阻害剤カクテル 製品名 ホスファターゼ阻害剤カクテル ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 Pick up! 09 100倍濃縮 各種ホスファターゼに対し阻害活性を発揮するオールインワンタイプ ホスファターゼ阻害剤カクテル(EDTAフリー) Pick up! 09 100倍濃縮 金属キレートアフィニティー精製･金属依存性タンパク質の研究に プロテアーゼ阻害剤カクテル(動物細胞抽出物用) Pick up! 10 動物細胞からの抽出時に最適化 プロテアーゼ阻害剤カクテル(一般用)(100倍濃縮) Pick up! 10 プロテアーゼ阻害剤カクテル(EDTAフリー)(100倍濃縮) Pick up! 10 価格 特別価格 TOPICS-148 07574-61 1 ml 15,000 9,000 SP − TOPICS-148 07575-51 1 ml 15,000 9,000 25955-24 1 ml 7,800 4,680 SP − TOPICS-148 25955-11 5X1 ml 28,000 16,800 04080-24 1 ml 6,750 4,050 04080-11 5X1 ml 25,000 15,000 03969-21 5X1 ml 25,000 15,000 03969-34 15X1 ml 69,500 41,700 Pick up! 09 − TOPICS-148 − TOPICS-148 Pick up! 10 タンパク質研究用試薬 『ホスファターゼ阻害剤カクテル』シリーズ ● ● ● ● 容量 − SP 金属キレートアフィニティー精製･金属依存性タンパク質の研究に 製品番号 SP SP 通常のタンパク質を扱う操作に 関連広報物 『プロテアーゼ阻害剤カクテル』シリーズ ● ターゲットの異なるプロテアーゼインヒビターを混合 ● 貴重なタンパク質をプロテオリシスから保護 ● 一般用、動物細胞抽出物用、EDTA フリーの 3 種類を品揃え リン酸化タンパク質を各種ホスファターゼから保護 濃度調整が容易（サンプル調製用の緩衝液に加えるのみ） タンパク質定量に影響しない 各種ホスファターゼに対し阻害効果を発揮するオールインワンタイプ 〈阻害剤組成〉 ※ EDTA フリー 成分 製品名 一般用 （04080） ● 金属依存性タンパク質・カルシウム依存性タンパク質への適応可 ● 金属キレートアフィニティー精製への適応可 AEBSF アプロチニン E-64 ロイペプチン EDTA ベスタチン ペプスタチン EDTA フリー （03969） 動物細胞抽出物用（25955） 〈比較データ〉 図3. PP1活性の阻害率 （基質：p-ニトロフェニルりん酸) 〈各インヒビターがターゲットとするプロテアーゼ〉 プロテアーゼインヒビター ターゲットプロテアーゼ 100% 100% 80% 80% アプロチニン（ウシ肺由来） 60% 60% E-64 システインプロテアーゼ 40% ロイペプチンヘミ硫酸塩一水和物 システインプロテアーゼ、トリプシン様プロテアーゼ B社 B♫ 阻害率 阻害剤 EDTAフリー なし 07575-51 A社Ⅰ A社Ⅱ 図2. ホスファターゼ活性(HL-60細胞破砕液)の 阻害率（基質：蛍光標識p-Tyrペプチド) 阻害率 図1. p-Thr抗体を用いたHeLa細胞 中のりん酸化タンパク質の検出 40% 20% ふっ化 4-(2- アミノエチル ) ベンゼンスルホニル塩酸塩（AEBSF） セリンプロテアーゼ エチレンジアミン四酢酸二水素二ナトリウム二水和物（EDTA） メタロプロテアーゼ 20% 0% EDTA含有 EDTAフリー A社Ⅱ 07574-61 07575-51 0% B社 セリンプロテアーゼ、エステラーゼ EDTA含有 EDTAフリー A社Ⅱ 07574-61 07575-51 C社 ベスタチン アミノペプチダーゼ ペプスタチン A アスパラギン酸プロテアーゼ 3 タンパク質定量用試薬 製品名 ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 プロテインアッセイビシンコニン酸キット BCA法に基づくタンパク質定量試薬 プロテインアッセイCBBクリーンアップキット Pick up! 11 CBB法の測定妨害物質の界面活性剤、 塩類、 変性剤を簡単に除去 プロテインアッセイCBB溶液(Ready to Use) Pick up! 12 希釈不要なready to useタイプのタンパク質定量試薬 プロテインアッセイCBB溶液(5倍濃縮) Bradford法に基づくタンパク質定量試薬 使用時の濾過不要で室温保存が可能 製品番号 容量 価格 特別価格 SP − TOPICS-141 06385-00 1 kit 14,000 8,400 SP − BULLETIN-L-126 11611-60 1 kit 9,300 5,580 SP − BULLETIN-L-126 11617-71 1L 14,500 8,700 29449-44 100 ml 5,000 3,000 SP − BULLETIN-L-62 29449-15 500 ml 20,000 12,000 Pick up! 11 Pick up! 12 妨害物質除去キット『プロテインアッセイ CBB クリーンアップキット』 タンパク質定量用試薬『プロテインアッセイ CBB 溶液（Ready to Use）』 ● わずか 5 分の実操作で妨害物質を除去 ● Ready to use タイプで操作の手間や時間を短縮 ● ランニングコストを低減 ■ SDS-PAGE 用試料緩衝液に溶解しているタンパク質の定量 1.4 ■ マイクロプレートスタンダードアッセイ法により BSA を定量 1.2 1.2 コントロール：精製水中の BSA を測定 CBB溶液(Ready To Use) A社 B社 1 除去なし：試料緩衝液中の BSA を除去処理無しで測定 0.8 本製品使用：試料緩衝液中の BSA を本製品使用後測定 0.6 A 社製品使用：試料緩衝液中の BSA を A 社製品使用後測定 0.4 0.2 0 0 0.2 0.4 0.6 BSA (mg/ml) 0.8 1 試料緩衝液： 62.5mM Tris-HCl pH6.8, 2%SDS, 10% グリセリン 5％ 2- メルカプトエタノール , 0.005% BPB NET Abs 595nm Abs 595nm 1 0.8 2 0.6 R = 0.9816 2 R = 0.9781 2 R = 0.9843 0.4 0.2 0 妨害物質である還元剤、界面活性剤を共に含む試料緩衝液中のタンパク質（BSA）を測定した結果を示します。A 社除 去キット使用時には、定量性が得られませんでしたが、本製品では定量性が得られており、除去効果が確認できまし た。その他の妨害物質の実施例は BULLETIN-L-126 をご参照ください。 12 関連広報物 0 0.2 0.4 0.6 0.8 BSA (mg/ml) 1 1.2 1.4 CBB 溶液（Ready to Use）は、他社製品と同様の測定範囲を示します。 2016 ∼ 17 年 【冬】 バイオキャンペーン 期間：2016 年 11 月 1 日 （火） ∼ 2017 年 3 月 17 日 （金） タンパク質変性・可溶化剤 製品名 ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 CHAPS SP 難溶性タンパク質研究用 ジチオスレイトール SP 分子生物学用 Nuclease tested ジチオスレイトール SP SH基タンパク質研究用 分子生物学用 Nuclease and Protease tested 2-メルカプトエタノール 分子生物学用 Nuclease tested 1- - -オクチル-β-D-グルコピラノシド -オクチル-β-D-チオグルコピラノシド RIPAバッファー Pick up! 13 タンパク質研究用 トリス(2-カルボキシエチル)ホスフィン塩酸塩 〔TCEP-HCl〕 − − − 07957-51 1g 2,500 1,500 07957-64 5g 10,200 6,120 07957-22 25 g 36,000 21,600 14128-46 100 mg 2,500 1,500 14128-91 1g 8,200 4,920 14128-04 5g 24,000 14,400 14128-62 25 g 35,000 21,000 14112-81 1g 3,600 2,160 14112-94 5g 9,500 5,700 14112-52 25 g 33,000 19,800 26,000 15,600 − 17353-25 500 g SP 毒 − 21438-82 25 g 2,600 1,560 25535-11 1g 8,100 4,860 25535-24 5g 29,000 17,400 25535-82 25 g 114,300 68,580 25543-01 1g 6,300 3,780 25543-14 5g 24,700 14,820 08714-04 1 set 13,000 7,800 07277-61 1g 8,200 4,920 07277-16 10 g 34,000 20,400 35940-65 500 g 5,950 3,570 35940-81 1 kg 9,550 5,730 − − − − SP − BULLETIN-L-105 SP − TOPICS-155 生化学用 SP 分子生物学用 Nuclease and Protease tested 特別価格 − Pick up! 14 尿素 価格 − SP 難溶性タンパク質研究用 − 容量 SP SP 難溶性タンパク質研究用 − 製品番号 Pick up! 13 タンパク質研究用試薬 グアニジン塩酸塩 関連広報物 − 3 − Pick up! 14 細胞溶解液『RIPA バッファー』 ジスルフィド結合を切断する還元剤『TCEP-HCI』 ● ● ● ● ● ● ● ● 調製済み プロテアーゼ阻害剤混合済み 免疫沈降に悪影響を与える可能性のある SDS を別添 Protein Assay Bicinchoninate Kit で定量可能 毒物非該当 還元力が強い 無臭 広範囲の pH で使用可能 ■ 免疫沈降 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 ■ 還元力 6 ■ 熱安定性 還元力の比較(0.5mM 水溶液) 熱安定性の比較(5mM 水溶液) 100 100 抽出条件 Jurkat Cell 1.0×107個に対して、 RIPA Buffer 1mlを氷上で15分間処理 サンプル Jurkat Cell 一次抗体 抗βアクチン(C4)(マウス),モノクローナル抗体 （#sc-47778） 二次抗体 抗マウスIgG(ヤギ)HRP標識 （#sc-2005） 左図 Sil-Best Stain Oneで染色 右図 Chemi-Lumi One Lで検出 免疫沈降は、 SDS（-） の方が効率よく行えています。 本品では免疫沈降時に悪影響を与えるとされる SDS を別添とし、SDS を含まない条件でも ご使用いただけます。 残存率(%) Lane 1：SDS(-)RIPA を用いてタンパク質抽出した溶液 2：SDS(+)RIPA 3：Protein Markers(10×) (#29458-24) を用いてタンパク質抽出した溶液 4：SDS(-)RIPA 5：SDS(+)RIPA から免疫沈降した溶液 6：アガロースコントロール 80 還元力(%) ←β-Actin 90℃ 30min 37℃ 5days 80 60 40 60 40 20 20 0 0 TCEP DTT 2ME 還元力：TCEP ＞ DTT ＞ 2ME ※ pH未調整 ※ TCEPの還元力を100%として比較 TCEP DTT 2ME 熱安定性：TCEP ＞ 2ME ＞ DTT ※ pH未調整 ※ 各々の試薬の調製時の還元力を100%として 保存後に残存する還元力の割合を比較 【還元力・熱安定性の比較における還元力の測定方法】 サンプル 2ml （熱安定性の比較に用いたサンプルは測定前に 0.5mM に希釈） ↓ 5mM 4, 4'- ジチオジピリジン 100μl ↓ 5 分間反応 吸光度測定（324nm） 13 グッドバッファー 製品名 ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 HEPES SP 分子生物学用 Nuclease and Protease tested HEPES − SP グッドバッファー MOPS MOPS PIPES 分子生物学用 Nuclease and Protease tested タンパク質研究用試薬 PIPES グッドバッファー 容量 価格 特別価格 17546-34 100 g 16,700 10,020 17546-05 500 g 52,000 31,200 17514-86 100 g 6,500 3,900 17514-15 500 g 23,400 14,040 23438-64 100 g 9,900 5,940 23438-35 500 g 33,000 19,800 23415-54 100 g 7,000 4,200 23415-25 500 g 26,000 15,600 − − SP グッドバッファー 製品番号 − − SP 分子生物学用 Nuclease and Protease tested 関連広報物 − − − SP − − 28137-54 100 g 8,700 5,220 SP − − 28104-16 100 g 8,200 4,920 関連広報物 製品番号 容量 − 09422-81 1L 関連広報物 製品番号 容量 02179-14 5 ml 02179-72 25 ml 02198-64 5 ml 02198-22 25 ml 緩衝液 製品名 ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 トリス-グリシン緩衝液(10倍濃縮)(pH 8.3) SP − 価格 特別価格 3,900 6,500 抗体精製用アフィニティーゲル 製品名 3 ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 コスモゲル® Ig-アクセプト プロテイン A コスモゲル® Ig-アクセプト プロテイン G SP Pick up! 15 − SP Pick up! 15 − 価格 特別価格 46,000 27,600 124,000 74,400 53,000 31,800 150,000 90,000 BULLETIN-L-111 BULLETIN-L-111 Pick up! 15 免疫グロブリン精製用クロマトグラフィー担体『コスモゲル® lg- アクセプト』シリーズ ■ 使用例 免疫沈降法による 35S 標識 SEL1L の精製 1 2 3 4 データご提供：京都大学 ご研究者 目的物質 ★ HEK293細胞内で過剰発現させた35S標識SEL1Lを免疫沈降法により精製することで各製品の評価を行った。 Lane: 1.ProteinA（A 社） 2.COSMOGEL® Ig-Accept Protein A 3.ProteinG（A 社） 4.COSMOGEL® Ig-Accept Protein G 実験結果の評価は目的物質のシグナル強度（赤四角 1、3、5、7）からバックグラウンド（赤四角 2、4、6、8）を差し引いて比較することで行った。 <使用者の評価> 目的物質のシグナル強度について Ig-Accept を A 社品と比較した結果、A 社品と遜色ない結果が得られた。また、ProteinG（A 社）では低分子側に非特異的な バンド（★）が検出されたが、Ig-Accept では検出されなかった。 ■ 製品仕様 担体名称 COSMOGEL® Ig-Accept Protein A COSMOGEL® Ig-Accept Protein G リガンド Protein A Protein G 粒子サイズ マトリックス 推奨線流速 限界圧 供給状態 14 50∼150 μm 4% 架橋アガロース 26 cm/h 3.6 ps（ i 0.25 bar） 50%（v/v）スラリー（20% エタノール含有） 2016 ∼ 17 年 【冬】 バイオキャンペーン 期間：2016 年 11 月 1 日 （火） ∼ 2017 年 3 月 17 日 （金） タグ融合タンパク質精製用アフィニティーゲル 製品名 ® コスモゲル GST-アクセプト ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 Pick up! 16 SP GSTタグ融合タンパク質精製用担体 − 関連広報物 BULLETIN-L-109 製品番号 容量 価格 特別価格 09277-56 5 ml 11,000 6,600 09277-72 25 ml 39,000 23,400 09277-14 100 ml 124,000 74,400 08612-34 5 set 4,400 2,640 ディスポミニカラムセット − アフィニティー精製に便利なPP、 PE製のミニカラムです(全長8cm、 内容量5ml)。 コスモゲル® GST-アクセプトと合わせてご利用ください。 − − Pick up! 16 『コスモゲル® GST- アクセプト』 ● 優れた耐久性 ● 優れたコストパフォーマンス ■ GST タグ融合タンパク質の Thrombin によるカラム内消化 Thrombin （#33842-44）無添加の場合は発現タンパク質がそのまま回収されていますが、Thrombin 添加の場合は PBS 画分 （Lane7） に S タグ -His タグが溶出しています。 このことから、 カラム内消化も問題なく行えていることがわかります。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 kDa 45 ＊1 31 ＊3 21.5 14.4 ＊2 6.5 タンパク質研究用試薬 66.2 Lane 1. タンパク質マーカー （#29458-24） 2. 大腸菌ライセート 3. フロースルー画分 4. Thrombin (-) PBS fraction 5. Thrombin (-) glutathione fraction 6. フロースルー画分 7. Thrombin (+) PBS fraction 8. Thrombin (+) glutathione fraction 9. 大腸菌ライセート 10. タンパク質マーカー ＊1: GSTタグ - Hisタグ - Sタグ - Hisタグ ＊2: Sタグ - Hisタグ ＊3: GSTタグ - Hisタグ （BL21 （DE3） pLysS）lysate transformed with GST-His（pET-41b （+） ） サンプ ル ： 結合緩衝液：Phosphate Buffered Saline（pH7.4） （#27575-31） 溶出緩衝液：10mM Glutathione, 50mM Tris-HCl, pH8.0 3 タグ切断用酵素 製品名 Turbo3C Protease ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 Pick up! 17 Acc HRV3Cプロテアーゼ TurboTEV Protease Pick up! 17 Acc TEVプロテアーゼ − − 関連広報物 製品番号 容量 価格 特別価格 09081-06 100 units 8,000 5,600 09081-64 1000 units 44,000 30,800 08461-14 1000 units 19,500 13,650 INFORMATION-424 INFORMATION-424 Pick up! 17 『タグ切断用酵素』 ■ 製品仕様 TurboTEV Protease 分子量 認識と切断部位 活性の定義 濃度 使用条件 形状 Turbo3C Protease 52kDa 47kDa Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓Gly Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro 1unit は認識配列が付いたタグタンパク質 3μg を 30℃、1 時間で 1unit は認識配列が付いたタグタンパク質 100μg を 4℃、16 時間 85% 以上が切断される酵素量 で 95% 以上が切断される酵素量 20,000units/ml 2,000units/ml 温度：4-37℃、pH 6.5-8.5 で使用可能 25mM Tris-HCl(pH8.0), 50mM NaCl, 1mM TCEP, 50% Glycerol 15 ヒスチジンタグ融合タンパク質染色試薬 製品名 His-ディテクト イン-ゲル ステイン ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 Pick up! 18 電気泳動用 ヒスチジンタグ融合タンパク質染色試薬 SP − 関連広報物 製品番号 容量 価格 特別価格 08500-94 100 ml 4,000 2,400 08500-65 500 ml 16,800 10,080 BULLETIN-L-133 Pick up! 18 『His- ディテクト イン - ゲル ステイン』 ● ● ● ● ● 1 時間で His-tag 融合タンパク質を確認可能 染色と洗浄のみの簡単な操作 約 30 pmol の His-tag 融合タンパク質を確認可能（30kDa のタンパク質では 900ng に相当） 蛍光イメージアナライザー、トランスイルミネーターなどの機器不要 本製品で染色後 CBB 染色、銀染色も可能 DHFR-His を発現させた大腸菌のライセートを段階希釈して SDS-PAGE を行った後、本製品で His-tag 融合タンパク質の染色を行いました（A） 。 染色後、同一ゲルでウェスタンブロッティングを行い、化学発光法（B）で His-tag 融合タンパク質を 検出しました。 本製品での染色結果がウェスタンブロッティングでの検出結果と一致していることがわかります。 A B タンパク質研究用試薬 マーカー； M1：ビオチン化マーカー、二次抗体反応時に Streptavidin Horseradish Peroxidase Conjugate （#02517-61）を加えて検出。 M2：プレステインドマーカー ←DHFR-His ウェスタンブロッティング条件； 一次抗体：Anti-6xHis（#04428） 二次抗体：Anti-Mouse IgG(Goat), HRP Conjugate （Santa Cruz #sc-2005） 化学発光検出：Chemi-Lumi One L（#07880） ×16 ×8 ×4 ×2 M1 M2 ×16 ×8 ×4 ×2 M1 核酸分解酵素 製品名 TurboNuclease 3 16 タンパク質調製の際に核酸を切断し粘性の低減に利用されるエンドヌクレアーゼ ﾒｰｶｰ ･規格 毒劇物 Acc − 関連広報物 製品番号 容量 INFORMATION-424 09082-54 10000 units 2016 ∼ 17 年 【冬】 バイオキャンペーン 期間：2016 年 11 月 1 日 （火） ∼ 2017 年 3 月 17 日 （金） 価格 17,000 特別価格 11,900
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