Wird die Nachweisbarkeit der Samen

Molekularer Nahrungsnachweis
bei Laufkäfern
Molekularer Nahrungsnachweis
bei Laufkäfern
Corinna Wallinger, Daniela Sint, Rebecca Mayer &
Michael Traugott
Trophic & Applied Ecology, Institute of Ecology
University of Innsbruck, Austria
Hintergrund
Pictures: www.extension.iastate.edu
Jäten
Sojafeld
Unkraut
Herbizideinsatz
Hintergrund
• Weltweit massive Ertragsverluste wegen
Unkraut & Schädlingsbefall
• Effektive Unkrautvernichtung mittels
Pestiziden
• Negativer Einfluß auf Umwelt & Gesundheit
• Laufkäfer fressen Unkrautsamen &
Schädlinge
biologische Kontrolle
Ökosystemserviceleistung
Hintergrund
• Samenfraß schwierig direkt zu beobachten
• Welche Samen werden von wem gefressen?
• Bevorzugte Samen in Fütterungsexperimenten
≠ die im Feld tatsächlich gefressenen
Molekulare Analyse
Molekularer Ansatz
trnL
• Pflanze
• DNA-extraktion
• PCR
Nachweis
Pflanzen-DNA
Molekularer Ansatz
Molekularer Ansatz
Gefressener Samen
Molekularer Ansatz
trnL
Gefressener Samen
• DNA-extraktion
• PCR
Nachweis
Samen-DNA
Molekularer Ansatz
Gefressener Samen
Regurgitieren
Foto: F. Baier
Molekularer Ansatz
• Regurgitat
Nachweis
Samen-DNA
• DNA-extraktion
• PCR
Voruntersuchungen
• Kann man Pflanzen DNA nach
Samenfraß nachweisen?
Fütterungsexperimente Sommer 2013
www.eu-insekten.de
www.stopa.cso.pl
Glatthalsiger Buntgrabläufer
Erdbeersamenlaufkäfer
Poecilus versicolor (Sturm, 1824)
Harpalus rufipes (De Geer, 1774)
Voruntersuchungen
• Man kann Pflanzen DNA bis min 72 h
nach Samenfraß nachweisen
Wallinger et al. (2015) Detection of seed DNA in regurgitates of granivorous
carabid beetles. Bulletin of Entomological Research 105: 728-735.
Voruntersuchungen
• Man kann Pflanzen-DNA bis min. 72 h nach
Samenfraß nachweisen
• Unterscheidet sich diese Nachweisbarkeit
bei Pflanzenarten?
Fütterungsexperimente Sommer 2014
Mit Ferialpraktikanten im Rahmen der FFG Förderung „Talente“:
Matthias Labeck & Markus Neurauter
Voruntersuchungen
• Man kann Pflanzen-DNA bis min. 72 h nach
Samenfraß nachweisen
• Unterscheidet sich diese Nachweisbarkeit
bei Pflanzenarten?
Fütterungsexperimente Sommer 2014
Voruntersuchungen
• Die Nachweisbarkeit bei Pflanzenarten
ist unterschiedlich
100
100
100
Detektionsrate Samen-DNA
80
80
80
60
60
60
40
40
40
20
20
20
0
0
0
16
32
64
96
0
0
128
100
Greiskraut
Weißklee
Hirtentäschel
16
32
64
96
128
0
16
32
64
Raygras
Löwenzahn
80
80
80
60
60
60
40
40
20
20
Ampfer
20
0
0
0
0
16
32
64
96
128
128
100
100
40
96
0
16
32
64
96
128
0
16
32
Ausdehnung des Verdauungszeitraums auf 5 Tage
64
96
128
Voruntersuchungen
• Man kann Pflanzen-DNA min. 128 h nach
Samenfraß nachweisen
• Diese Nachweisbarkeit ist bei Pflanzenarten
unterschiedlich
Aktuelle Fragestellung
• Man kann Pflanzen-DNA min. 128 h nach
Samenfraß nachweisen
• Diese Nachweisbarkeit ist bei Pflanzenarten
unterschiedlich
• Wird die Nachweisbarkeit der SamenDNA von der Aufnmahme tierischer
Beute beeinflusst?
Aktuelle Fragestellung
• Wird die Nachweisbarkeit der SamenDNA von der Aufnmahme tierischer
Beute beeinflusst?
Fütterungsexperimente Sommer 2015
Mit Ferialpraktikantinnen im Rahmen der FFG Förderung „Talente“:
Michelle Gruber & Marcel Schön
Material & Methode
• Wird die Nachweisbarkeit der SamenDNA von der Aufnmahme tierischer
Beute beeinflusst?
Fütterungsexperimente Sommer 2015
+
Material & Methoden
1h
0
8h
16
32
64
96
128 h
Material & Methoden
1h
0
16
32
64
96
128 h
16
32
64
96
128 h
8h
1h
0
8h
Ergebnisse
Raygras
100
100
8h
Detection frequency [%]
1h
80
80
60
60
40
40
20
20
0
0
0
16
32
64
96
128
0
16
32
64
96
128
Bei Abstand von 8 h zwischen Mahlzeiten sind
Detektionsraten für Mehlwurm-DNA höher als bei 1h
Ergebnisse
Hirtentäschel
100
100
Detection frequency [%]
1h
8h
80
80
60
60
40
40
20
20
0
0
0
16
32
64
96
128
0
16
32
64
96
128
Bei Abstand von 8h zwischen Mahlzeiten sind
Detektionsraten für Samen-DNA niederer als bei 1h
Zusammenfassung
• Man kann Pflanzen-DNA min. 128 h nach
Samenfraß nachweisen
• Nachweisbarkeit von Samen-DNA wird
beeinflusst von:
− Käferart
− Pflanzenart
− Aufnahme tierischer Beute
Zusammenfassung
Entwicklung eines optimierten nicht invasiven
Protokolls für den molekularen Nachweis der
Nahrungswahl bei Laufkäfern
Schaffen der Voraussetzungen zur Analyse
der Mechanismen, welche der Nahrungswahl
von Laufkäfern im Feld zu Grunde liegen
Ausblick
Trophic assessment of ecosystem services
provided by carabid beetles in agricultural land
350 k€
3 Jahre Laufzeit
Material & methods
Location of traps near Aldrans (760 m a.s.l.)