in serum
Psychofarmaca
H. Meijer , M . Ribbink, J . Wieferink en B. Drese
4.0 Werkwijze
Klinisch Farmaceutisch & Toxicologisch Laboratorium
•
+
Pipetteer in e e n r o n d b o d e m b u i s a c h t e r e e n v o l g e n s :
GELRE ziekenhuizen. Postbus 9014, 7300 DS, Apeldoorn
1.00 m l s e r u m
I. Algemeen
100 ui 1 M n a t r i u m c a r b o n a a t o p l o s s i n g
100 jil istd-oplossing
3.00 m l h e x a a n
Bepaling v a n e e n aantal p s y c h o f a r m a c a in s e r u m m.b.v.
HPLC.
•
Schud gedurende 5 minuten.
M o n s t e r v o o r b e w e r k i n g m i d d e l s e e n d u b b e l e vloeistof/
•
Centrifugeer 5 m i n u t e n bij 4 0 0 0 r p m
vloeistof extractie. Detectie m.b.v. D A D en/of f l u o r e s c e n -
•
Vries in bij -40 ° C
tie detector.
•
Breng d e o r g a n i s c h e fase o v e r in e e n s c h o n e r o n d bodembuis.
2. Chemicaliën en standaarden
2.1
Reagentia
REAGENS
Leverancier
A r t i k e l nr.
Acetonitril
Riedel d e H a e n
00692
Methanol
Riedel d e H a e n
34860
•
V o e g t o e 2 0 0 jil extractievloeistof
•
Schud gedurende 5 minuten
•
Centrifugeer 5 m i n u t e n bij 4 0 0 0 r p m
•
Vries in bij -40 ° C
•
V e r w i j d e r d e o r g a n i s c h e laag.
•
Injecteer v a n d e w a t e r i g e laag 2 0 u.l.
Hexaan
Riedel d e H a e n
34913
5.0
Fosforzuur
Merck
573
M e t b e h u l p v a n ratio's p i e k h o o g t e m o n s t e r / s t a n d a a r d .
Berekening
Natriumcarbonaat
Merck
6392
Nonylamine
Merck
806845
6.0
Kaliumhydroxyde
Merck
5033
Paroxetine
A q u a Dest
Braun
-
Kwantificering
Validatieparameters
2.2 Eluens
•
V o e g t o e aan é é n liter a q u a dest 1.00 m l g e c o n c e n t r e e r d fosforzuur en 1.00 m l n o n y l a m i n e .
•
Breng o p p H = 2 . 8 m e t e e n 1 0 % K O H - o p l o s s i n g .
(oplossing B)
•
M e n g t w e e delen B m e t é é n deel Acetonitril.
2.3
•
Extractievloeistof
Breng 50 m l e l u e n s o p p H = 2 . 0 0 m e t gec. fosforzuur.
2.4 Interne standaard 1
•
ca. 0.2 m g protriptyline/l a q u a dest.
Interne standaard 2
•
ca. 2 m g d o x e p i n e / l a q u a dest.
3.0 Apparatuur
Omschrijving
Type
HPLC\DATA-systeem
ThermoQuest\PC1000
HPLC-pomp
ThermoQuest\P2000
HPLC-autosampler
ThermoQuest\AS3000
HPLC-DAD
ThermoQuest\6000LP
Fluorescentie detector
Jasco FP 1520
HPLC-kolom
P l a t i n u m E P S 10cm,3)um,4.6 ID
Koude-thermostaat
J u l a b o FP50
Schudapparaat
Stuart Scientific SB1
Centrifuge
S i g m a 4-1S
Paroxetine
Fluvoxamine
Kwantificering X
Lineair bereik
Corr.coef.
Citalopram
Amitriptyline
Kwantificering X
: 240
Lineair bereik
: 2 5 - 6 0 0 u.g/1
Corr.coef.
: 0.9997
Nortriptyline
nm
F[GOF(1,10)]
>9999
F[(LOF(4,6)]
1.11

4660Eclipse リーフレット