タンパク質電気泳動用 先染めサンプルバッファー Instant-Bands EZ-Biolab社は電気泳動関連製品や組換えタンパク質を製造・販売する米国のメーカーです。 本品は、SDS-PAGEにおいてタンパク質を先染めする製品です。操作はサンプルバッファーを 本品に置き換えるのみで、SDS-PAGE後は染色操作をせずにトランスイルミネーター（UV， LED）でのバンドの確認が可能です。Instant-Bandsによる蛍光標識はタンパク質の移動度に影 響を与えません。また、バンド検出後はそのままメンブレンに転写し、メンブレン上で蛍光を確 認することも可能です。 1 サンプルバッファーを置き換えるだけのシンプル操作 電気泳動して、すぐにバンドを確認・染色操作不要・時間短縮 2 従来の泳動結果と変わりない泳動パターンを実現 3 そのままウエスタンブロットが可能 Instant-Bands 溶解した Instant-Bands CBB染色 Sample Buffer タンパク質サンプルと Sample Bufferを混合する タンパク質サンプルと Instant-Bandsを混合する Protein Sample Protein Sample 加 5分 熱 電気泳動 1.5時間 0分 菌体 抽出液 1 2 3 4 5 5分 90-100℃ 5min 1.5時間 染色・脱色 2~10時間 菌体 懸濁液 6 観 察 ゲルみえーるで撮影 1) Instant-Bandsを添付のResuspension Bufferで溶解する 2) Instant-Bandsとタンパク質サンプルを1：2 (volume) の割合で混合する 3) 90-100℃で5分間加熱する ※Whole cellや組織サンプルの場合は、加熱時間を10~15分に延長して下さい ※Bis-Trisゲルを使用する場合は、添付のEnhancing Bufferを20% (volume) 加えて下さい 4）電気泳動を行ない、観察する 菌体 懸濁液 菌体 抽出液 7 1 2 3 4 5 6 7 （1）UVトランスイルミネーター 0分 1 2 3 4 5 （2）CBB染色 6 1 4時間 2 3 4 5 6 Lane.1, 3, 5 : 一般的なサンプルバッファー , Lane.2, 4, 6 : Instant-Bands Lane.1,2：M.W. Markers (3μL/Lane) Lane.3,4：Whole E.Coli cells (4.5μL/Lane) Lane.5,6：Whole E.Coli cells expressed GST-ALDH fusion protein (4.5μL/Lane) UVトランスイルミネーターで観察後(1)、CBB染色を行った(2)。 Instant-Bandsを使用したレーンはUVトランスイルミネーターでのバンド確認が可能であった。 Instant-Bandsと一般的なサンプルバッファーを使用した場合では、同様の泳動パターンが得られた。 メンブレン ゲル ウエスタンブロット 転写 ブロッティング サンプル：Whole E.Coli cells expressed TGFa fusion protein(4.5μL/Lane) 抗体：Anti-TGFa Polyclonal Antibody メンブレンに転写後も蛍光は持続します ⇒ 染色不要で転写効率が確認できます。 引き続き、ウエスタンブロットを行うことも可能です。 キット構成とInstant-Bandsの溶解法 トライアル包装(100μL) Instant-Bands Resuspension Buffer Enhancing Buffer （Bis-Trisゲルにのみ使用） 1 vial (粉末) 1 vials 2 vials 溶解法：Instant-BandsをResuspension Buffer 100μLで溶解してください。 Regular Size (1mL) 1 vial (粉末) 1 vial 2 vials Double Size (1mL×2) 2 vials (粉末) 2 vials 2 vials 溶解法：Instant-BandsをResuspension Buffer 1000μLで溶解してください。 撮影装置とタンパク質量 検出可能な最低タンパク質量 撮影装置 Instant-Bands 高感度ゲル撮影装置 0.1-0.3 ng LED トランスイルミネーター 5 ng UVトランスイルミネーター 5-10 ng 銀染色 CBB染色 1-2 ng 25-50 ng 使用上のご注意 ※ Instant-Bandsの検出感度は、光源、撮影装置の設定、カメラ性能等により異なります。 ※ プラスチック製のゲルカセットに入れたままの場合、感度は低下します。 ※ UV トランスイルミネーターの場合、ゲルカセットから取り外す必要があります。 Instant-Bands 使用可能回数 1ウェルあたりの全量 溶解後のInstant-Bands : Protein Sample トライアル包装（100μL） Regular Size （1mL） Double Size（1mL×２） 6μl 12μl 18μl 2μL：4μL 4μL：8μL 6μL：12μL 50回 25回 16回 500回 250回 166回 1000回 500回 333回 200 KD 使用上のご注意 130 KD 110 KD ※分子量マーカーが必要な場合は、EZBiolab社の蛍光標識済みタンパク質分子量マーカー (カタログNo. 555-30091)をご使用になるか、未処理のマーカーを本品で標識してご使用下さい。 その他のプレステインマーカーや処理済みマーカーは使用できません。 700 KD 43 KD 36 KD コードNo.555-30091 30 KD （メーカーコード MKP0049) 蛍光標識済みタンパク質分子量マーカー 20 KD 14 KD 価格表 保存 コー ド N o . 品名 メ ー カ ー コー ド 553-30031 PFS001-TP 556-30021 PFS001-RP Instant-Bands(還元剤含有) 3 x Protein Sample Treatment Buffer 容量 トラ イ アル包装 (100μ L) 1キット Regular size (1mL) 550-30041 PFS001P Double size (1mL×2) Instant-Bands(還元剤不含) 3 x Protein Sample Treatment Buffer Regular size (1mL) 551-30071 PFS002P Double size (1mL×2) 蛍光標識済みタンパク質分子量マーカー 555-30091 MKP004 1キット トラ イ アル包装 (100μ L) 1キット 554-30061 PFS002-TP 557-30051 PFS002-RP 1キット 希望納入価格（円） 4,400 15,700 25,000 4,400 1キット 15,700 1キット 25,000 23,100 250μ l 使用上のご注意 ※ Instant-Bandsのマニュアルは、製品に添付されておりません。EZ Biolab社ホームページよりダウンロードをお願い致します。 URL：http://www.ezbiolab.com/file/Instant%20Bands%20user%20manual.pdf 和光純薬HPからもダウンロード可能です。 和光純薬 Instant-Bands で検索 関連製品 コー ド No . 品名 容量 希望納入価格（円） 140,000 80,000 200,000 290-33891 ゲルみえーる (LEDトランスイルミネーター) 1台 290-35231 ゲルみえーる用暗箱ｅｘ １台 297-35241 ゲルみえーる用暗箱ｅｘ セット 1セット ゲルみえーる （LEDトランスイルミネーター） FAQ １．使用できないサンプルはあるか？ 低いpH条件下では染色効率が低下します。pH5未満のサンプルは、pH7~9に調整することを推奨します。 ２．Instant-Bandsの安定性は？ 溶解前のInstant-Bands（粉末）は非常に安定な物質です。 Resuspension Bufferで溶解後のInstant-Bandsは、-20℃で12ヶ月、4℃で12~15週間、室温で2~3週間保存可能です。 室温で2~3週間保存した場合、還元剤の影響により、バンドのシャープさ、明るさが低下することがあります。 その際はDTTを添加して下さい（DTTの最終濃度は20mM以下）。DTT以外の還元剤も使用できます。 ３．翻訳後修飾はInstant-Bandsに影響を与えるか？ 影響はありません。 ４．Instant-Bandsで染色したサンプルは、ウエスタンブロットに使用できるか？ 使用できます。Instatnt-Bandsは、ウエスタンブロットの結果に影響を与えません。 ５. 使用できないアプリケーションはあるか？ 蛍光ダイの結合により電荷が変化するため。等電点電気泳動、 Native-PAGE には使用できません。 また、Instant-Bandsで染色したサンプルは、蛍光dyeの付加によって僅かに分子量が変化しているので、 MS解析やシーケンス解析には適しません。 ６．4℃で保存した時に見られる沈殿は何か？ 沈殿はSDSです。室温で溶かしてからご使用下さい。 ７．Enhancing Bufferは何に使用するか？ Bis-Trisゲルの場合に使用します。タンパク質バンドをよりシャープにします。 ８．Whole cellや組織サンプルを使用すると、バンドが薄くなる場合があるのはなぜか？ タンパク質の変性が足りないことが原因と考えられます。 完全にタンパク質を変性させるため、加熱時間を1０~15分に延長して下さい。 ９．サンプルはあるか？ トライアル包装をご用意しております（有料）。 いつものCBB染色と脱色 この時間が待ちきれない～ 今なら、販売開始にともない、トライアル包装を 通常希望 納入価格 4,400円 お申込みはWEBから 和光純薬 WEB申込み 限定価格 Instant-Bands 3,000円 でご提供します。 で検索 ①WEB申込み ②弊社営業担当または代理店からご連絡・製品のご注文 ③製品の受け取り、お試し ④評価アンケートに回答 数量限定のため、無くなり次第終了となります。 ●本文に記載しております試薬は、試験・研究用にのみ使用されるもので、「医薬品」、「食品」、「生活用品」などとして使用できません。 ●希望納入価格には消費税等が含まれておりません。 ●希望納入価格は予告なく変更する場合がございますがご了承下さい。 1 7 1 0 2 開 01J
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