浅原孝之 - 東海大学総合医学研究所

TOKAI UNIVERSITY
THE
INSTITUTE OF MEDICAL SCIENCES
「再生アソシエイト細胞による血管再生療法の開発
増田治史
Masuda Haruchika
再生医療科学准教授
プロジェクトリーダー：浅原孝之
Asahara Takayuki
基盤診療学系再生医療科学教授
【研究目的】
研究代表者：浅原孝之 ( 基盤診療学系再生医療科学教授 )
研究分担者：増田治史 ( 基盤診療学系再生医療科学准教授 )
研究協力者：宮崎幸造（再生医療科学特定研究員）
志津野朋子（再生医療科学研究技術員）
佐藤敦子（再生医療科学研究技術員）
東海大学伊勢原研究推進部生命科学統合支援センター
細胞組織科学部門・動物実験部門・分子科学部門
1997 年、浅原らにより発見された骨髄由来の生体内血管内皮前駆細胞（endothelial progenitor cell=EPC）の血管再生能力に注目し、
東海大学再生医療科学と神戸先端医療センターとの共同研究、情報交換を密にして、虚血性疾患（心筋梗塞、重症下肢虚血性疾患）
を対象とした単離した自己末梢血 EPC（CD34+ 細胞）移植血管再生療法の開発を行ってきた。現状の問題点は、治療対象となる患者
自己の EPC は、数的にも質的にも、その能力が低下しているため移植しても十分な効果が得られないこと、CD34+ 細胞単離における
図 1：血管再生効果は、末梢血液細胞（PBMNC）投与に比べて再生アソシエイト細胞（QQMNC）で非
常に高いことが確認される。
マウス血管 ( 緑色蛍光 ) にヒト血管 ( 赤色蛍光 ) が再生アソシエイト細胞由来で形成されていることが確認
でき（A,B）、定量的にも血管再生能力が高いことが示された（C,D）。
手技の習得の必要性が生じることである。そこで、近未来的臨床応用を目的として、生体外無血清培養による EPC の数及び血管再生能
を向上させる培養法 (Quality and Quantity culture= QQ) 及びその QQ 培養細胞の移植血管再生療法を開発した（2012 年；取得特
許第 4964121 号）。さらに、今後、患者負担及び手技の簡便化を図ることを目的として、非純化 EPC である末梢血単核球の QQ 培養
法の開発及び培養細胞の移植血管再生療法の開発を行った。
Selected Papers.
【結果と考察】
非純化末梢血単核球 (PBMNC) の QQ 培養細胞 (QQC) と培養前 PBMNC の血管再生能を in vitro 及び in vivo　assay 系により比較
した。
１）結果１；in vitro EPC コロニーアッセイでは、分化型 EPC コロニー産生能が格段に向上した。これは、QQ による PBMNC の血
管再生能が飛躍的に向上することを意味する。
２）結果２；in vivo 下肢虚血ヌードマウスモデルへの細胞局所移植実験において、QQC は PBMNC に比較して有意な血流改善が認
められた。また、組織学的検索では、血管再生効果と共に、抗炎症効果による線維化の現象も確認された。
３）考察；これらの結果は、PBMNC の生体外培養 (QQ) により血管再生能の向上を達成でき、新たな血管再生療法になりうることが
期待される ( 特許申請済み )。
今後、学内外共同研究者とともに、脳梗塞、び心臓虚血性疾患を対象とした臨床研究を申請、実施を目指す。
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Matsubara Y, Fukushima M, Nada A, Losordo DW, Asahara T, Okita Y,
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Endpoint Selection and Timing in Patients With Critical Limb Ischemia.
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4.　Tanaka R, Masuda H, Kato S, Imagawa K, Kanabuchi K, Nakashioya C,
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6.　Nakamura T, Torimura T, Iwamoto H, Kurogi J, Inoue H, Hori Y, Sumie
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Ueno T, Oho K, Okamura T, Okuda S, Kawamoto A, Ii M, Asahara T,
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8.　Fukui T, Mifune Y, Matsumoto T, Shoji T, Kawakami Y, Kawamoto A, Ii
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再生医学部門
Regenerative Medicine
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