した.受ておき,そ身感作処理13),14)は健康人末梢血好塩基球浮遊液に同量の上記血清を加え, 37℃30分間恒温漕でincubateし, て洗滌したものを,受 mlと RPMI1640に身感作処理好塩基球浮遊液1.0 した. 第3項添加抗原及び添加濃度上記好塩基球浮遊液1.0mlに下記の抗原液O.1mlを添加した. (1)対照:生 (2)そ理食塩水ば粉抗原: 10-3稀 (3)ダ 10-1稀釈液(2.88mg/ml)および釈液(2.88×10-2mg/ml) ニ抗原: 10-4稀 10-2稀釈液(0.975mg/ml)および図1.好塩基球分離と走査電顕標本作製法釈液(0.975×10-2mg/ml) なお非受身感作処理好塩基球浮遊液には(1), (2), (3),を,受身感作処理好塩基球浮遊液には(1), (3)を添加し,恒温漕にてそれぞれ37℃15分間incubateし料台に付着させた.その後, ered (PH. 4℃1時た。 glutaraldehyde 2.5%cacodylate 7.4 320m buff- osmol)にて間固定を行なった. (2)光学顕微鏡及び走査型電子顕微鏡下での同一第4項走査型電子顕微鏡標本の作製と観察細胞同定法に関する考案:好塩基球の同定は木村3) (図1) (1)固定:反の好塩基球好酸球同時直接算定液を用いて行なった。応を終了した好塩基球浮遊液をゆるやかにピペッティングした後,予でcoat15)し 1∼2滴め, poly-L-lysine た非対称なマーク入り試料台上に,そを滴下し, の 5分間室温に放置して細胞を試即ち,固定の終了した試料台を取り出し0.1M late buffer (pH. 7.4)で cacody 数回洗浄しな後 ,標本を乾燥させない様に素早く好塩基球好酸球同時直接算定液を滴下し,光学顕微鏡で観察した.その結果免疫反応下における好塩基球の形態学的研究好塩基球は写真1に示す如くメタクロマジ-を呈し, さ(0.15∼0.4μ)の明らかに好塩基球と判定された.その好塩基球の位 8, 置をチャートに記入し,同時にカラ-スライド用写 9, ③ 735 小孔を有する好塩基球.(写真 10) ガラス板上に付着し,膨化状で短桿状突起が真を撮影して,走査型電子顕微鏡観察で同一部位を消失し;細胞膜が広範に欠損したと思われる好塩基確認する際に使用した, 球.(写 (3)脱水,置 0.1M 換,臨界点乾燥:同 cacodylate ン系列(25%, で各5分 bufferで 50%, 70%, 間脱水し,次置換した後,日定終了後直ちに洗滌し,上 90%, 95%お昇アセトよび100%) いで酢酸イソアミルで一昼夜立臨界点乾燥装置(HCP-1)を用い (4)観察: EIKO IB-3型 HXM-2X及イオンコーターでPt-Pd びJSM-U3型を用いて観察した.写真 ②(矢走査電子顕微鏡印)は写真1とれ,各種抗原添加別の出現頻度について検討を行なった. 第2節健康人における好塩基球の形態学的検討. 健康人末梢血好塩基球に生食水,そば粉抗原10-1稀釈液およびダニ抗原10一2稀釈液を添加した際の形態学て液体炭酸ガスにて臨界点乾燥16)を行なった. 蒸着後, 真11, 12) 以上の各変化は分泌様式を示唆する所見と考えら同一の好塩基球を示す. 的変化を第3章第1節に述べた如き分類に従って, その出現頻度を検討した. 細胞形態:生 (Table 2) 食水を添加すると観察好塩基球数24 個のうち球状好塩基球の出現率は87.5%と第3章実験成積第1節抗原添加による好塩基球の形態変化の分類高率で, 洋梨状及び膨化状好塩基球はそれぞれ4.2%, 8.3% と低率であった.一方そば粉抗原液添加では26個の観察好塩基球はすべて球状好塩基球であった.ダニ抗原液を添加すると22個の観察好塩基球のうち球状健康人,そばアレルギー症およびダニ過敏性気管好塩基球の出現率で86.4%で,洋梨状および膨化状支喘息患者の末梢血好塩基球に生理食塩水,そば粉好塩基球の出現率は4.5%, 抗原液およびダニ抗原液をそれぞれ添加した際の好以上3種の添加液ではいずれも球状好塩基球の出現塩基球の形態変化を走査型電子顕微鏡にて観察し, が著明で,洋梨状および膨化状好塩基球の出現は低細胞形態及び細胞表面超微構造について検討を加え率であった.これに対して受身感作処理好塩基球25 た. 個にダニ抗原を添加した際には球状好塩基球の出現第1項細胞形態について率は60%と,非走査型電顕顕微鏡観察により,次の3種類の細胞形態を示す好塩基球が観察された. ① 直径が約5∼6μ で,細胞表面に密に短桿状突起を有する球状好塩基球(写真3) ② 細胞表面の一部で短桿状突起が粗になり,そこから旗状の突起を出し,活発に遊走するが如き洋梨状好塩基球.(写 ③ 真.4) 9.1%と低率であった. 受身感作処理健康人好塩基球に生食水あるいはダニ抗原液を添加した際に比べて低率であるが(P<0.1),洋ともに20.0%と梨状および膨化状好塩基球は高率に認められ(P<0.3),反応性の亢進を認めた. 細胞表面超微構造:非受身感作処理好塩基球に対する,生食水,そば粉及びダニ抗原液添加のいずれも表面超微構造上特異な所見はほとんど認められな直径が約10∼12μ で,中央には比較的密に短かった.一方受身感作処理を行なった場合にはダニ桿状突起に覆われた核の隆起を有し,細胞辺縁は短抗原液添加で細胞膜欠損を示す好塩基球が観察され, 桿状突起が粗で,ガラス板上に付着膨化した膨化状細胞形態の成積とあわせると,ダニ過敏性気管支喘好塩基球.(写息患者にダニ抗原液を添加した際と同程度の変化が真5) 以上3種類の好塩基球について各種抗原添加別の出現頻度を検討した. 第3節アレルギー症における好塩基球の形態学第2項細胞表面超微構造について好塩基球の表面形態上の変化として次の3種類の所見が観察された. ② 的検討第1項そばアレルギー症患者についてそばアレルギー症患者末梢血好塩基球に生食水, ① 細胞表面の一部に半球状或いは逆円錐状の突起を有する好塩基球.(写認められ,好塩基球の反応性の獲得が示唆された. 真6, 7) 細胞表面の短桿状突起が粗になり種々の大きそば粉抗原10-1, 変化を検討した. 10-3稀釈液を添加した際の形態的 (Table 3) 細胞形態:生食水を添加すると観察好塩基球16個 736 小 Table 2 Frequency of basophils Table 3 Frequency of basophils 林 of each from 誠 morphology healthy of each and suface morphology from buckwheat はすべて球状好塩基球で,洋梨状および膨化状好塩 structure controls and surface allergy structure patients 小孔形成および細胞膜の広範に欠損した好塩基球は基球の出現は認められなかった.次にそば粉抗原液おのおの6.3%でを添加した際の観察好塩基球61個では球状好塩基球造上変化が著しかった. は31.1%と生食水添加に比べて有意に低率であるのに比し(P<0.O1),洋梨状及び膨化状好塩基球の出現率はそれぞれ27.9%, (P<0.05),反 41.0%と有意に高率であり応性の亢進が窺われた.さらに濃度について検討すると10-1稀釈液添加では45個の好塩基球のうち洋梨状が22.2%,膨が高率(P<0.01)では16個 %と化状は42.2%とあったが, の好塩基球のうち,洋梨状48.8%,膨同程度であり,し膨化状 10-3稀釈液添加で化状37.5 かも濃度差による細胞形態上の差異は認められなかった. 細胞表面超微構造:生食水添加では特徴ある所見あり濃度が高い程,細胞表面超微構第2項ダニ過敏性気管支喘息患者についてダニ過敏性気管支喘息患者の末梢血好塩基球にダニ抗原液を添加した際の形態学的変化を検討した. (Table 4) 細胞形態:生食水添加では観察好塩基球28個のうち球状好塩基球の出現率は85.8%と高率で,洋梨状および膨化状好塩基球の出現率は7.1%, 8.3%と率であったのに対し,ダニ抗原液の添加では58個の好塩基球のうち球状好塩基球の出現率は62.1%と率となり(P<0.05)洋の出現率は17.1%, 20.1%と生食水添加に比し有意を見出せなかったのに対し,そば粉抗原10-1稀釈液添加では,半球状隆起および小孔を形成する好塩基加抗原濃度別による検討では, 球はおのおの8.9%に,広個の観察好塩基球のうち洋梨状が11.4%,膨基球は31.1%に観察された.他方, 10-3稀釈液では 28.6%, 10-4稀低梨状および膨化状好塩基球に高率で(P<0.05),反範に細胞膜の欠損した好塩低応性の亢進を窺わせた.添 10-2稀釈液では, 35 化状が釈液では23個の好塩基球のうち洋梨免疫反応下における好塩基球の形態学的研究 Table 4 Frequency of each of basophils 状が26.1%,膨化状が8.7%で morphology from mite あり,高濃度の添加では膨化状好塩基球が高率に出現し(P<0.1),洋梨 allergy and surface 737 structure patients 基球の形態的変化特にその表面超微構造については明らかにされていない.今回著者の行なった走査型電子顕微鏡による観察の結果,ア状好塩基球は濃度による差異を認めなかった. トピー型気管支喘細胞表面超微構造:生食水添加では変化を思わせ息患者末梢血及び受身感作した健康人末梢血好塩基る所見が認められなかったのに対し,ダニ抗原添加球は特異抗原添加にし,上記位相差顕微鏡所見に類では半球状隆起を有する好塩基球は7.8%,小孔形成似した遊走能の亢進を示す洋梨状好塩基球及びガラ範な細胞膜欠損を呈す好ス板に付着膨化した膨化状好塩基球の高率の出現がを示す好塩基球は1.7%,広塩基球は5.2%といずれも少数観察された.しかし濃度別による出現頻度には特異なpatternは認め難い認められた. 好塩基球は種々の細胞内含有物質を含む細胞であものの,高濃度の添加で広範な細胞膜の欠損した好り20),こ塩基球がより高率に出現した. かは未だ問題を残.している21).黒れを分泌細胞とみなすことができるかどっ住22)は腺細胞の分泌様式を透過型電顕を用いて観察し, 第4章総括並びに考案ることを提唱している.即ちI型:全に分類す分泌, II型: 大離出型分泌, III型:小応させた際の形態学的変化の観察はShe1ley and Ju- 分泌, V型:透出型分泌である.このうちI型以外 hlin2)によるものが最初と思われる.その後,木村ら17) は部分分泌である.著者は走査型電子顕微鏡にて観は好塩基球脱顆粒試験を用いて抗免疫グロプリン添察された表面形態上の変化を,これらの分泌様式と加の際の好塩基球の形態変化を塗抹標本上で検討し対比させつつ検討を加えた結果,半球状或いは逆円ているが, Hastie18)及び佐藤19)の位相差顕微鏡に錐状突起は離出型分泌を示唆する所見と考え,小孔アトピー型患者の末梢血好塩基球に特異抗原を反離出型分泌, 5型 IV型:開口型よる観察に至って,それまで不明であった好塩基球の形成は開口型分泌を,広範な細胞膜の欠損は全分の動態及び脱顆粒の機序にも幾つかの新しい知見が泌を示すものと推察した. 加えられた.即ちHastieは特異抗原を,佐藤は抗ヒ山崎ら23), Andersonら24)はラット肥胖細胞に, 添加 Chan25)はモルモットの好塩基球に抗原添加後の形態し,その際の好塩基球の形態変化として,好塩基球学的変化を透過型電顕にて観察し,先ず細胞周辺部が運動亢進をきたし,或いは運動停止し膨化するこの顆粒が細胞外に放出されたあとに,空胞が形成さとを観察し,また同時に細胞内での顆粒の変化,小れ,隣接する顆粒限界膜がその空胞と癒合し,次々ト免疫グロブリン(anti-IgE及びanti-IgG)を顆粒の出現,顆粒の減少,空胞の出現と増大にも言と顆粒内容が放出されchannelを及している.脱顆粒については, Hastieは細胞外脱胞内部に入りこみ,い顆粒に否定的見解を取っているのに対し,佐藤は併報告した.ませて行なった微分干渉顕微鏡下にhand-shape様は顆粒内でheparin-protein 突形成し,次第に細わゆる連珠形成をすることをたThonら26), Uvnas27)はhistamine complexとイオン結合起より顆粒放出を認めたと報告している.しかし, しており,ひとたび細胞外に放出されると細胞外Na+ これらの観察にもかかわらず,脱顆粒を含めた好塩イオンと接触し,イオン交換により, histamineが遊 738 小離すると推察し,小孔の役割は,細の流入を招くことであるとし,顆林胞外Na+イオン誠好塩基球はtarget organであるアレルギー反応局所に集積すると考えられる.そして気管支粘膜に遊出粒とhistamineの放出は別個の機序で起こると説明している. Tizard した好塩基球はより高い濃度の抗原に暴露される結ら28)は抗原添加後のラット肥胖細胞を走査型電子顕果,各種の分泌型式により顆粒を放出して第2段階微鏡で観察し,細に進展し,さらに好塩基球の一部は第3段階に至る胞表面に著明なgranule 及び小孔の形成を認めている.ま compound extrusion たKesslerら29)はものと推察される.以上の反応機序は木村ら32)33)の 48/80添加の際のラット肥胖細胞を走査型報告した,気管支喘息の発作前で好塩基球が増加し, 電子顕微鏡で観察し,細胞表面の開口部の奥にさら発作後に減少する事実,あるいは喀痰中への好塩基に小孔観察されると報告し,細胞内脱顆粒あるいは球の出現の機転と一致して考えることができ,アレ channelのルギ/反応における好塩基球の反応機序の一部が, 形成の所見と推論しているが,今回のアトピー患者末梢血好塩基球についても,抗原添加に際し類似した所見を認めている.(写 stieら30)はRagweed に,特 allergyの異抗原を添加した際, 真10).最更に理解されたものと考えられた. 近Ha- 第5章患者末梢血好塩基球 exocytotic tiornを透過型電子顕微鏡で観察し,ま degranulaた,教の透過型電子顕微鏡所見を発表しており,今語健康人及び気管支喘息患者末梢血の好塩基球に特室の高橋ら31)もそばアレルギー症患者の好塩基球で,同結様回の著異抗原を添加した際の形態変化について走査型電子顕微鏡を用いて検討した. 1)健康人末梢血好塩基球に生食水,そば粉及びダ者の観察結果とともに,好塩基球の脱顆粒に開口型ニ抗原を添加した際にはいずれも球状好塩基球の出分泌が関与する可能性を示すものと考えられる. 現が高率で,表面超微構造上特徴ある所見は認めらまた, Hastie18)は前述の位相差顕微鏡による研究れなかった.一方受身感作処理好塩基球に特異抗原で好塩基球は部分分泌を行ない,顆粒放出後もcell を添加した際には,球状好塩基球に比し,洋梨状・ deathをきたさないと報告しているが,そばアレルギ膨化状両好塩基球の出現が高率で,表面超微構造上ー症にそば粉抗原を添加するが如き,抗原抗体反応が特は広範な細胞膜の欠損を示す好塩基球が認められた. に強い場合には,広範な細胞膜欠損を伴なう全分泌を示唆する好塩基球が観察され, cell deathをす直前の姿と考えられる結果であった.(写きた真11, 12) 2)そばアレルギー症及びダニ過敏性を有する気管支喘息患者では,生食水添加に際し球状好塩基球の出現率が高率で,表面超微構造上特徴のある所見を見出し得なかったのに対し,特異抗原を添加した際なお透出型分泌に関しての検討は走査型電子顕微には,洋梨状及び膨化状好塩基球の出現が高率に認鏡では観察が困難であり,併せて透過型電子顕微鏡められ,細胞表面超微構造上,半球状隆起,小孔のによる検討が必要であると考えられた. 形成,広範な細胞膜欠損の各所見を示す好塩基球が以上の結果から,著者はアレルギー反応に際して高率に観察された.特に小孔の形成を示す好塩基球惹起された抗原抗体反応の程度に従い,好塩基球のについては,肥胖細胞における開口型顆粒放出機序形態変化を次の3段階に区分できるものと考えていと類以した所見が観察された.また,広範な細胞膜る.即ち,第1段欠損を示す好塩基球は,抗原濃度の高い際に,出現階は運動亢進をきたし洋梨状を呈する好塩基球,第2段階は各種の部分分泌により顆粒を放出する好塩基球,第3段が高率であった. 階は著明に膨化して, ついには全分泌を起こしcell deathをきたす好塩基稿を終るにあたり,御指導御校閲を賜った恩師木村郁郎球である.第1段教授に深甚の謝意を表するとともに,終のみ,第2段第3段階は最も弱い反応で遊走能の亢進階はさらに強く持続する反応の際に, 階は非常に強い反応の際に,観と考えられる.従って,気察されるもの管支喘息において吸入抗原が気管支粘膜に到達し,さらに血管内に入った一部の抗原は濃度としては微量であるため,好は運動亢進をきたすが,顆謂basophil chemotactic 塩基球粒放出にまで至らず,所 factorの作用とあいまって, 指導を賜った高橋清助手に深謝します. 始御懇篤なる御免疫反応下における好塩基球の形態学的研究文 1. Ehrlich, P: Farbenanalytishe 739 Untersuchungen 献 zur Histologie und Klinik des Blutes, Hirschwand, Berlin, 1891. 2. Shelley, Nature 3.木 W. B. and Juhlin, L.: A new test for detecting 191, 1056-1058, 1961 . 村郁郎,谷み, 4.木 69: 崎勝郎:好 25∼28, 村郁郎,守 5. J. J. from Ishizaka, K. 6. ucocytes munol. 7. and 崎良知,谷崎勝郎:好 645∼648. reaction. 学のあゆ R.: donors. Ishizaka, Int. T.: 1187-1198, 塩基球および好酸球の適切な同時直接算定法と過敏指数に 1969 . patterson, allergic and 99, the basophil 1969 床病理17, Pruzansky, sensitivity; 塩基球及び好酸球の適切な同時直接算定法の考案とその臨床的評価,医谷欣明,西ついて,臨 anaphylactic Decrease in Arch. basophils Allergy Identification of ƒÁE after Appl. incubation Immunol. antibodies 38 as , with specific 522-526, a carrier of antigens of le- 1970. reaginic activity. J. Im- 1967. Ishizaka, K., Tomioka, H. and Ishizaka, T.: Mechanism of passive sensitization; I. presence of IgE and IgG molecules on human leucocytes. J. Immunol. 105, 1459-1467, 8. 1970. Polliack, A., Lampen, N., Clarkson, B. D. and de Harven, E.: Identification of human B&T lymphocytes by scanning electron microscopy. J. Exp. Med. 138, 607-624, 9. 1973. Polliack, A., Lampen, N. and de Harven, E.: Scanning electron microscopy of lymphocytes of known B and T derivation. In Proc. 7th Annual Scanning Electron Microscopy Symposium, ed. O. Johari, Chicago, Ill.: ITT Reserch Inst. 1974a, pp. 673-682. 10. Polliack, A., Fu, S. M., Douglas, S. D., Bentwich, Z., Lampen, N. and de Harven, E.: Scanning electron microscopy of human lymphocyte-sheep erythrocyte rossettes. J. Exp. Med. 140, 146-158, 1974. 11. Polliack, A.: Surface features of circurating human leukemic cells; Experience with 175 cases of leu- kemia examined by scanning electron microscopy. In Proc. 9th Annual Scanning Electron Microscopy Symposium. ed. O. Johari, Chicago, Ill.: ITT Reserch Inst. pp. 32-40, 1976. 12. Tanizaki, Y., Takahashi, K., Hosokawa, M., Ishibashi, K., Ono, H. Goda, Y., Nakamura, Y., Sasaki, Y., Kobayashi, M. and Kimura, I.: Purification of basophilic leucocytes from peripheral blood. Acta Haematbl. Jpn. 41, 705-708, 1978. 13. Levy, D. and Osler, A. G.: Studies of the mechanisms of hypersensitivity phenomena; XIV Passive se- nsitization in vitro of human leucocytes to ragweed pollen antigen. J. Immunol. 97, 203- 212, 1966. 14. Mazingue, C., Dessaint, J-P. and Capron, A.: [3H] serotonin release; an improved method to measure mast cell degranuration. Immunol. Methods, 21, 65-77, 1978. 15. Tsutsui, materials K., Kumon, 16. Anderson, electron 17.木 H., Ishikawa, H., and Tawara, for SEM by using of polycationic T. F.: Techniques microscopy. 村郁郎,谷 Trans. 崎勝郎,佐基球脱顆粒試験-臨 for preservation N. Y. Acad. 藤周一,高床免疫. 6, 橋清,上 865∼869, J.: Preparative substance of 3-dimensional Sci. 13, 130-137, 田暢男,斉 method layer. J. Electron structure for suspended Microsc. 25, in preparing biological 163-168, 1976 . specimens for 1951. 藤勝剛:アトピー型気管支喘息と好塩基球一好塩 1974. 18. Hastie, R.: The antigen-induced degranuration of basophil leucocytes from atopic subjects, studied by phase-contrast microscopy. Clin. Exp. Immunol. 8, 45-61, 1971. 19.佐藤周一:免 -971 20. 疫反応における気管支喘息患者好塩基球の生態観察に関する研究 .岡山医学会雑誌. 87, 955 , 1975. Ackerman, G. A.: Cytochemical Sci. 103, 376-384, 1963. properties of the blood basophilic granurocytes. Ann. N. Y. Acad . 740 21. 小 Parwaresh, M. R.: The Springer-Verlag, 22.黒住一昌:分 degranuration Berlin, 林誠 mechanism pp. 165-172. of blood basophils, In The Human Blood Basophil. 1976. 泌の形態学に関する電子顕微鏡的研究. Electron Microsc. 14, 1226, 1965. 23. Yamasaki, H., Fujita, T., Ohara, Y. and Komoto, S.: Electron Microscope studies on the release of histamine rat peritoneal mast cells. Arch Histol. Jpn. 31: 393-408, 1970. 24. Anderson, P., Slorach, S. A. and Uvnas, B.: Sequential exocytosis of storage granules during antigen -induced histamine release from sensitized rat mast cells in vitro . Acta Physiol. Scand. 88, 359-372, 1973. 25. Chan, B. S. T.: Ultrastructural changes in guinea pig bone marrow basophils durring anaphylaxis. Immunology 23, 215-224, 1972. 26. Thon, I. L. and Uvnas, B.: Degranuration and histamine release, two consecutive steps in the respon- se of rat mast cells to compound 48/80. Acta Physiol. Scand. 71, 303-315. 1967. 27. Uvnas, B: Mechanisms of mediator libelation with special reference to mast cells. In Proc. 9th European Congressof Allergologyand Clinical Immunology,ed. M. A. Ganderton, and A. W. Frankland, pitman Medical, pp. 63-71, 1974. 28. Tizard, I. R. and Holmes, W. L.: Degranuranuration of sensitized rat peritoneal mast cells in response to antigen, compound 48/80 and Polymixin B: A scanning electoron microscope study. Int. Arch. Allergy 46, 867-879. 1974. 29. 30. Kessler, S, and Kuhn, C.: Scanning 71-77, 1975. Hastie, 橋清,谷 atopic 村郁郎,谷 612, 33. subjects 崎勝郎,合医学と生物学, 32.木 microscopy R., Chir, B., Levy, D. A. and Weiss, L.: The cytes from 31.高 electoron 91, studied 田吉徳,木 261-265, 崎勝郎:気 by electoron 村郁郎:そ of mast antigen-induced microscopy. cell degranuration. degranuration Lab. Invest. 36, Lab. Invest. of basophil 173-182, 32, leuco- 1977. ばアレルギー症患者における好塩基球の電子顕微鏡的観察. 1975. 管支喘息における好塩基球の変動と発作閾値について.アレルギー, 19, 605∼ 1970. Kimura, I., Tanizaki, the sputum of patients Y., Saito, K., Takahashi, with bronchial athma. 写 K., Ueda, N. and Sato, S.: Appearance Clin. Allergy 真説 5: 95-98, 1975. 明写真1:好塩基球の同定.(光顕像)…(矢印)の細胞がメタクロマジーを呈する好塩基球. 写真2:好塩基球の同定.(走査電顕像)…(矢写真3:球状好塩基球.直径約6μ で表面は短桿状突起で覆われている. 写真4:洋梨状好塩基球.偽足を出し遊走能亢進を窺わせる. 写真5:膨化状好塩基球.直径約12μ でガラス板に付着膨化している. 写真6:半球状隆起を有する好塩基球. 写真7:逆円錐状の空起を有する好塩基球. 写真8:細胞表面に小孔を有する好塩基球. 写真9:細胞表面に数個の小孔を有する好塩基球. 印)は写真1と同一の好塩基球. 写真10:細胞表面の開口部の奥にさらに小孔が観察される好塩基球. 写真11:細胞膜が広範に欠損した好塩基球. 写真12:細胞膜が広範に欠損した好塩基球.小孔が細胞表面の各所に観察される. of basophils in 免疫反応下における好塩基球の形態学的研究小林写真1 写真2 誠論文附図 741 742 小小林写真3 写真4 林誠誠論文附図免疫反応下における好塩基球の形態学的研究小林写真5 写真6 誠論文附図 743 744 小小林写真7 写真8 林誠誠論文附図免疫反応下における好塩基球の形態学的研究小林写真9 写真10 誠論文附図 745 746 小小林写真11 写真12 林誠誠論文附図免疫反応下における好塩基球の形態学的研究 Morphological studies on human in immunological Part I. Scanning electron in basophils microscope challenged Department of Internal Fine morphological 8 atopic asthmatics electron microscopy The results were changes in blood --- 4 buckwheat after they observation of morphological with specific had allergy been changes antigens KOBAYASHI Medicine, Okayama University (Director: basophils reactions in vitro Makoto blood 747 Medical School, Okayama Prof. I. Kimura) basophils patients exposed were examined and 4 mite to specific in 3 healthy allergy patients controls and --- by scanning antigens. as follows. 1) Observation on cell morphology showed 3 different types of basophils; A) Spherical shaped basophils with short microvilli, B) Pear-shaped basophils with extended flag-like pseudo podia, C) 'Swollen' type basophils over glass-plates. 2) Investigations on surface structures demonstrated 3 different changes: a) Hemispheric projections or spindle-shaped processes on the cell surface, b) Irregular shaped pores among short rod-shaped microvilli, c) Ruptured cell membranes in marked swollen basophils. 3) Basophils in healthy controls did not show any changes of surface structures and were spherical when P. S. S., buckwheat and mite extracts were added. Similar results were obtained with basophils from atopic patients when P. S.S. were added. 4) Basophils from atopic patients, or basophils from healthy controls after passively sensitized with IgE rich serum, were pear-shaped or 'swollen' with surface structural changes.